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Cirugía de nervios faciales en el modelo de rata para estudiar la inhibición y regeneración axonal

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DOI:

10.3791/59224

5 de mayo de 2020

En este artículo

Resumen

Este protocolo describe un enfoque reproducible para la cirugía del nervio facial en el modelo de rata, incluyendo descripciones de varios patrones inducibles de lesión.

Resumen

Este protocolo describe métodos consistentes y reproducibles para estudiar la regeneración e inhibición axonal en un modelo de lesión del nervio facial de rata. El nervio facial puede ser manipulado a lo largo de toda su longitud, desde su segmento intracraneal hasta su curso extratemporal. Hay tres tipos principales de lesión nerviosa utilizados para el estudio experimental de propiedades regenerativas: aplastamiento nervioso, transección y brecha nerviosa. La gama de posibles intervenciones es vasta, incluyendo la manipulación quirúrgica del nervio, la administración de reactivos o células neuroactivas, y ya sea manipulaciones centrales o de órganos finales. Las ventajas de este modelo para estudiar la regeneración nerviosa incluyen simplicidad, reproducibilidad, consistencia entre especies, tasas de supervivencia confiables de la rata y un mayor tamaño anatómico en relación con los modelos murinos. Sus limitaciones implican una manipulación genética más limitada frente al modelo de ratón y la capacidad regenerativa superlativa de la rata, de modo que el científico del nervio facial debe evaluar cuidadosamente los puntos de tiempo para la recuperación y si traducir los resultados a animales superiores y estudios en humanos. El modelo de rata para la lesión del nervio facial permite parámetros funcionales, electrofisiológicos e histomorfométricos para la interpretación y comparación de la regeneración nerviosa. Por lo que cuenta con un enorme potencial para promover la comprensión y el tratamiento de las consecuencias devastadoras de la lesión del nervio facial en pacientes humanos.

Introducción

La lesión del nervio craneal en la región de la cabeza y el cuello puede ser secundaria a las etiologías congénitas, infecciosas, idiopáticas, iatrogénicas, traumáticas, neurológicas, oncológicas o sistémicas1. El nervio craneal VII, o el nervio facial, se ve comúnmente afectado. La incidencia de disfunción del nervio facial puede ser significativa, ya que afecta a 20 a 30 por cada 100.000 personas cada año2. Las principales ramas motoras del nervio facial son las ramas temporal, cigomática, bucal, mandibular marginal y cervical; dependiendo de la rama involucrada, las consecuencias pueden incluir incompetencia oral o ba....

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Protocolo

Todas las intervenciones se realizaron de acuerdo con las directrices de los Institutos Nacionales de Salud (NIH). El protocolo experimental fue aprobado por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) de la Universidad de Michigan antes de su implementación. Se utilizaron ratas hembras Sprague-Dawley adultas de diez semanas de edad.

1. Antes del día operativo

  1. Asegurar un stock adecuado de instrumentos quirúrgicos esterilizados, medicamentos analgésicos, medicamentos anestésicos y oxígeno antes del día de funcionamiento. Consulte la Tabla de materiales para obtener una lista completa.

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Resultados

Después del procedimiento quirúrgico inicial, hay dos tipos principales de medidas de resultado: mediciones en serie en el animal vivo y mediciones que requieren sacrificar el animal. Ejemplos de mediciones en serie incluyen ensayos electrofisiológicos, tales como una medida de potencial de acción muscular compuesta30, evaluaciones del movimiento muscular facial a través de asistida por láser o videografía significa9, o incluso imágenes en v.......

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Discusión

El modelo de lesión del nervio facial de rata ha surgido como el sistema más versátil para la evaluación de factores neurotróficos debido a su accesibilidad quirúrgica, patrón de ramificación, y significación fisiológica27,,29,33,34,35,36. La combinación de video demostración y aplicación de datos animales transgénicos abre n.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

S.A.A. está financiado por el Programa de Subvenciones Leslie Bernstein de la Academia Americana de Cirugía Plástica Facial y Reconstructiva Leslie Bernstein.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Isoflurano al 1,8%VetOne13985-030-40
11-0 Microsuturas de nailonAROSutureTK-117038
4-0 sutura monocrilativaVWR75982-084
Buprenorfina SRZooPharmMIF 900-006
CarprofenoSigma-AldrichMFCD00079028
ClorhexidinaVWR
Pinza de joyeroVWR21909-458
Micro Weitlaner retractorVWR82030-146
MicrotijerasVWR100492-348
Mini tijera de tenotomíaVWR89023-522
Number 15 hoja de bisturí VWR102097-834
Microscopio de mandoLeica
Gel para ojos de vaselinaPharmaderm B002LUWBEK
Agua estérilVWR89125-834
Adhesivo para tejidosVetbond, 3MNC9259532
Almohadilla conductora de aguaAqua Relief SystemARS2000B
BupivacaínaUso como analgésico local
IC19135805

Referencias

  1. Chan, J. Y. K., Byrne, P. J. Management of facial paralysis in the 21st century. Facial Plastic Surgery. 27 (4), 346-357 (2011).
  2. Razfar, A., Lee, M. K., Massry, G. G., Azizzadeh, B. Facial Paralysis Reconstruction. Otolaryngologic Clinics of North America. 49 (2), 459....

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Etiquetas

Regeneraci n axonalmodelo de lesi n nerviosaaplastamiento del nerviotransecci n del nerviomodelo de brecha nerviosaan lisis histomorfom tricorata Thy1 GFPimagen en vivo

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