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Artículo de método

Un análisis de la competencia la placa como una evaluación preliminar rápida de supresión de la enfermedad

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DOI:

10.3791/58767

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28 de octubre de 2018

 , 

En este artículo

Resumen

Presentado es un protocolo para un análisis de la competencia de placa determinar si un compuesto específico es probable que contenga bacterias y hongos que inhiben el crecimiento de Rhizoctonia solani.

Resumen

El objetivo era desarrollar y optimizar una prueba simple, asequible y eficaz para detectar la capacidad supresora de la enfermedad de un compost específico contra hongos de suelo Rhizoctonia solani. R. solani es un patógeno de una amplia gama de anfitriones de la planta en todo el mundo. El hongo sobrevive en los suelos como un saprofito y crece rápidamente en medios de agar agua simple. El ensayo de placa es un método rápido para comparar compuestos por su capacidad para frenar el crecimiento de r. solani. El ensayo también se correlaciona bien con la supresión de otros hongos patógenos de suelo que sobreviven como saprófitos en suelos como tizones tempranos Alternaria, marchitamiento por Fusarium, podredumbre de las raíces Phytophthora y Pythium putrefacción de la raíz.

Introducción

Rhizoctonia representa un amplio complejo de hongos, de que Thanatephorus cucumeris (Frank) Donk (anamorfo = Rhizoctonia solani Kühn) es el patógeno causante de la pudrición de la raíz y damping-off1. Rhizoctonia solani es un patógeno agresivo y un saprófito que puede sobrevivir como esclerocios bajo condiciones ambientales adversas1. Como resultado, se tiene una distribución global y puede causar enfermedad en amplia gama de anfitriones de la planta incluyendo Solanaceae, Fabaceae, Asteraceae y Brassicaceae que resulta en graves pérdidas económicas.

Compues....

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Protocolo

1. preparar de antemano

  1. Maestro cultura fungicida (organismo de prueba)
    1. Orden de la American Type Culture Collection, colección de Microbiología9, por su teleomorfo Thanatephorus cucumeris (Frank) (ATCC 10154) o MYA 4031.
    2. Como alternativa: Recoger aislamientos locales como hecho por los autores. Las plántulas de rábano rojo (Raphanus sativus) funcionan bien como una planta de cebo; recoger suelo de un lugar conocido para tener una historia de la podredumbre damping-off o raíz causada por r. solani. Sembrar semillas en el suelo y aislar de las lesiones de la raíz cuando las plantas de semil....

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Resultados

Composta debe ser estable y madura, dos términos que a menudo se usan indistintamente, así que puede ser con seguridad envasado y transportado y no causa efectos adversos en su uso final4. La estabilidad es una resistencia a la descomposición y normalmente se determina mediante índices de actividad microbiana. Las medidas generales de respiración microbiana pueden medir estabilidad del compost pero no necesariamente enfermedad supresión de un patógeno agre.......

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Discusión

Sabemos por investigaciones anteriores, de que ciertos compuestos son eficaces en la supresión de r. solani y que los efectos supresivos son debido a los microbios que viven en el compost, no las características abióticas de compost6,8. El uso de autoclave como un medio para 'matar' microbiota ha sido criticado porque afecta la química del carbono de los medios de comunicación10. Comparamos el uso de autoclave al vacío filtrado a .......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

El Vermont agrícola estación experimental competitivo Portilla programa VT-HO1609 financió la investigación. Lynn Fang utiliza el método como parte de su tesis M.S. Universidad de Vermont6.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
matraz cónico de vidrio de cuello estrecho esterilizable en autoclaveFisher Scientific10-040D125 mL
de ensayo de vidrio esterilizables en autoclaveFisher Scientific14-925J25 mL
granulado deshidratadoFisher ScientificDF0145-17-0500 g cantidad
resistentes al calorFisher ScientificMEMGG1314WLvarias marcas disponibles
Parafilm (tiras de 2-3 cm de ancho)Fisher ScientificPM992 13-374-16o 10 cm de ancho trabajo placas
Petri de poliestireno desechablesFisher ScientificR80116viene en fundas de 20/ea o cajas de 500
agar de dextrosa patata deshidratadaFisher ScientificDF0013-15-8viene en cantidades de 100, 500 y 2000 gramos
agitador recíproco de sobremesaThomas Scientific1227Y31otros modelos funcionarán
de aguaThermoScientificS373635L
, plana, de al menos 10 cmCualquierregla métrica de uso
Cultura ATCC Coleccióncultura de tipo americanoATCC 10154teleomorfo Thanatephorus cucumeris (Frank) (ATCC 10154) o MYA 4031;
cinta de laboratorioFisher Scientific15935esterilizable en autoclave y extraíble, de 1" de ancho
marcador resistente al aguapara oficina o suministro científicoSharpiepunta fina escriba el número de muestra en la cinta
tubos agar guantes 5 de baño regla transparente de uso general de preferido

Referencias

  1. Gonzalez Garcia, G., Onco, M. A. P., Susan, V. R. Review. Biology and systematics of the form genus Rhizoctonia. Spanish Journal of Agricultural Research. 4 (1), 55-79 (2006).
  2. Bonanomi, G., Antignani, V., Pane, C., Scala, E. Suppression of soilborne ....

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Reimpresiones y permisos

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