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Artículo de método

Grabaciones simultáneas de potenciales de campo Local Cortical, Electrocardiograma, electromiograma y respirar a ritmo de una rata libremente móvil

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DOI:

10.3791/56980

2 de abril de 2018

En este artículo

Resumen

Este estudio presenta un método para la grabación simultánea de potenciales de campo local en el cerebro, electrocardiogramas, electromyograms y respirar las señales de una rata libremente móvil. Esta técnica, que reduce los costos experimentales y simplifica el análisis de datos, contribuye a la comprensión de las interacciones entre el cerebro y órganos periféricos.

Resumen

Monitoreo de la dinámica fisiológica del cerebro y tejidos periféricos es necesario para abordar una serie de preguntas acerca de cómo los controles del cerebro cuerpo funciones y órganos internos ritmos cuando los animales están expuestos a desafíos emocionales y cambios en su condiciones de vida. En general los experimentos, las señales de diferentes órganos, como el cerebro y el corazón, son registrados por sistemas de grabación independientes que requieren múltiples dispositivos de grabación y diferentes procedimientos para el procesamiento de los archivos de datos. Este estudio describe un nuevo método que puede controlar simultáneamente Bioseñales eléctricas, incluyendo decenas de potenciales de campo locales en varias regiones del cerebro, electrocardiogramas que representan el ritmo cardíaco, electromyograms que representan despierto / contracción muscular relacionados con el sueño y señales, en una rata libremente móvil de respiración. La configuración de la grabación de este método se basa en una matriz de micro-unidades convencional para grabaciones potencial del campo local cortical en el que se acomodan decenas de electrodos, y las señales obtenidas de estos electrodos están integradas en un solo cuadro eléctrico montado en la cabeza del animal. Aquí, este sistema de grabación fue mejorado para que las señales de los órganos periféricos también se transfieren a una placa de interfaz eléctrico. En una sola cirugía, electrodos por separado primero se implantan en las partes apropiadas del cuerpo y las zonas cerebrales. Los extremos abiertos de todos los electrodos entonces se sueldan a los canales individuales de la Junta eléctrica encima de la cabeza del animal para que todas las señales pueden ser integrados en la placa eléctrica única. La colección de todas las señales en un solo dispositivo, que reduce los costos experimentales y simplifica el procesamiento de datos, porque todos los datos pueden ser manejados en el mismo archivo de datos permite conectar esta tarjeta a un dispositivo de grabación. Esta técnica ayudará a la comprensión de los correlatos neurofisiológicos de las asociaciones entre órganos centrales y periféricos.

Introducción

El sistema nervioso central controla Estados del cuerpo en respuesta a cambios ambientales varios, y este control se representa típicamente como cambios en la frecuencia cardíaca, frecuencia respiratoria y contracciones musculares. Sin embargo, pocos estudios han probado cómo tales factores fisiológicos periféricos están asociados con la actividad cortical. Para solucionar este problema, es necesario un método de grabación a gran escala para el monitoreo de Bioseñales eléctricas de los tejidos centrales y periféricos. En la corteza cerebral, las señales (LFP) del potencial de campo local extracelularmente son registradas por electrodos que se insertan en los tejidos c....

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Protocolo

Todos los procedimientos con sujetos animales fueron realizados según las directrices de los NIH para el cuidado y uso de animales.

1. preparación de la matriz de impulsión Micro Integrativa

  1. Crear una matriz de micro-unidades para grabaciones de LFP corticales como se describe en otra parte1,2,3. Deja al menos 6 agujeros metálicos abiertos en un tablero del interfaz del electrodo (BEI) para uso como canales de ECG/EMG/BR que están conectados a los cables de bioflex como se describe en 1.2.
  2. Cortar un alambre de bioflex en 6 pieza....

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Resultados

Este método puede capturar simultáneamente señales bioeléctricas de múltiples órganos que representan la actividad neuronal del cerebro, pulso, ritmo de respiración, contracciones del músculo esquelético (figura 1). Figura 4 proporciona datos representativos de la grabación de una rata libremente móvil que fue alimentándose libremente en una caja rectangular (25 x 40 cm2). El conjunto de datos de ejemp.......

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Discusión

Para entender cómo el cerebro modula los niveles de actividad periférica y vice versa, métodos para capturar simultáneamente Bioseñales eléctricas en varias partes del cuerpo de grabación a gran escala son necesarios. Este estudio describe un procedimiento quirúrgico y un sistema de grabación para el monitoreo de potenciales de campo local cerebral, ritmo cardiaco, la magnitud de la construcción de músculo y tasas respiratorias, que han sido mejoradas en un sistema de grabación que se utiliza para registros extracelulare.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por Kaken-Hola (17 H 05939; 17 H 05551), la Fundación de Nakatomi y la Fundación Memorial de Suzuken.

....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Alambre de conexión FEP trenzado de acero inoxidable  Cooner Wire Company, Chatsworth, CA AS633Alambre Bioflex
EIB-36-PTBNeuralynx, Inc., Bozeman, MTEIB-36-PTB
EIB Cereplex  M Roca Negra  Microsystems, Salt Lake City, UTSede digital
Cereplex Direct Roca Negra   Microsystems, Salt Lake City, UTSistema de adquisición de datos
UEW alambre magnético de poliuretano Oyaide.com, Tokio, JapónUEW 0.14mm 20m Alambre esmaltado
SD-102Narishige, Tokio, JapónSD-102Taladro de alta velocidad
Minimo ONE SERIES ver.2Minitor Co.,Ltd, Tokio, JapónC2012Taladro de alta densidad Fuente de alimentación 
Provinice 250 mLShofu Inc., Kyoto, Japón213620136Cemento dental
Anestesiante para animales pequeños Biomaquinaria, Chiba, JapónTK-7 
Clorhidrato de buprenorfinaSigma-Aldrich, St. Louis, MOB7536-1MLAnalgésico
IsofluranoDS Pharma Animal Health, Osaka, Japón  Isoflu 250mL
Vaselina, Blanco Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japón224-00165 Pomada veterinaria 
  Alginato de sodioNacalai tesque, Kyoto, Japón31131-85
Cloruro de calcio dihidratadoWako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japón031-00435 
Tornillo de acero inoxidable M1.0× 4.0 MonotaRO, Hyogo, Japón42617504Tornillo de acero inoxidable para electrodos BR
Tornillo de acero inoxidable M1.4× 3.0MonotaRO, Hyogo, Japón42617687Tornillo de acero inoxidable para electrodos y anclajes g/r
Anestesiante

Referencias

  1. Kloosterman, F., et al. Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Drive Fabrication. JoVE. (26), e1094(2009).
  2. Nguyen, D. P., et al. Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly. Journal of Visualized Experiments : JoVE

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