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Artículo de método

Protocolo de bajo costo de análisis de la huella y colgante caja de prueba para los ratones aplicada la tensión de retención crónica

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DOI:

10.3791/59027

23 de enero de 2019

En este artículo

Resumen

El protocolo de bajo costo que consiste en análisis de la huella y colgante caja de prueba después de sistema de seguridad para el estrés es útil para evaluar los trastornos de movimiento del modelo del ratón.

Resumen

Disturbio del paso se observa con frecuencia en pacientes con trastornos del movimiento. En modelos de ratón utilizados para trastornos del movimiento, análisis de la marcha es prueba de comportamiento importante para determinar si los ratones imitan los síntomas de los pacientes. Déficit motor es a menudo inducida por el estrés cuando no fenotipo motor espontáneo se observa en los modelos de ratón. Por lo tanto, el análisis de la marcha siguió por la tensión de carga sería un método sensible para evaluar el fenotipo motor en modelos de ratón. Sin embargo, los investigadores enfrentan la exigencia de un aparato costoso para obtener automáticamente resultados cuantitativos de análisis de la marcha. Para estrés, tensión carga por métodos simples sin aparatos costosos necesarios para la descarga eléctrica y forzado a correr es deseable. Por lo tanto, presentamos un protocolo simple y de bajo costo que consiste en análisis de la huella con tinta y papel colgante caja de prueba para evaluar la función motora, y carga de estrés por restricción con un tubo cónico. El déficit motor de los ratones con éxito fueron detectado por este protocolo.

Introducción

Trastornos del movimiento se definen como alteraciones del sistema nervioso, mostrando un exceso o falta de movimientos voluntarios o automáticos1. En particular, disturbio del paso se documenta con frecuencia entre los pacientes con trastornos de movimiento2,3,4. Por lo tanto, análisis de la marcha es una prueba de comportamiento adecuada para la validación de modelos animales de trastornos del movimiento. En ratones, análisis de la marcha automática se han realizado para caminar a velocidad natural5 y a las velocidades ajustab....

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Protocolo

Todos los experimentos con animales se realizaron en forma humana. La institucional Animal experimento Comité de Jichi Universidad médica aprobó el estudio. El estudio se realizó conforme a la regulación institucional experimento Animal y pautas fundamentales para la correcta conducta de Animal experimento y actividades afines en instituciones académicas de investigación bajo la jurisdicción del MEXT de Japón. Ratones en este protocolo han sido descrito previamente21.

1. colgar la caja de prueba

  1. Registrar el peso de cada ratón. Marque la cola Pen de la marca para la discriminación individual (por ejemplo

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Resultados

Los ratones machos heterocigotos de Atp1a3 (Atp1a3+ / −) que son el modelo de ratón para inicio rápido distonía parkinsonismo y hermanos de camada de tipo salvaje fueron utilizados en este protocolo. Atp1a3+ / − mostraron significativamente más cortos longitudes de zancada de la extremidad delantera y trasera que las del tipo salvaje en 4 semanas de edad (figura 5A y figura 5B, abr.......

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Discusión

El análisis de la huella y la caja colgante prueba Test conductual simple y barato para la función motora de los ratones. Los fenotipos de neurobehavioral en varios modelos de ratón han sido correctamente detectados por estas pruebas. Por ejemplo, acortar la longitud de zancada en esclerosis lateral amiotrófica24, mayor longitud de zancada asimétrica en la ataxia-telangiectasia25, mayor longitud de la superposición de la enfermedad de Huntington26 y .......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por KAKENHI de JSPS (sociedad japonesa para la promoción de la ciencia) (subvenciones para investigación científica), conceder subsidios de universidades privadas y número 18K 07373 (H.S.).

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Caja colganteO' Hara & Co.http://ohara-time.co.jp/products/wire-hanging-test/
RotuladorZEBRAMO-120-MC-BK
Caja de porteríaO' Hara & Co.http://ohara-time.co.jp/products/balanced-beam-test/Accesorio para aparatos de prueba de haz equilibrado
CajasO' Hara & Co.-Pared lateral de la pista
Tinta negraShin-asahi-Tinta
rojaMaruyamakogyoBC-6
Placa de Petri DesechableCorning351008Placas de Petri (35 mm de diámetro)
Askul Multipaper Super White J Monochrome A3Askul701-712Papel blanco (29,7 cm x 42 cm x 0,09 mm)
50 mL Tubo cónicoCorning
Taladro cuadradoFÁBRICA DE BRICOLAJE DE KAKURI Corporation (K32-0313)
430829

Referencias

  1. Warner, T. T. Movement disorders. Practical Guide to Neurogenetics. , Elsevier Health Sciences. (2008).
  2. Brashear, A., DeLeon, D., Bressman, S. B., Thyagarajan, D., Farlow, M. R., Dobyns, W. B. Rapid-onset dystonia-parkinsonism in a second family. Neurology. 48 (4), 1066-1069 (1997).
  3. Linazasoro, G., Indakoetxea, B., Ruiz, J.,....

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Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Análisis de la marchafunción motora en ratonesprueba de carga por estrésmedición de la longitud de la zancadaancho de la base posteriorpreparación del tubo de sujeciónfenotipado conductual