Method Article

Construcción de un hiperimpulsor mejorado del tetrodo múltiples de grabación Neural a gran escala en comportarse ratas

DOI:

10.3791/57388

⸱

May 9th, 2018

 ,  ,  , 
1Department of Neuroscience, Baylor College of Medicine

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Presentamos la construcción de un hiperimpulsor 3D imprimibles con dieciocho tetrodos independientemente ajustables. El hiperimpulsor está diseñado para registrar la actividad cerebral en comportarse libremente las ratas durante un período de varias semanas.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Monitoreo de los patrones de actividad de una gran población de neuronas durante muchos días en animales despiertos es una técnica valiosa en el campo de la neurociencia de sistemas. Un componente clave de esta técnica consiste en la colocación precisa de múltiples electrodos en regiones cerebrales deseadas y el mantenimiento de su estabilidad. Aquí, describimos un protocolo para la construcción de un hiperimpulsor 3D imprimible, que incluye dieciocho tetrodos independientemente ajustables y está diseñado específicamente para en vivo grabación extracelular neuronal en comportarse libremente las ratas. Los tetrodos a los microdrives o pueden ser avanzados individualmente en varias regiones del cerebro a lo largo de la pista, o pueden utilizarse para colocar una matriz de electrodos en un área más pequeña. Los tetrodos múltiples permiten un examen simultáneo de action potentials de docenas de neuronas individuales, así como potenciales de campo local de las poblaciones de neuronas en el cerebro durante el comportamiento activo. Además, el diseño proporciona 3D más sencillo elaborar software que puede modificarse fácilmente para diferentes necesidades experimentales.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

En el campo de la neurociencia de sistemas, los científicos estudian los correlatos neurales subyacentes a los procesos cognitivos como la navegación espacial, memoria y toma de decisiones. Para este tipo de estudios, es fundamental para monitorear la actividad de muchas neuronas individuales en comportamiento animal. En las últimas décadas, se hicieron dos importantes avances para satisfacer las necesidades experimentales de grabación extracelular neuronal en animales pequeños1,2,3. Primero fue el desarrollo de la tetrodo, un paquete de cuatro microhilos utilizada para registrar la actividad neuronal de neuronas simultáneamente1,2,4. Las amplitudes de señal diferencial de actividad a través de los cuatro canales de un tetrodo permite el aislamiento de la actividad de neuronas individuales de muchas células simultáneamente registrado5. Además, la naturaleza flexible de los microhilos permite una mayor estabilidad de la tetrodo minimizando el desplazamiento relativo entre el tetrodo y la población celular. Tetrodos ahora son ampliamente utilizados en lugar de un electrodo individual para muchos estudios del cerebro en varias especies, incluyendo roedores1,2,6, primates7y8de insectos. En segundo lugar el desarrollo de un hiperimpulsor llevaba tetrodos independientemente móviles múltiples, que permite el monitoreo simultáneo de la actividad neural de grandes poblaciones de neuronas de grabación de múltiples localizaciones3, 9,10,11,12.

La disponibilidad de un dispositivo de grabación multi-tetrodo fiable y asequible para los pequeños animales es limitada. El hiperimpulsor clásico, desarrollado inicialmente por Bruce McNaughton13, se ha utilizado con éxito para grabaciones neurales en comportarse libremente las ratas en muchos laboratorios en las últimos dos décadas9,10,14, 15. sin embargo, por razones técnicas, los componentes originales necesarios para construir la unidad de McNaughton ahora son muy difíciles de conseguir y no son compatibles con interfaces de adquisición de datos recientemente mejorada. El otro diseño bien aceptado de hiperimpulsor requiere los microdrives para individualmente handcrafted, que podría producir resultados inconsistentes y consumir mucho tiempo12. Para grabar la actividad de los nervios de varias regiones del cerebro en ratas comportarse, hemos desarrollado un nuevo hiperimpulsor stereolithographic tecnología. Intentamos satisfacer los siguientes requisitos: (1) el nuevo hiperimpulsor debe permitir desplazamiento preciso de tetrodos en el cerebro y proporcionar grabación estable de varias regiones de destino; (2) el hiperimpulsor nuevo debe ser compatible con el sistema quickclip magnético desarrollado recientemente para permitir la conexión fácil; y (3) el nuevo hiperimpulsor puede ser reproducido con exactitud con materiales fácilmente disponibles. Presentamos una técnica para construir el hiperimpulsor para imprimir 3D que contiene dieciocho tetrodos independientemente móviles, basados en el diseño de McNaughton. En el protocolo, se describen los detalles del proceso de fabricación del nuevo hiperimpulsor, que hemos utilizado con éxito para registros potenciales de acción de la solo-neurona y los potenciales de campo local de las cortezas entorrinal postrhinal y medial durante semanas en una libre rata de comportarse durante las tareas de forrajeo naturales.

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Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. estereolitografía de modelos 3D

  1. Utilice técnicas stereolithographic para imprimir el hiperimpulsor piezas y accesorios. Cada hiperimpulsor está compuesta por dieciocho lanzaderas, dieciocho traslados de pernos y cada uno de los otros pedazos de plástico (figura 1).
    Nota: Los accesorios no son parte del hiperimpulsor pero son necesarios para la construcción de un hiperimpulsor.

2. preparación de accesorios (figura 2).

  1. Preparación de la canastilla de microdrive (Figura 2).
    1. Limpiar y ampliar los agujeros más pequeños y los agujeros más grandes de la persiana en la parrilla con una broca de 0,71 mm (0,028") ø y ø mm 0,84 (0.033") broca, respectivamente.
    2. Cortar una varilla de soldadura de 0,89 mm (0.035") de ø 17 mm segmentos largos, alrededor de ambos extremos e inserte cada varilla de guía en la ø mm 0,84 (0.033") los agujeros en la bandeja, dejando 11,5 mm exterior (a ras con las varillas roscadas).
    3. Colocar seis 0-80 roscada, 15,88 mm (5/8") tornillos de cabeza plana larga abajo en las ranuras de la rejilla. Asegúrese de que las barras de guía y varillas roscadas son rectas y paralelas entre sí. Llene el espacio restante en las ranuras con cemento dental diluido. Aire seco en una mesa durante 15 minutos.
    4. Pegar las varillas de soldadura y tornillos en el bastidor con super fina del pegamento y seque al aire durante 15 minutos.
  2. Preparación de la estación base (Figura 2E).
    1. Enrosque los cuatro orificios con una toma de 2-56 y utilice tornillos de nylon largo de 4.76 mm (3/16") 2-56, para garantizar la base en la estación, si es necesario.
  3. Preparación de la herramienta de torneado (Figura 2F).
    1. Hilo de rosca del agujero de la manija con un tap de 4-40. Inserte la punta mecanizada en la ranura en la manija y asegure con un tornillo de Copa larga 4-40, 4,76 mm (3/16").
  4. Preparación del soporte del hiperimpulsor (Figura 2).
    1. El orificio del tornillo del hilo de rosca con un tap de 8-32. Use un tornillo de 9.52 mm (3/8") largo nylon 8-32, para asegurar el hiperimpulsor cuando esté en uso.
  5. Preparación de la barra de posicionamiento complejo (Figura 2 H).
    1. Del hilo de rosca el tallo desde el lado con el agujero más grande (arriba) con un grifo de 8-32 a una profundidad de unos 7 mm. hilo de rosca de los agujeros más pequeños (seis en la parte superior, 18 en la parte inferior) con un toque de 0-80. Ampliar el agujero central en la parte superior con una broca de ø 4,76 mm (3/16"), si es necesario.
    2. Monte el vástago en la parte superior, con un ø de 8-32, 4,76 mm (3/16"), 6,35 mm (1/4") largo tornillo de hombro. Fije la parte inferior a la cima con 0-80, 6,35 mm (1/4") tornillos largos cuando esté en uso.

3. preparación de los componentes de hiperimpulsor (figura 3).

  1. Preparación de la tuerca de hiperimpulsor (Figura 3A).
    1. Usando el soporte de la tuerca (Figura 2D), enrosque la tuerca con una llave de 3/8-24 tocando fondo hasta que quede suave.
  2. Montaje de la base de hiperimpulsor (Figura 3B).
    1. Limpiar y ampliar los agujeros en la base utilizando brocas diferentes tamaños (doce tierra alambre aberturas (anillo interno): ø 0,61 mm (0,024"), los dieciocho tetrodo agujeros (medio aro): ø 0,66 mm (0.026") primero y luego ø 0,71 mm (0.028 "); el 18 Guía de varilla agujeros ciegos (anillo externo): ø 0,84 mm (0,033")).
    2. Enrosque los dos agujeros en la parte superior del núcleo y los restantes ocho ciegos hoyos (cuatro en el lado, cuatro en la parte inferior) con un toque de 0-80. Usar un grifo de tocando fondo de los agujeros ciegos.
    3. Crear hilos de rosca externos en la base de la base utilizando un dado de 3/8-24. Ajustar correctamente el dado para la tuerca de hiperimpulsor sobre la rosca nueva.
    4. Dependiendo de la cantidad de tierra cables desea insertar varios segmentos largos de 6 mm de tubería metálica de calibre 23 (cánulas) en los agujeros del alambre de tierra en la base, les pega si es necesario. Presentar los extremos de las cánulas de alambre de tierra hasta que esté al ras con la parte exterior del núcleo y limpiar las cánulas con un alambre de acero 0,30 mm (0,012") de ø.
    5. Colocar 18 0-80, 15,88 mm (5/8") cabeza de tornillos de cabeza plana larga hacia abajo en las ranuras en la base. No doble los tornillos ni dañar las roscas durante este proceso.
    6. Usando la varilla de complejo y la estación base de posicionamiento, posición 18 segmentos de 17 mm de ø de 0,89 mm (0.035") barra de soldadura sobre los agujeros de la varilla de guía en la base y les martillo abajo a nivelarse con los tornillos (unos 5 mm).
    7. Corregir las posiciones de las barras de soldadura y tornillos si es necesario, apriete el tornillo de hombro central y los alrededores seis tornillos en la barra de posicionamiento complejo para garantizar las direcciones hacia el exterior de las varillas en la base. Atornille la tuerca sobre el núcleo (con la barra de posicionamiento complejo) y montar la base en el soporte de hiperimpulsor para permitir la fácil colocación bajo un estereoscopio.
    8. Rellenar las ranuras con cemento dental diluido para asegurar los tornillos a la base y permiten que el aire de secado 15 minutos rellenar las ranuras 2-3 en un momento antes el cemento dental es demasiado gruesa. Raspe cualquier exceso de cemento dental en la base para mantener un ajuste correcto con el escudo.
    9. Pegar los tornillos y las barras en la base con pegamento super delgado, permiten que el aire de secado de 15 minutos.
  3. Asamblea de lo microdrive (Figura 3).
    1. Limpiar y ampliar los dos orificios exteriores en la lanzadera con los pedacitos de taladro (orificio más pequeño: ø taladro de 0,61 mm (0,024") poco; un agujero más grande: ø 0,89 mm (0,035") broca).
    2. Inserte el tornillo de la lanzadera en el soporte del perno base. Preste atención a la orientación. Cierre la tapa del soporte de perno, sujete firmemente y pase lentamente a través del agujero en la tapa con llave 0-80. Pulse 2 - 3 veces hasta que quede suave.
    3. Inserte el tornillo de transporte en el traslado desde el lado con la abertura más pequeña. Coloque la lanzadera perno complejo boca abajo en la base de la estación de Asamblea de microdrive.
    4. Cortar un segmento de 15 mm de calibre 23 metal tubo liso ambos extremos y coloque el tubo sobre el orificio de 0,61 mm (0,024") ø, guiado por la ranura en la tapa de la estación. Martillo de la cánula en el orificio hasta el extremo superior quede a ras con la tapa de la estación.
    5. Retire la mitad externa de la extremidad superior de la cánula con una rueda de lijar. Limpiar la cánula con un alambre de metal ø 0,30 mm (0,012"). Pegue la cánula en la lanzadera usando el pegamento super delgado, asegurándose de no pegar el perno de transporte para el traslado y el aire seco durante 15 minutos.
    6. Preparar por lo menos dieciocho microdrives, prueba el microdrive en el estante de microdrive. Asegúrese que el perno de transporte puede girar sin problemas en el transporte y que el microdrive toda se mueve libremente a lo largo de la longitud de la varilla roscada.
  4. Preparación de la columna central (Figura 3D).
    1. Lijar la parte superior e inferior de la columna central hasta plana, si es necesario. Los dos agujeros en la columna central del hilo de rosca con llave 0-80. Inserte una tuerca hexagonal 0-80 (3,18 mm (1/8 pulg) de ancho, 1,19 mm (3/64 ") alto) en cada ranura.
  5. Preparación de la tapa del hiperimpulsor (Figura 3E).
    1. Con unas pinzas no magneticas, pegar cuatro imanes (3 mm de diámetro, 1 mm de espesor) en cuatro pozos, emparejando a los polos N y S en el tablero de la interfaz de electrodo.
  6. Montaje de las cánulas guía en un paquete (Figura 3F).
    1. Lugar 18 30 calibrador, cánulas de pared delgada (ID) 0,19 mm, 0,0075" en ø 2,29 mm (0.09") tubos de termocontracción (3-5 mm de largo, espaciados a lo largo del paquete por 5-10 mm). Hacer todas las cánulas ras uno con el otro en un extremo del paquete.
    2. Encogimiento de los tubos de termocontracción usando una pistola de calor hasta que el paquete quede ajustado. Apriete el paquete suavemente a la forma deseada (ovalado o redondo). Confirme que todas las cánulas en las posiciones correctas con no torcer, travesía, o flexión.
    3. Marcar las áreas para soldar en las cánulas. La parte unsoldered debería ser 26 mm de longitud, mientras que la parte soldada debe ser 5-10 mm. mover la reducción tubos a las marcas de soldaduras para prevenir la propagación.
    4. Flujo se aplica a un área de soldado y la soldadura mientras gira el paquete. Enfriar a temperatura ambiente durante al menos 1 min repetir este paso para la soldadura de la misma área dos veces más. Lisa la parte soldadas por soldadura sin aplicar material fundente y relleno. Enfriar a temperatura ambiente durante al menos 1 minuto.
    5. Corte el paquete a la longitud adecuada con un disco de diamante a la máxima velocidad, Polaco ambos extremos para ajustar la longitud (unsoldered parte: 26 mm, soldado parte: 5-10 mm como se desee). Limpiar las cánulas de guía con un alambre metálico de ø 0,18 mm (0,007") bajo un estereoscopio.
  7. Preparar los tetrodos. Procedimientos similares se han descrito8,16,17 .
    1. Ajuste la altura de la barra horizontal de la T y la posición del agitador magnético, para que el brazo horizontal en la Cruz de la barra de la T está directamente sobre el centro del agitador magnético. Gancho de uno de los extremos de un gancho en S en el centro de una barra de agitación magnética pequeña, luego pegarlos juntos. Limpie el tetrodo haciendo espacio con aire comprimido y toallitas de etanol.
    2. Extremos del círculo los dos de un pedazo de tetrodo solo alrededor de 40 cm de longitud del alambre juntos, después asegúrela con un pedazo de cinta de cobre.
    3. Agarre el círculo de alambre por la cinta de cobre. Coloque el extremo opuesto de la cinta en el brazo horizontal de la barra de la T de cobre. Bajar la cinta de cobre suavemente (mientras el otro está todavía en la barra de la T), torcer una vez y colocar la cinta de cobre en la barra de T. El círculo de tetrodo es ahora en una configuración de ocho ("∞") con la cinta de cobre sentado en la cima de la Cruz de la barra horizontal.
    4. Mantenga la cinta de cobre en la barra de T con una mano suavemente. Con la otra mano, enganchar el extremo libre del gancho S (con una agitación magnética conectada al otro extremo) a través de la parte inferior del círculo de alambre tetrodo, soltar el gancho en S suavemente y dejarla enderezar los cuatro cables por el peso del gancho S.
    5. Ajuste la altura de la barra horizontal hasta la parte inferior del gancho en S es aproximadamente 1 cm encima del centro de la placa del agitador magnético.
    6. Doblar el borde de la cinta de cobre hacia abajo para fijarla a la barra horizontal. Examinar los cuatro cables del tetrodo recto por el ojo y quite cualquier escombro.
    7. Encender el agitador girando los cuatro cables a una velocidad de alrededor de 60 rpm, hasta que el ángulo entre los dos hilos sin torsión opuestos es aproximadamente de 60°.
    8. La pistola de calor a 210 ° C y calentar los alambres torcidos por barrer la pistola a lo largo de la recta longitud de los cables desde diferentes ángulos por 2 min a fusionar por la fusión de la capa de enlace VG.
    9. Levante el gancho en S con revolver suavemente y corte el extremo inferior de la tetrodo con unas tijeras finas.
    10. Mantenga la cinta de cobre en la barra horizontal con el dedo, cortar los cables de ambos bordes de la cinta de cobre con una tijera y retire la cinta de cobre. Corte el cable restante en la barra horizontal para liberar la tetrodo.
    11. Lugar el tetrodo terminado en una caja libre de polvo para el almacenamiento. Preparar por lo menos veinticinco tetrodos.

4. montaje del hiperimpulsor (figura 4).

  1. Inserción de las cánulas guía en la base de hiperimpulsor (Figura 4A).
    1. Retirar los tubos de termocontracción y deslice un segmento de 4 mm de tubo de silicon (ID 1,02 mm (0,04"), OD 2.16 mm (0.085")) a lo largo del haz a la frontera de soldado/unsoldered. La ranura de la cuña en el espaciador de hiperimpulsor para ensanchar el agujero central, permitiendo que al espaciador se deslice por el tubo de silicona. Quitar la cuña cuando el separador se encuentra en el centro del tubo de silicona.
    2. Organizar las posiciones de las cánulas de guía en el paquete colocando segmentos larga (10 cm) del cable metálico ø 0,18 mm (0,007") a través de cada cánula en un agujero de tetrodo específicos en el núcleo de hiperimpulsor, evitar cualquier cruce de los cables o las cánulas en el proceso. Doblar los extremos de los cables para mantenerlos en su lugar.
    3. Empuje las cánulas a través de sus respectivos agujeros en el núcleo, teniendo cuidado de no doblar o cruzar entre ellos, hasta que el extremo libre de cada cánula de 2 mm como mínimo fuera de la parte superior del agujero del tetrodo. Fije al separador atornillando la tuerca en la base, teniendo cuidado de evitar que al espaciador gire. Aplique una gota de cemento dental muy diluida de la parte superior de la base en el cruce de las cánulas para asegurar sus posiciones relativas.
    4. Cortar a la guía de cables desde el extremo soldado del paquete y quitarlos de las cánulas por contracción del extremo libre.
  2. Montaje de los microdrives en el hiperimpulsor núcleo (Figura 4B). Un arreglo espacial detallado de los microdrives en el hiperimpulsor ha sido previamente descrito11,13.
    1. Cargar los microdrives lentamente y con cuidado en cada varilla roscada de la base. Confirman que (1) los 23 manómetro microdrive cánula va en el agujero del tetrodo suavemente, (2) los 30 calibre cánula guía entra en la 23 calibre microdrive cánula suavemente, y (3) el tornillo de transporte se vuelve suavemente a lo largo de la varilla roscada. Atornille los microdrives hasta 1.0-1.5 mm por encima del extremo inferior de las varillas roscadas.
    2. Cortar 18 pedazos de tubería de polyimide (ID 0,11 mm (0,0045"), OD 0,14 mm (0.0055")) en segmentos de 38-43 mm (longitud del paquete de cánula guía plus 7 mm). Limpie cada tubo con un alambre de acero de 0,08 mm (0.003") de ø.
    3. Invertir la base, inserte los tubos de poliamida cuidadosamente las cánulas guía del extremo soldada y empuje a todos el camino en bajo un estereoscopio. Hacia el núcleo vertical y pegar el extremo superior del tubo de poliamida en la cánula de microdrive con pegamento espeso. Coloque la base boca abajo y deje que el pegamento seque durante 15 minutos.
    4. Corte el polyimide extra en el extremo superior de la tubería, dejando 0.5-1.0 mm fuera de la cánula de microdrive.
  3. Montaje de los cables de tierra (Figura 4).
    1. Reducir el número de cables a tierra necesarios para longitudes de 25-30 mm de alambre de acero recubierto (recubierto ø 0,20 mm (0,008"), ø desnudo 0.13 mm (0.005")). El aislamiento plástico de ambas puntas de los cables de 2 mm de la tira e inserte un extremo de cada uno en los extremos de las cánulas de calibre largo 30 mm 6-8. Aplanar los extremos de las cánulas para garantizar la conexión con sus respectivos cables.
    2. Utilice una herramienta Dremel para cortar las cánulas por la mitad para crear dos hilos de planta completa de cada uno.
    3. Introduzca el extremo redondeado de la cánula del 30 calibre en el extremo superior de la cánula de alambre de tierra en la base y presione firmemente para la inserción.
  4. Montaje de la placa de interfaz de electrodo (Figura 4).
    1. Insertar la columna central en la base y sujétela con dos 0-80, tornillos Allen largo 7,94 mm (5/16"). Pegamento si es necesario hacer constante en la base de la columna central.
    2. Ampliar las porciones de las ranuras en la placa BEI-72-control de calidad-grandes que corresponden a los dos agujeros roscados en la columna central con un toque de 1,2 mm de ø. Fijar la placa de interfaz de electrodo en la columna central con dos 0-80, 3,97 mm (5/32") largo tornillos de cabeza. Asegúrese de que la Junta está situada en el centro y es segura.
  5. Conectar los cables de tierra (Figura 4E).
    1. Cada cable de tierra alrededor de la columna central y conecte el extremo libre expuesto a la tarjeta de interfaz de electrodo con un alfiler de oro en el hoyo de tierra designado.
  6. Cargando los tetrodos en el hiperimpulsor, anteriormente descrita 16 , 17 .
    1. Cargar cada tetrodo cuidadosamente en los tubos del polyimide de microdrives, teniendo cuidado de no doblar durante el proceso.
    2. Suavemente alimente los cables de extremo libre en sus agujeros designados en la interfaz electrodo tablón y conectan eléctricamente usando pernos de oro.
    3. Corte los tetrodos individualmente a la longitud correcta. Confirmar que la porción de tetrodos que sobresalen de los extremos inferiores de los tubos de poliamida después de cortar es recta, de lo contrario reemplazar el tetrodo todo y coinciden.
  7. Colocar el escudo.
    1. Colocar la pantalla a la base usando cuatro 0-80, 3,97 mm (5/32") tornillos de cabeza troncocónica. Los números en la pantalla deben coincidir con los números en el tablero del interfaz del electrodo.
  8. Los consejos de tetrodo de la galjanoplastia.
    1. La placa de las puntas de los tetrodos uso NanoZ chapado equipado con un conector de ADPT-NZ-BEI-36 y un adaptador de ADPT-EIB-72-QC-HS-3617. Por otra parte, la placa ellos manualmente uno por uno como se describe en otra parte16. Placa el tetrodo Consejos antes de su uso (por ejemplo, un día antes de la implantación), como impedancia aumentará gradualmente con el tiempo después de la galjanoplastia. Reemplazar los tetrodos en cortocircuito o obstruido durante el proceso de la galjanoplastia, cortarlas a una longitud adecuada y volver a la placa.
  9. Finalizando el hiperimpulsor (Figura 4F).
    1. Pegue los tetrodos a sus tubos de poliamida como se describió anteriormente16. Retraerse todos ellos hacia sus cánulas guía por lo que no se exponen las puntas plateadas.
    2. Atornille cuatro 0-80, 6,35 mm (1/4") largo tornillos de cabeza en los cuatro orificios en la parte inferior de la base de un hiperimpulsor.
    3. Uso de un estereoscopio, baje cada tetrodo lentamente hasta que la punta del tetrodo es apenas por encima del borde de la cánula de la guía. Mientras tanto, ubicar la posición de cada tetrodo en el paquete de cánula guía. El mapa de posición de tetrodo es fundamental para la reconstrucción de sitios de grabación.
    4. Instale la tapa para el disco y guardar el hiperimpulsor correctamente para la implantación.

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Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Utilizamos un hiperimpulsor recién construido para obtener resultados de los ensayos. La unidad fue equipada con tetrodos de ø 17 μm (0,0007"), alambre recubierto de poliamida Platino-Iridio (90% - 10%). Las puntas de los tetrodos fueron plateadas en la solución de negro de platino para reducir la impedancia del electrodo a entre 100 y 200 kΩ a 1 kHz. El hiperimpulsor fue implantado 4,6 mm a la izquierda de la línea media y 0,5 mm anterior al sino transversal sobre el cráneo de un 550 g, ...

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Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Aquí, describimos el proceso de construcción de un hiperimpulsor desarrollado recientemente conformado por dieciocho tetrodos independientemente móviles. La unidad puede ser construida de piezas asequibles compradas en muchas tiendas de hardware disponibles, combinados con componentes creados por stereolithographic impresión. El hiperimpulsor puede ser crónicamente implantado en el cráneo de una rata utilizando procedimientos quirúrgicos estándar y es capaz de grabar actividad neuronal extracelular mientras que el animal...

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Los autores no tienen nada que revelar.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Agradecemos al laboratorio de Moser en el Instituto Kavli centro de Neurociencia de sistemas y computación neuronal, Universidad Noruega de ciencia y tecnología, para la crónica neuronal grabación procedimientos en ratas. Este trabajo fue apoyado por subvenciones de NIH NS098146 R21 y humano frontera ciencia programa a largo plazo becas LT000211/2016-L a L. Lu.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Varilla de soldaduraBlue DemonER308L-035-01TAcero inoxidable, 0.035" de diámetro
TornilloMcMaster91771A060Acero inoxidable, cabeza plana, 0-80  hilo,  5/8"  en longitud
TornilloMcMaster91772A051Acero inoxidable, cabeza sartén, 0-80  hilo,  5/32"  en longitud
TornilloMcMaster92196A056Acero inoxidable, cabeza hueca, 0-80  hilo,  5/16"  en longitud
TornilloMcMaster92196A055Acero inoxidable, cabeza hueca, 0-80  hilo,  1/4"  en longitud
TornilloMcMaster95868A131Nylon,  cabeza hueca, 2-56  hilo,  3/16"  en longitud, negro
Tuerca de tornilloMcMaster90730A001Acero inoxidable, hexagonal estrecho,  0-80 
rosca Tornillo de rebordeMcMaster90298A213Acero inoxidable, rosca 8-32, 3/16" de diámetro, 1/4" de longitud
Tornillo de copaMcMaster92313A105Acero inoxidable, rosca 4-40, 3/16" de longitud
Tornillo de mariposaMcMaster94323A592Nylon, 8-32  hilo,  3/8"  de longitud, negro
ImánApexM3X1MMDINeodimio, disco de 3 mm X 1 mm
Tubos metálicosPiezas pequeñasB00137QHNSAcero inoxidable, calibre 23, 0.0253" de diámetro exterior, 0.013" de diámetro interior, pared de 0.006"
Tubo metálicoNew England Tubo pequeñohecho a medidaAcero inoxidable, calibre 30, 0,012/0,0125" de diámetro exterior, 0,007/0,008" de diámetro interior,
tubotermorretráctil completamente duroMcMaster7856K720.09" ID antes de encogerse, azul
Tubo de siliconaA-M Systems8073000.040" ID, 0.085" OD
Tubo de poliimidaA-M Systems8234000.0045" ID, 0.0005"
pared Cable de tierraA-M Systems7915000.005" desnudo, 0.008" recubierto, medio duro
Alambre de TetrodeCaliforniaHecho a medida0,0007" de diámetro, platino-iridio (90%-10%), recubrimiento HML y VG
EIBNeuralynxEIB-72-QC-Grandes
alfileres de oroNeuralynxalfileres EIB
GrifoBalax01302-000M1.2 tamaño de rosca
GrifoMcMaster2522A8110-80 tamaño de rosca, fondo
GrifoMcMaster2522A7710-80 tamaño de rosca, tapón
GrifoMcMaster26955A943/8"-24  tamaño de rosca, macho de roscar
MachoMcMaster2522A7132-56  tamaño de rosca
GrifoMcMaster2522A7154-40  tamaño de rosca
GrifoMcMaster2522A7188-32  tamaño de rosca
DieMcMaster2576A4573/8"-24  tamaño de rosca, 1" de diámetro exterior
BrocaMcMaster30585A82Calibre de alambre  65,  0.035" de diámetro
BrocaMcMaster30585A83Calibre de alambre  66,  0.033" de diámetro
BrocaMcMaster30585A87Calibre de alambre  70,  0.028" de diámetro
BrocaMcMaster30585A88Calibre de alambre  71,  0.026" de diámetro
BrocaMcMaster30585A91Calibre de alambre  73,  0.024" de diámetro
BrocaMcMaster8870A233/16"  de diámetro
Disco DremelWagner31MDiamond, 22 mm de diámetro, 0,17 mm de espesor
Alambre de aceroPrecision Brand212120.012" de diámetro, completamente duro
Alambre de aceroPrecision Brand210070.007" de diámetro, completamente duro
Alambre de aceroA-M Systems7927000.003" de diámetro, semiduro
Super pegamentoLoctiteLT-40640# 406
Super pegamentoLoctiteLT-41550# 415
Polvo acrílico dental Teets223-3773Coral
Dental acrílico líquidoTeets223-4003
de grandes

References

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