Aquí, presentamos métodos para estudio de alto rendimiento de una serie de cavefish mexicano comportamientos y la coloración vital de un sistema de mechanosensory. Estos métodos utilizan scripts software libre y a medida, ofreciendo un método práctico y rentable para los estudios de comportamientos.
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Artículo de método
Seguimiento conductual y Neuromast proyección de imagen de mexicana Cavefish
En este artículo
Resumen
Resumen
Animales cavernícolas han evolucionado una serie de rasgos morfológicos y de comportamiento para adaptarse a sus entornos permanentemente oscuros y escaso de alimentos. Entre estos rasgos, comportamiento de alimentación es una de las ventanas útiles en ventajas funcionales de la evolución del rasgo de comportamiento. Aquí se presentan métodos actualizados para el análisis de comportamiento de atracción de vibraciones (VAB: un comportamiento de forrajeo adaptativo) y proyección de imagen de mechanosensors asociado de adaptado de cueva tetra, Astyanax mexicanus. Además, se presentan métodos para el rastreo de alto rendimiento de una serie de comportamientos cavefish adicional incluyendo hiperactividad y pérdida de sueño. Cavefish también muestra asociality, conducta repetitiva y mayor ansiedad. Por lo tanto, cavefish sirve como un modelo animal para comportamientos evolucionados. Estos métodos utilizan scripts software libre y a medida que se pueden aplicar a otros tipos de comportamiento. Estos métodos proporcionan alternativas prácticas y rentables de software de seguimiento disponibles en el mercado.
Introducción
El tetra mexicano, Astyanax mexicanus (Teleostei: Characidae), es único entre los peces por tener dos morfos alternativas radicalmente distintas - un morph vidente, de superficie y un ciego, cavernas morph consta de varios distintos las poblaciones1. Aunque diferentes en morfología y fisiología, son interfértiles todavía2,3. Estos morfos distintas parecen que han evolucionado rápidamente (~ 20.000 años)4, que los hace un sistema modelo ideal para el estudio de rápida adaptación. Cavefish es conocidos por tener una serie de divergentes características mor....
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Protocolo
Todos los procedimientos se realizan siguiendo las pautas descritas en "Principios de laboratorio Animal Care" (Instituto Nacional de salud publicación nº 85-23, revisada en 1985) y el aprobado por la Universidad de Hawai en Manoa institucional Animal cuidado y uso Protocolo de animales Comité 17-2560-3.
1. Análisis de comportamiento (VAB) de atracción vibración (≤ 10 minutos para el procedimiento de grabación entero)
Nota: Utilice una cámara de infrarrojos sensible o construir una cámara infrarroja modificando una webcam USB. Para modificar una webcam USB, ver una descripción detallada presentada por el laboratori....
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Resultados
Los resultados presentados en este documento son ejemplos representativos de lo que puede ser adquirido con los métodos presentados. Por lo tanto, resultados pueden diferir ligeramente de los presentados aquí para peces superficie dependiendo de las condiciones experimentales y cavefish.
Comportamiento de atracción de vibraciones
Resultados representat.......
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Discusión
Estos métodos presentados son de fácil acceso pero pueden ser complicados de realizar debido a la naturaleza de sus orígenes de freeware. Por lo tanto, se recomienda realizar ensayos de prueba y análisis ante cualquier experimentación real.
La tasa de generación de datos puede ser rápida una vez que se establecen el marco experimental y analítico. Una vez establecida, es posible grabamos dos peces en 7 minutos para el ensayo de VAB, 30 peces en 24 h para el ensayo de actividad/sueño y un pez d.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Agradecemos a todos los miembros del laboratorio de Yoshizawa incluyendo N. Cetraro, Simon N., C. Valdez, C. Macapac, J. Choi, Lu L., J. Nguyen, S. Podhorzer, Hernandes H., J. Fong, Kato J. e I. Señor, para el cuidado de peces en los pescados experimentales utilizados en este manuscrito. También agradecemos a los miembros de lab A. Keene incluyendo Masek de P. para entrenar a mi montar cámara IR CCD. Por último, nos gustaría agradecer el Media Lab - Facultad de ciencias sociales - escuela de comunicaciones en la Universidad de Hawai ' i Mānoa su inestimable ayuda para hacer el video, especialmente B. Smith, J. Lam y blanco S. a. Este trabajo fue apoyado por Fundación ....
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| 4-Di-1-ASP (4-(4-(dimetilaminostiril)-1-yoduro de metilpiridinio) | MilliporeSigma | D3418 | |
| longitud de onda de 880 nm luz negra | Iluminación avanzada | BL41192-880 | |
| avfs | freeware | Versión 1.0.0.6 | http://turtlewar.org/avfs/ |
| Avisynth | freeware | Versión 2.6.0 | http://avisynth.nl/index.php/Main_Page |
| Cygwin | freeware | Versión 2.11.0 | https://www.cygwin.com/ |
| de ensayo cilíndrica (plato de vidrio Pyrex de 325 ml) | Corning | 3140-100 | 10 cm de diámetro 5 cm de alto |
| Ethovision XT | Noldus Información Tecnología, Wageningen, Países Bajos | Versión 14 | https://www.noldus.com/animal-behavior-research/products/ethovision-xt |
| Fish Aquarium Cylinder Soft Sponge Stone Filtro de agua, Black | Jardin (hasta Amazon.com) | NA | Filtro de esponja para sistema de registro de sueño/hiperactividad |
| Grado A Huevos de camarones en salmuera Camarones | en salmuera directos | BSEA16Z | |
| ImageJ | freeware | Versión 1.52e | https://imagej.nih.gov/ij/ |
| macro 1.8/12.5-75mm Lente zoom con montura C | Toyo | NA | Conéctelo a la cámara web USB mediante el uso de la montura C, que se imprime en la impresora 3D |
| Regulador de neutro | Seachem | NA | |
| Filtro óptico de paso largo IR de plástico fundido | óptico Edmund optics | 43-948 | Cortado en una pequeña pieza para que quepa en el CCD de la cámara web USB |
| pfmap | freeware | Build 178 | http://pismotec.com/download/ (en " Descargar Archivo" enlace en la parte inferior) |
| Reef Crystals Reef Salt | Instant Ocean | RC15-10 | |
| SwisTrack | freeware Version 4 | https://en.wikibooks.org/wiki/SwisTrack | |
| USB webcam (LifeCam Studio 1080p HD Webcam) | Microsoft | Q2F-00013 | Corte 2-2,5 cm de la parte delantera |
| WinAutomation | freeware Version 8 | https://www.winautomation.com/ (free-alone aplicación para este procedimiento) | |
| Sistema operativo Windows | Microsoft | 7, 8 o 10 | https://www.microsoft.com/en-us/windows |
| x264vfw | freeware | NA | https://sourceforge.net/projects/x264vfw/ |
Referencias
- Keene, A. C., Yoshizawa, M., McGaugh, S. E. Biology and Evolution of the Mexican Cavefish. Biology and Evolution of the Mexican Cavefish. , Elsevier Inc. Amsterdam. (2015).
- Mitchell, R. W., Russell, W. H., Elliott, W. R.
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Reimpresiones y permisos
