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Artículo de método

Evaluación de la lateralización del hemisferio con registro de potencial de campo local bilateral en corteza motora secundaria de ratones

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DOI:

10.3791/59310

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31 de julio de 2019

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En este artículo

Resumen

Presentamos un registro electrofisiológico in vivo del potencial de campo local (LFP) en la corteza motora secundaria bilateral (M2) de ratones, que se puede aplicar para evaluar la lateralización del hemisferio. El estudio reveló niveles alterados de sincronización entre la izquierda y la derecha M2 en ratones APP/PS1 en comparación con los controles WT.

Resumen

Este artículo demuestra procedimientos completos y detallados para el registro bilateral in vivo y el análisis del potencial de campo local (LFP) en las áreas corticales de ratones, que son útiles para evaluar posibles déficits de lateralidad, así como para la conectividad cerebral y el acoplamiento de las actividades de las redes neuronales en roedores. Los mecanismos patológicos subyacentes a la enfermedad de Alzheimer( AD), una enfermedad neurodegenerativa común, siguen siendo en gran medida desconocidos. Se ha demostrado la lateralidad cerebral alterada en personas envejecidas, pero no se ha determinado si la lateralización anormal es uno de los primeros signos de AD. Para investigar esto, registramos PFP bilaterales en ratones modelo AD de 3-5 meses, APP/PS1, junto con controles de tipo salvaje (WT). Los PFP de la corteza motora secundaria izquierda y derecha (M2), específicamente en la banda gamma, estaban más sincronizados en ratones APP/PS1 que en los controles WT, lo que sugiere una disminución de la asimetría hemisférica de M2 bilateral en este modelo de ratón AD. En particular, los procesos de registro y análisis de datos son flexibles y fáciles de llevar a cabo, y también se pueden aplicar a otras vías cerebrales al realizar experimentos que se centran en circuitos neuronales.

Introducción

La enfermedad de Alzheimer es la forma más común de demencia1,2. La deposición de la proteína beta amiloide extracelular (proteína amiloide, A-) y los enredos neurofibrilares intracelulares (NFT) son las principales características patológicas de AD3,4,5, pero los mecanismos subyacentes a la AD patogénesis siguen siendo en gran medida poco claras. La corteza cerebral, una estructura clave en la cognición y la memoria, se ve afectada en el año6d.C., y los déficits motores como la marcha lenta, l....

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Protocolo

Todos los animales fueron emparejados en condiciones estándar (12 h de luz/oscuridad, ambiente de temperatura constante, libre acceso a alimentos y agua) de acuerdo con las directrices y experimentos del Ministerio de Ciencia y Tecnología de Los Animales de Laboratorio de China por el comité ético local de la Universidad de Guangzhou. Este es un procedimiento de no supervivencia.

NOTA: Para los datos mostrados en los resultados representativos, los ratones dobles transgénicos APP/PS1 (B6C3-Tg (APPswe, PSEN1dE9) 85Dbo/J) y los controles de tipo salvaje (WT) de tipo littermate a 3-5 meses de edad, se utilizaron para grabaciones (n .10, por gr....

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Resultados

Para ver si la patología temprana de la AD afecta la capacidad de lateralización del hemisferio, realizamos grabaciones bilaterales de LFP extracelulares en el M2 izquierdo y derecho de los ratones APP/PS1 y los controles WT (de 3 a 5 meses de edad), y analizamos la correlación cruzada de estos PFP derecho. En ratones WT, los resultados demostraron que la correlación media entre los PFP izquierdo y derecho en los retrasos positivos difería significativamente de la que en los retrasos negativos en el tiempo, lo que implic.......

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Discusión

Aquí informamos del procedimiento para el registro extracelular bilateral in vivo, junto con el análisis de la sincronización de señales LFP de dos regiones, que es flexible y fácil de llevar a cabo para estimar la lateralización del hemisferio cerebral, así como el conectividad, direccionalidad o acoplamiento entre las actividades neuronales de dos áreas cerebrales. Esto puede ser ampliamente utilizado para revelar no sólo actividades de grupo-neuronal, sino también algunas propiedades básicas de la electrofisi.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por subvenciones de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (31771219, 31871170), la División de Ciencia y Tecnología de Guangdong (2013KJCX0054), y la Fundación de Ciencias Naturales de la Provincia de Guangdong (2014A030313418, 2014A030313440).

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Amplificador diferencial AC/DCA-M Systemsmodelo 3000
Convertidor digital analógicoCambridge Electronic Design Ltd.Micro1401
Micropipetas de borosilicato de vidrio Compañíade equipos experimentales de enseñanza de resorte de Nanjing161230Diámetro exterior: 1,0 mm
Extractor de microelectrodosNarishigePC-10
NaClFábrica de reactivos químicos de Guangzhou7647-14-5
Soporte de microelectrodo de pinWorld Precision Instruments, INC.
Spike2 Diseño Electrónico de Cambridge Ltd.
Microscopio estereoscópicoZeiss435064-9020-000
Aparato estereotáxico RWD Life Science68045
UretanoSigma-Aldrich94300
MEH3SW10

Referencias

  1. Goedert, M., Spillantini, M. G. A century of Alzheimer's disease. Science. 314 (5800), 777-781 (2006).
  2. Perrin, R. J., Fagan, A. M., Holtzman, D. M. Multimodal techniques for diagnosis and prognosis of Alzheimer's disease. Nature. 461 (7266), 916-922 (2009).
  3. Cummings, B. J., Pike, ....

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