Selección de genotipos de algodón para la resistencia de los nematodos reniformes

Resumen

Aquí, se presenta un protocolo para el cribado rápido no destructivo de genotipos de algodón para la resistencia a los nematodos reniformes. El protocolo consiste en examinar visualmente las raíces de las plántulas de algodón infectadas por nematodos para determinar la respuesta a la infección. El brote vegetativo de cada planta se propaga para recuperar las plantas para la producción de semillas.

Resumen

Se necesita un protocolo de cribado rápido de nematodo reniforme no destructivo (Rotylenchulus reniformis) para el desarrollo de variedades de algodón resistente (Gossypium hirsutum) para mejorar el manejo del nematodo. La mayoría de los protocolos implican la extracción de nematodos o huevos vermiformes del sistema radicular de algodón o el suelo de maceta para determinar la densidad de población o la tasa de reproducción. Estos enfoques generalmente consumen mucho tiempo con un pequeño número de genotipos evaluados. Aquí se describe un enfoque alternativo en el que el sistema radicular se examina visualmente para detectar la infección por nematodos. El protocolo consiste en inocular la plántula de algodón 7 días después de la plantación con nematodos vermiformes y determinar el número de hembras unidas al sistema radicular 28 días después de la inoculación. Los datos se expresan como el número de hembras por gramo de peso fresco de la raíz para ajustar para la variación en el crecimiento de la raíz. El protocolo proporciona un método excelente para evaluar la resistencia huésped-planta asociada con la capacidad del nematodo para establecer un sitio de infección; sin embargo, no se evalúa la resistencia que dificulta la reproducción de nematodos. Al igual que con otros protocolos de cribado, la variación se observa comúnmente en la infección por nematodos entre genotipos individuales dentro y entre experimentos. Los datos se presentan para ilustrar el rango de variación observado mediante el protocolo. Para ajustar esta variación, los genotipos de control se incluyen en los experimentos. No obstante, el protocolo proporciona un método sencillo y rápido para evaluar la resistencia de la planta de host. El protocolo se ha utilizado con éxito para identificar las adhesiones resistentes de la G. arboreum germplasm recoger y evaluar poblaciones segregantes de más de 300 individuos para determinar la genética de la resistencia. También se desarrolló un método de propagación vegetativa para la recuperación de plantas para la cría de resistencia. Después de la eliminación del sistema radicular para la evaluación de nematodos, el brote vegetativo se replanta para permitir el desarrollo de un nuevo sistema radicular. Más del 95% de los brotes suelen desarrollar un nuevo sistema radicular con plantas que alcanzan la madurez.

Introducción

Rotylenchulus reniformis (Linford y Oliveira), comúnmente conocido como el nematodo reniforme, es una de las principales especies de nematodos parásitos presentes en los suelos del sureste de los Estados Unidos^1,2,3. El nematodo es un semiendoparásito obligatorio y sedentario que requiere que unaplanta anfitriona complete su ciclo de vida 2,^4. Los nematodos hembras preadultos vermiformes penetran en elsistema radicular del huésped para establecer un sitio de alimentación en la estela 2....

Protocolo

1. Mantenimiento de una fuente de R. reniformis Inóculo

1. Llenar las ollas de arcilla de terracota (15 cm de diámetro, 13,5 cm de altura) con una mezcla pasteurizada al vapor de 1 parte de arena arenosa y arena de 2 partes. Plantar una variedad de tomate susceptible (Solanum lycopersicon) en cada olla y colocar las ollas en un invernadero.
   NOTA: Se pueden utilizar otras variedades vegetales susceptibles como el algodón en lugar del tomate.
2. Inocular las plantas de tomate con nematodos reniformato vermiformes (ver paso 3.3). Mantener las plantas en el invernadero a una temperatura de aproximadamente 28 oC.

Resultados

La infección por Rotylenchulus reniformis del sistema radicular para dos variedades se presenta en la Figura1. Relativamente menos nematodos reniformes femeninos son capaces de establecer un sitio de alimentación para el genotipo de algodón resistente en comparación con el genotipo susceptible. La variación en el crecimiento de la raíz es común entre las adhesiones, como se ilustra en la Figura2. Esta variación medida po.......

Discusión

Se requiere un protocolo de cribado eficaz para 1) la identificación de R. genotipos de algodón resistentes a reniformis para evaluar la genética de la resistencia y 2) la cría de variedades resistentes. La mayoría de los protocolos evalúan R. densidades de población de reniformis o tasas de reproducción mediante la extracción de nematodos o huevos vermiformes del sistema radicular de algodón o suelo de maceta^8,11,

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Ray Leach Cone-tainer	Stuewe and Sons Inc.	SC10U
	Stuewe and Sons Inc.	RL98
Arena	varias
Bolas de algodón	varias
Pilón Etiquetas de plantas de 4 pulgadas (4 en L x 5/8 en W)	Placas de pilón	L-4-W	Cualquier marca o proveedor es aceptable.
Contenedores de muestras de 4 onzas	Fisher Scientific	16-320-731	Se acepta cualquier marca o proveedor.
Colorante alimentario rojo	McCormick & Co., Inc.
Puntas de pipeta de 1 mL	varios
recipientes de 10 L	varios		cubos económicos funcionan bien.
Macetas de 6 L	Nursery Supplies Inc.	Poly-Tainer-Can No2A	Cualquier marca o proveedor es aceptable. Se pueden utilizar macetas de diferentes tamaños
Medios para macetas	Sun Gro Horticulture	Metro-Mix 360	Se acepta cualquier marca o proveedor.
Fertilizante	Everris NA Inc.	Osmocote Plus	Cualquier marca o proveedor es aceptable.
Contenedor de plástico (73,6 cm de largo x 45,7 cm de ancho x 15,2 cm de profundidad)	Rubbermaid	3O29	Cualquier marca o proveedor es aceptable.