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Artículo de método

Un modelo de rata de hipoperfusión leve intrauterina con microcoil de transcatheter estenosis

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DOI:

10.3791/56723

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7 de enero de 2018

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En este artículo

Resumen

Leve hipoperfusión intrauterino fue producido por estenosis de la arteria con microcoils metálicos envueltos alrededor de las arterias uterinas y ováricas en ratas en el día embrionario 17. Este procedimiento produce hipoperfusión prenatal y restricción del crecimiento intrauterino.

Resumen

Hipoperfusión, isquemia intrauterina es una de las principales causas de restricción del crecimiento intrauterino fetal, parto prematuro y bajo peso al nacer. Mayoría de los estudios de este fenómeno se han realizado en cualquiera de los dos modelos con isquemia severa intrauterina o modelos con gradiente grado de hipoperfusión intrauterina. Ningún estudio se ha realizado en un modelo de hipoperfusión intrauterino suave uniforme (MIUH). Dos modelos se han utilizado para estudios de MIUH: un modelo basado en la ligadura de la sutura de ambos lados de la arcada arterial formado con las arterias uterinas y ováricas, y un modelo transitorio basado en recorte las arterias ováricas bilaterales y aorta tener permeabilidad. Los dos modelos de roedores de MIUH tienen algunas limitaciones, por ejemplo, no todos los fetos sufren MIUH, dependiendo de su posición en el cuerno uterino. En nuestro modelo MIUH, todos los fetos son sometidos a un nivel comparable de hipoperfusión intrauterina. MIUH fue alcanzado por una estenosis leve de todos cuatro arterias alimentando el útero, es decir, las arterias uterinas y ováricas bilaterales.

Estenosis arterial fue inducida por microcoils metálicos envueltos alrededor de las arterias de alimentación. Producir estenosis arterial con microcoils nos permitidas controlar, optimizar, y reproducir la disminución del flujo sanguíneo con muy poca variabilidad entre animales y una tasa de mortalidad baja, lo que permite la evaluación precisa. Cuando microcoils con un diámetro interno de 0,24 mm fueron utilizados, el flujo sanguíneo en la placenta y el feto estaba ligeramente disminuido (aproximadamente el 30% desde el nivel de la estenosis en la placenta). La descendencia de nuestro modelo MIUH demuestra claramente larga duración alteraciones en los resultados de las pruebas neurológicas, neuroanatomical y comportamiento.

Introducción

Los recién nacidos con restricción del crecimiento intrauterino (RCIU) (también conocido como restricción del crecimiento fetal) (peso al nacer < 10º percentil para la edad gestacional), parto prematuro (nacido en < 37 semanas de gestación), o bajo nacimiento representan peso (< 2500 g) casi el 10% de los recién nacidos de 2,3. Muchos de estos niños presentan problemas neurológicos tales como parálisis cerebral y trastornos del desarrollo (p. ej., trastorno por déficit de atención con hiperactividad (TDAH) y trastornos del aprendizaje) 3,4

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Protocolo

Todos los experimentos fueron realizados según protocolos aprobados por el cuidado de animales experimentales y uso de la nacional Cerebral y Centro Cardiovascular, Suita, Japón.

1. prepare los siguientes animales y materiales para cirugía MIUH

  1. Preparar ratas de Sprague-Dawley preñadas tiempo gestacional día 17, es decir, embrionario día 17 (E17). Pesos promedio de las presas son 307.0 ± 40,7 g (media ± SD, n = 9).
  2. Preparar microcoils metálicos; diámetro interno mm 0,24, hecho de acero recubierto de oro.
  3. Preparar todos los materiales según la tabla de materiales.

2. prep....

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Resultados

Después de aplicar microcoils a todas las arterias del útero, la alimentación, es decir, las arterias uterinas y ováricas bilaterales, todos los fetos son sometidos a niveles comparables de hipoperfusión. La aplicación de microcoils con un diámetro interno de 0,24 mm causa leve estenosis de las arterias, causando una leve disminución en el flujo sanguíneo a la placenta y fetos (figura 3; aproximadamente el 30% desde el nivel de la estenosis en la placenta, ve.......

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Discusión

El microcoil de transcatheter estenosis de las arterias ováricas y uterinas en ambos cuernos uterinos produce hipoperfusión intrauterino consistente y reproducible en todas las placentas y fetos. El nivel de hipoperfusión puede modificarse usando microcoils con diferentes diámetros interiores. Crías de rata nacidos de una presa en la que se ha realizado la estenosis de la arteria con microcoils 0,24 mm de diámetro interior demuestran retraso del crecimiento intrauterino y parto prematuro (ver referencia 1 para más detall.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por el programa de intercambio de investigación de FY 2013 entre JSPS, CNRS, JSP KAKENHI concesión número 26860858 y la Fundación de investigación de Neurociencia Narishige. Agradecemos a los Drs. Mariko Harada-Shiba y Kyoko Shioya discusiones útiles. Agradecemos a Mari Furuta, Mutsumi Sakamoto, Ritsuko Maki y Dr. Emi Tanaka excelente asistencia técnica.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Microscopio estereoscópico
anestesia de isoflurano
Caja
Almohadilla
Pañal 30x40 cm
Espuma depilatoria o afeitadora
Solucióndesinfectante de yodo
Gasa 10x20 cm 
Paño quirúrgico de 45x45 cm con abertura redonda de 5 cm de diámetro
Botella de spray con etanol para la desinfección
Bastoncillo
de algodón Pinzas con puntas
Pinzas con puntas
Tijeras
Bisturí quirúrgico, el tamaño de la hoja es de 27 mm de largo (n.º 10, Axel, AS ONE Corporation, Osaka, Japón)
sutura quirúrgica
Microbobinas metálicas; diámetro interior 0,24 mm, de acero recubierto de oro (SAMINI Co. Ltd., Shizuoka, Japón)
Sutura de seda 4-0
Suero fisiológico estéril (0,9% cloruro de sodio)
de agua caliente
Jeringas de plástico (50 ml) y agujas (18 G)
Máquina dede inducción de anestesiatérmicagrandes y romasfinas en ánguloAguja de Baño

Referencias

  1. Ohshima, M., et al. Mild intrauterine hypoperfusion reproduces neurodevelopmental disorders observed in prematurity. Sci Rep. 6, 39377(2016).
  2. Specified Report on Vital Statistics in FY2010, Ministry of Health, Labour and Welfare, Japan. , Available from: http://www.mhlw.go.jp/english/database/db-hw/FY2010/live_births.html

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Reimpresiones y permisos

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