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Artículo de método

Meso-escala partícula imagen Velocimetry estudios neurovasculares flujos In Vitro

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DOI:

10.3791/58902

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3 de diciembre de 2018

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* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Aquí presentamos métodos simplificados para fabricación neurovascular transparentes fantasmas y caracterizar el flujo en el mismo. Destacar varios parámetros importantes y demostrar su relación con la precisión del campo.

Resumen

Imagen de partícula velocimetry (PIV) se utiliza en una amplia variedad de campos, debido a la oportunidad que ofrece para precisamente visualizar y cuantificar los flujos a través de una amplia gama de spatiotemporal. Sin embargo, su ejecución requiere típicamente el uso de instrumentos costosos y especializados, que limita su utilidad más amplia. Por otra parte, dentro del campo de la bioingeniería, en vitro estudios de visualización de flujo son también a menudo más limitado por el alto costo de fantasmas comercialmente con tejido que recapitular estructuras anatómicas deseadas, particularmente para aquellos que abarcar el régimen de mesoescala (es decir, submilimétricas a escalas de longitud milímetro). Adjunto, presentamos un protocolo experimental simplificado desarrollado para hacer frente a estas limitaciones, los elementos clave que incluyen 1) un método de costo relativamente bajo para la fabricación de mesoescala fantasmas de tejido mediante impresión 3-d y bastidor de la silicona y 2) marco de análisis y procesamiento de imágenes de código abierto que reduce la demanda sobre la instrumentación para la medición de flujos de mesoescala (es decir, velocidades de hasta decenas de milímetros/segundo). Colectivamente, esto reduce la barrera de entrada para nonexperts, mediante el aprovechamiento de recursos ya a disposición de muchos investigadores de Bioingeniería. Demonstratethe aplicación de este protocolo en el contexto de la caracterización del flujo de neurovascular; sin embargo, se espera a ser relevantes para una amplia gama de aplicaciones de mesoescala en Bioingeniería y más allá.

Introducción

PIV es ampliamente utilizado en mecánica de fluidos experimental para visualización de flujo e Investigaciones cuantitativas de movimiento fluido que varía en la escala de longitud de atmosférico a flujo microcirculatorio1,2,3. Mientras que los específicos de su aplicación pueden variar tan ampliamente como sus aplicaciones, un aspecto común a casi todos los estudios PIV es el uso de imágenes de video de partículas trazadoras sembradas dentro del líquido de trabajo, seguido por un análisis de pares de fotogramas de la imagen consecutiva para extraer las características de flu....

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Protocolo

1. fabricación del molde de sacrificio base de ABS

  1. Diseñar un modelo inverso del fantasma de tejido deseada utilizando el software de CAD.
  2. Imprimir el modelo mediante una impresora 3-d con ABS como el material de construcción.

2. a base de PDMS Vascular fabricación fantasma

  1. Mezcla
    1. Mezcle el prepolímero base PDMS y el agente endurecedor en una proporción 10:1 (por peso); una mezcla de 66 g proporciona suficiente material para la fabricación de fantasmas con volúmenes de hasta 50 cm3.
    2. Colocar la mezcla en un desecador de vacío durante 60 min a degas y reduci....

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Resultados

La figura 2 ilustra el proceso de fabricación fantasma de tejido PDMS. Los fantasmas de la diseñada en este documento están diseñados para el estudio del flujo en idealizado aneurysms ancho-necked, saculares, intracraneales, así como arterias perforantes ramas proximales. Diseño adicional importante incluye 1) un depósito común que vierten todos los buques, para asegurarse de salida flúida del fantasma - no, formación de gota puede ocurrir en las salidas de b.......

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Discusión

El protocolo descrito aquí describe un método simplificado para realizar estudios PIV para visualizar neurovascular fluye en dimensiones relevantes fisiológicamente y flujo condiciones in vitro. De esta manera, sirve para complementar los protocolos registrados por otros que también se han centrado en la simplificación de la cuantificación de campos del vector, pero dentro de contextos muy diferentes que requieren que la consideración de la mucho mayor longitud de escalas de25 o menor flu.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que declarar.

Agradecimientos

Los autores reconocen el apoyo parcial para este proyecto proveído por una beca semilla de colaboración de la oficina de investigación y desarrollo económico en UC Riverside.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Solidworks 2015Dassault SystemsN/ACAD Software 
Dow Corning Sylgard 184 KitEllsworth Adhesivo184 SIL ELAST KIT 3.9KGPDMS Kit
Stratasys Dimension EliteStratasys9180-00105Impresora 3D
P430 Material Modelo CartuchoStratasys340-21202ABS material de construcción 
P400 SR Cartucho de material de soporte solubleStratasys340-30200Material
de soporte CleanStation DT3PM3 Technologies00-00300RBaño
base Lindberg Blue M LGO Box Furnace Horno Thermo Scientific
LB305745M 21G BD Aguja PrecisionGlideBetcon DickensonBD 305167Perforadora ramificada segmento de molde
Desecador (vacío)Polylab55205Desecador
Branson 1800 Utrasonic LimpiezaBransonCPX-952-116RSonicator
AcetonaFisher ChemicalA9494Acetona
Alcohol de isopropolFisher ChemicalA4514Alcohol de isopropol
GlicerolFisher ChemicalGW33500Glicerol
10um Poliestireno Partículas fluorescentes amarillo-verdeMagspherePSF-010UMPerlas fluorescentes
Phantom Miro Visión InvestigaciónMiro M310Cámara de alta velocidad
MicrobombaCole-Parmer81101Bomba de recirculación
Leica DM2000Microscopio fluorescenteLeica MicrosystemsDM2000
Objetivo Leica 10X Objetivo 506259Leica Microsystemspara perforador
Objetivo Leica 2.5X Objetivo11506083 Leica Microsystems saco de aneurisma
Cubo de filtro azul Leica L5Leica Microsystems513840Cubo de filtro azul
Leica EL600011504115 de Leica MicrosystemsFuente de luz
AlconoxAlconox Inc1104-1Detergente
ImageJNIHN/ASoftware de análisis de imágenes de código abierto
https://imagej.nih.gov/ij/
Velocimetría de imágenes de partículas Complemento PIVQingson TsengN/Ahttps://sites.google.com/site/qingzongtseng/piv

Referencias

  1. Grant, I. Particle image velocimetry: A review. Proceedings of the Institution of Mechanical Engineers, Part C: Journal of Mechanical Engineering Science. 211 (1), 55-76 (1997).
  2. Lindken, R., Rossi, M., Große, S., Westerweel, J.

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Reimpresiones y permisos

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