Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.

Artículo de método

Monitoreo no destructivos del desarrollo Degradable andamio base ingeniería de tejido vascular mediante tomografía de coherencia óptica

5.2K visualizaciones

DOI:

10.3791/58040

3 de octubre de 2018

En este artículo

Resumen

Un protocolo paso a paso para ensayos no destructivos y período largo supervisar el proceso de remodelado vascular y la degradación de andamio en cultura en tiempo real de biodegradables poliméricos basados en andamio tejido-dirigida vasos sanguíneos con el estímulo pulsátil usando la tomografía de coherencia óptica se describe aquí.

Resumen

Ingeniería injertos vasculares con propiedades estructurales y mecánicas similares a los vasos sanguíneos naturales se espera que la creciente demanda de bypass arterial. Caracterización de la dinámica de crecimiento y proceso de remodelación de polímero degradable basada en andamio tejido-dirigida vasos sanguíneos (TEBVs) con el estímulo pulsátil es crucial para la ingeniería de tejido vascular. Técnicas de imagen ópticas se destacan como herramientas poderosas para el control de la vascularización del tejido diseñado que permite proyección de imagen de alta resolución en tiempo real cultura. Este trabajo demuestra un no destructivo y rápido en tiempo real imágenes estrategia para controlar el crecimiento y remodelación de TEBVs en la cultura a largo plazo mediante el uso de tomografía de coherencia óptica (OCT). Se evalúa la morfología geométrica, incluyendo proceso de remodelación vascular, grueso de pared y comparación de espesor TEBV en momentos diferentes de la cultura y la presencia del estímulo pulsátil. Por último, OCT proporciona posibilidades prácticas para la observación en tiempo real de la degradación del polímero en los tejidos reconstrucción bajo estimulación pulsátil o no y en cada segmento vascular, por en comparación con la evaluación de la degradación de polímero utilizando exploración electrónica microscopic(SEM) y microscopio polarizado.

Introducción

Ingeniería de tejido de los vasos sanguíneos (TEBVs) es el material más prometedor como un ideal del injerto vascular1. Para el desarrollo de injertos para ser clínicamente útil con propiedades estructurales y funcionales similares como vasos nativos, múltiples técnicas han sido diseñadas para mantener la función vascular2,3. Aunque ha habido barcos diseñados con tasas de permeabilidad aceptable durante la implantación y en el estudio clínico de fase III4, cultura a largo plazo y alto costo también muestran la necesidad de supervisar el desarrollo de TEBVs. Compr....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Protocolo

1. degradable PGA andamio base tejido-dirigida cultura de los vasos

  1. Fabricación de andamios de PGA
    1. Coser la malla de la PGA (19 mm de diámetro y 1 mm de espesor) alrededor de la tubería del silicón esterilizada por óxido de etileno (17 cm de longitud, diámetro de 5,0 mm y 0,3 mm de espesor) con sutura 5-0.
    2. Coser de politetrafluoroetileno (ePTFE, 1cm de longitud) con una sutura de 4-0 en cada extremo de la malla de la PGA y comprometidos por 2 mm.
    3. Inmersión de andamios de la PGA con la mano en 1 mol/L NaOH durante 1 min para ajustar la estructura espacial de la malla y poner en remojo con agua de cultivo de tejidos grado tres vec....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Resultados

El sistema tridimensional de la cultura consistió en una cámara de cultivo en el biorreactor y el sistema de perfusión con un ciclo cerrado de fluido10,13 (figura 1). El catéter de proyección de imagen de OCT fue insertado en el extremo distal de la Unión Y y hacia atrás en el tubo de silicona para la proyección de imagen. Proyección de imagen de OCT fue utilizado primero para delinear la caracterizac.......

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Discusión

Generar ingeniería vasos con estructural y propiedades mecánicas similares a los de nativos de los vasos sanguíneos pueden conducir a reducir el tiempo de uso clínico y es la última meta de la ingeniería vascular. Técnicas de imagen ópticas permiten la visualización de los componentes específicos vasculares ingeniería tisular, que no puede controlar construcciones individuales a través de injertos de la cultura y la exposición a un ambiente de cultura sin comprometer la esterilidad7. En este artíc.......

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Divulgaciones

Los autores declaran que no tienen intereses financieros que compiten.

Agradecimientos

Nos gustaría reconocer la ciencia y la tecnología de planificación de proyecto de la provincia China de Guangdong (2016B070701007) para apoyar este trabajo.

....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Malla PGASynthecon
ConectorCole Parmer
OPTIS&comercio; SISTEMA
microscopio electrónico de barridoPhilipsFEI Microscopio polarizado Philips XL-30
Suturas OlympusOlympus BX51
Johnson & Bomba
Guangdong Cardiovascular Institute
LightLab Softwarede imágenes St. Jude Medical, Inc
Tubo de silicona Sistema OCT intravascular Cole Parmer St. Jude Medical, Inc ILUMIEN™ pulsátil Johnson

Referencias

  1. Chan-Park, M. B., et al. Biomimetic control of vascular smooth muscle cell morphology and phenotype for functional tissue-engineered small-diameter blood vessels. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 88, 1104-1121 (2009).
  2. Ballyns, J. J., Bonassar, L. J. Image-gui....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Vasos sangu neos de ingenier a de tejidosestimulaci n puls tilremodelaci n vascularan lisis del espesor de la paredmicroscop a electr nica de barridomicroscop a polarizadaandamio de PGAc lulas de m sculo liso de arteria umbilical humana