El método flotante para tejido parafina-encajado de seccionamiento y corte

Resumen

Aquí, presentamos un protocolo para mejorar la parafina secciones. Este método combina el corte y flotando con una cámara termostática simple para evitar el proceso de transferencia requerido por el método convencional. Como resultado, la eficacia y el número de secciones de la parafina intacto mejoraron grandemente.

Resumen

Secciones de tejido embebido en parafina es ampliamente utilizado en histología y patología. Sin embargo, es tedioso. Para mejorar este método, varias empresas han ideado sistemas de transferencia de sección compleja con fluido agua. Para simplificar esta tecnología, hemos creado un método sencillo usando equipos caseros que combina el corte y flotando dentro de una cámara termostática simple; por lo tanto, las secciones automáticamente entrar en el baño de agua en la superficie del agua. El hipocampo de cerebro de ratón adulto, los riñones de ratón adulto, cerebros embrionarios de ratón y ojos de pez cebra adulto fueron cortados usando secciones de parafina convencional y el método presentado para la comparación. El análisis estadístico muestra que nuestro método mejorado había ahorrado tiempo y produce perfiles de calidad superiores. Además, parafina de seccionamiento de la muestra entera en poco tiempo es fácil para los operadores junior.

Introducción

Estudio morfológico es importante en la investigación biológica. Aunque la nueva tecnología ha permitido a los investigadores a observar sus objetivos directamente en el tejido entero u organismos^1,2,3, cortar al espécimen de secciones delgadas, seguido por la coloración, sigue siendo el principal morfología de tejido único método fornot sino directamente en el tejido de la proteína. La microscopia ligera utiliza tres tipos de sección: parafina, congelado y SEMIFINOS. Aunque cryosectioning es común para la protección de la antigenicidad del tejido, y la preparacion es simple,....

Protocolo

Todos los métodos aquí descritos han sido aprobados por el cuidado Animal y el Comité de uso de la Universidad de Nanchang.

1. monta el equipo y conecte el microtomo

1. Diseño de los parámetros conforme a los requisitos (suplementario figura 1).
2. Enviar el parámetro a una fábrica local para la fabricación de los tableros de acrílico.
3. Montar todas las piezas en orden: utilizar cloroformo para combinar 7 comerciales tableros de acrílico en un tanque con un baño de agua y canal de sección (figura 1).
   PRECAUCIÓN: El cloroformo produce susta....

Resultados

El método mejorado aumentó el número de secciones de la parafina intacto. Probamos este nuevo método en tejido de hipocampo de ratón adulto, los riñones de ratón adulto, cerebros embrionarios de ratón y ojos de pez cebra. Se añade agua al tanque, y la temperatura del agua se mantuvo entre 38,0 ° C y 40,0 ° C. Después de una serie preparación de las muestras de tejido, fueron seccionadas y comparados con seccionamiento convencional. El nuevo método evita la pérdida de sección y aumentó la .......

Discusión

Para mejorar la morfología de la sección de parafina y resolver el problema del tiempo perdido durante el seccionamiento de la parafina convencional, hemos creado una parafina mejor método que combina el corte y el despliegue de seccionamiento. Este método mejorado se basa en un equipo simple que consta de un canal de sección, un baño de agua y un calentador con un interruptor de detección de temperatura. La cinta de la sección entra en el baño de agua a través del canal de sección y se despliega automáticamente al corta.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Incubadora	Boekel Scientific	133000-2
Etanol	Sinopharm Reactivo Químico Co.,Tapa	64-17-5
Xileno	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Tapa	1330-20-7
Paraplast	Leica	39601006
Módulo de inclusión de parafina calentada	Leica
Tablero
Triclorometano	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Tapa	67-66-3
Elemento calefactor eléctrico tubular (12 V 200 W)
Controlador de temperatura (12 V, 120 W)	Mingsuo	XH-W3002
Microtomo rotativo	Leica
		silicona neutro	Conecte el canal de agua con el soporte de cuchillas del micrótomo
Transformador de tensión	Dearll	S-250-12
Cuchilla desechable	Accu-Edge	4689
Hematoxylin	Baso Diagnostics Inc.	BA-4025
Eosina	Baso Diagnostics Inc.	BA-4025
Microslide	Sail Marca	7105
Bálsamo neutro	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Tapa	10004160
Coverslip	Microscopio Citoglas	10212424C
Carl	Zeiss
Ácido clorhídrico	Xilong Chemical	7647-01-0
Baño de agua para secciones de parafina	Leica
HistoCore Arcadia C - Placa fría	Leica
spray repelente de parafina	Thermo Scientific	9990420

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