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Artículo de método

Seguimiento a largo plazo del vídeo de animales acuáticos Cohoused: un estudio de caso de la actividad locomotriz de la langosta Noruega (Nephrops norvegicus)

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DOI:

10.3791/58515

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8 de abril de 2019

* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Aquí presentamos un protocolo para el seguimiento individual de animales durante un largo período de tiempo. Utiliza visión por computadora métodos para identificar un conjunto de etiquetas manualmente construidas mediante un grupo de langostas como caso de estudio, al mismo tiempo proporcionando información sobre cómo casa, manipulan y marcan las langostas.

Resumen

Presentamos un protocolo relacionado con una técnica de seguimiento de vídeo basada en el fondo y umbral de imagen que hace posible un seguimiento individual de animales cohoused. Probamos la rutina de rastreo con cuatro cohoused cigalas (Nephrops norvegicus) bajo condiciones de luz-oscuridad durante 5 días. Las langostas habían sido marcadas individualmente. El montaje experimental y las técnicas de seguimiento utilizadas se basan totalmente en el software de código abierto. La comparación de la salida de rastreo con un detector manual indica que las langostas fueron correctamente detectados 69% de las veces. Entre las langostas correctamente detectadas, sus etiquetas individuales fueron correctamente identificados 89.5% de las veces. Teniendo en cuenta el tipo de marco utilizado en el protocolo y la tasa de movimiento de las langostas, el rendimiento de seguimiento video tiene una buena calidad, y el representante resultados apoyan la validez del protocolo en la producción de valiosos datos para necesidades de investigación (individual ocupación de espacio o patrones de actividad locomotor). El protocolo presentado aquí puede ser fácilmente modificado para requisitos particulares y por lo tanto, es transferible a otras especies donde el seguimiento individual de los especímenes en un grupo puede ser valioso para responder a preguntas de investigación.

Introducción

En los últimos años, seguimiento automatizado basado en imágenes ha proporcionado conjuntos de datos muy precisa que pueden utilizarse para explorar las preguntas básicas en ecología y comportamiento de las disciplinas1. Estos conjuntos de datos pueden utilizarse para el análisis cuantitativo del comportamiento animal2,3. Sin embargo, cada metodología de imagen utilizado para el seguimiento de los animales y la evaluación de comportamiento tiene sus fortalezas y limitaciones. En protocolos de seguimiento basado en imágenes que utilizan información espacial de fotogramas anteriores en un....

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Protocolo

La especie utilizada en este estudio no es una especie en peligro de extinción o protegida. Experimentos de laboratorio y muestreo habían seguido la legislación española y normativa (ICM-CSIC) institucional interna en materia de bienestar animal. Muestreo de animales se realizó con el permiso de la autoridad local (Generalitat de Catalunya).

1. animal mantenimiento y muestreo

Nota: El siguiente protocolo se basa en la suposición de que los investigadores pueden probar N. norvegicus en el campo durante la noche para evitar el daño a los fotorreceptores23. Debe evitar....

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Resultados

Se construyó manualmente un subconjunto de los datos experimentales para validar el análisis automatizado de video. Un tamaño de muestra de 1.308 marcos con un nivel de confianza del 99% (que es una medida de seguridad que muestra si la muestra refleja con precisión la población, dentro de su margen de error) y un margen de error del 4% (que es un porcentaje que describe cómo cerrar el respuesta que dio la muestra es el valor real de la población) fue seleccionado al azar, y realizó una a.......

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Discusión

Los resultados de rendimiento y representante obtenidos con el protocolo de seguimiento de video confirman su validez para la investigación aplicada en el campo del comportamiento animal, con un enfoque específico en modulación social y los ritmos circadianos de los animales cohoused. La eficiencia de la detección de animales (69%) y la exactitud de la discriminación de la etiqueta (89,5%) junto con las características de comportamiento (es decir, velocidad de movimiento) de las especies objetivo utilizadas aquí sugieren.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Los autores agradecemos a la Dr. Joan B. empresa que financió la publicación de este trabajo. También, los autores están agradecidos a los técnicos de la zona de acuario experimental en el Instituto de Ciencias del mar de Barcelona (ICM-CSIC) por su ayuda durante el trabajo experimental.

Este trabajo fue financiado por el proyecto RITFIM (CTM2010-16274; investigador principal: J. Aguzzi) fundada por el Ministerio de ciencia e innovación (MICINN) y la concesión de TIN2015-66951-C2-2-R por el Ministerio de economía y competitividad.

....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Trípode 475ManfrottoA0673528Descatalogado
Brazo Articulado 143ManfrottoD0057824Descatalogado
Cámara USB 2.0 uEye LEiDSUI-1545LE-Mhttps://en.ids-imaging.com/store/products/cameras/usb-2-0-cameras/ueye-le.html
Ojo de Pez Len C-mount f = 6 mm/F1.4InfaimonEstándar Óptico https://www.infaimon.com/es/estandar-6mm
Tanque de fibra de vidrio 1500 x 700 x 300 mm3
Black Tela
Tanque de estructura de madera5 listones de madera 50x50x250 mm
fieltro de estructura de madera10 listones de madera 25x25x250 mm
Tornillos detantos como sea necesario para fijar listones de madera
estructuras PCCPU de 2 núcleos, 4 GB de RAM, 1 GB de gráficos, 500 GB de almacenamiento externo en disco duro
2TB de capacidad deseable
iSPY Sotfware para PC con WindowsiSPYhttps://www.ispyconnect.com/download.aspx
software Zoneminder Linux PCZoneminderhttps://zoneminder.com/
OpenCV 2.4.13.6 BibliotecaOpenCVhttps://opencv.org/
Python 2.4Pythonhttps://www.python.org/
Nevera de
camping Bandeja de plástico Gel
cianocrilatopara pegar la etiqueta' S 
1 lámina de plástico PVC negro (1 mm de grosor)Construcción de la etiqueta
1 lámina de plástico PVC blanco (1 mm de grosor)Construcción de la etiqueta
4 Tag' s Ø 40 mmFabricado con lámina de plástico PVC blanco y negro
3 m Blue Strid Led Ligts (480 nm)Impermeable como sea deseable
3 m IR Strid Led Ligts (850 nm)Impermeable como deseable
6 m  Tubos de metacrilato y oslash; 15 mmCerrado Strid Led 4
PVC Codo   45o Ø 63 mmConstrucción de madriguera
m Tubo de PVC flexible de 3 m y Oslash; Construcciónmadriguera
4 tapón de rosca de PVC y Oslash; Construcciónmadriguera
juntas tóricas y Oslash; Construcción demadriguera
4 Pegamento / rosca de PVC hembra y Oslash; 63 mmConstrucción de madriguera
CableMecanismo de control de luz
Fuente de alimentación Ligt DC 12 V 300 WMecanismo de control
de luz MOSFET, RFD14N05L, canal N, 14 A, 50 V, 3 pines, IPAK (TO-251)RS Components325-7580Mecanismo
de control de luzDiodo, 1N4004-E3/54, 1A, 400V, DO-204AL, 2 pinosRS Components628-9029 Mecanismo de control deluz
PortafusiblesComponents336-7851 Mecanismo de control deluz
2 vías 3,81 mmComponentes RS220-4658Condensador de mecanismo de control de luz
220 µ F 200 VRS Components440-6761Mecanismo de control de luz
Resistencia 2K2 7 WRS Components485-3038 Mecanismo decontrol de luz
Fusible 6,3 x 32 mm2 3ARS Components413-210 Mecanismo de control deluz
Arduino Uno Atmel Atmega 328 Placa MCURS Components715-4081 Mecanismo de control deluz
Placa Prototipe CEM3,3 orificio.,RE310S2Componentes RS728-8737 Mecanismo decontrol de luz Convertidor
CC/CC, 12 Vin,+/-5 Vout 100 mA 1 WComponentes RS689-5179Mecanismo de control de luz
2 SERA T8 bombilla fluorescente de luz de luna azul 36 vatiosSERAInstalación descatalogada/aislada de luz
de fieltroTela de acero inoxidable de 3 de de 63 mm de de 63 mm 4 de 63 mm eléctrico de 10 m DC 12V RS Terminal de alimentación de

Referencias

  1. Dell, A. I., et al. Automated image-based tracking and its application in ecology. Trends in Ecology & Evolution. 29 (7), 417-428 (2014).
  2. Berman, G. J., Choi, D. M., Bialek, W., Shaevitz, J. W. Mapping the stereotyped behaviour of freely mo....

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