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Artículo de método

Medición de la dependencia del campo magnético de relajación Spin-Lattice de hiperpolarizado [1-13C]pyruvate

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DOI:

10.3791/59399

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13 de septiembre de 2019

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En este artículo

Resumen

Presentamos un protocolo para medir la dependencia del campo magnético del tiempo de relajación de la celosía de espín de 13compuestos enriquecidos con C, hiperpolarizados mediante polarización nuclear dinámica, utilizando relaxometría rápida de ciclo de campo. Específicamente, lo hemos demostrado con [1-13C]pyruvate, pero el protocolo podría extenderse a otros sustratos hiperpolarizados.

Resumen

El límite fundamental para las aplicaciones de imágenes in vivo de compuestos enriquecidos con 13C hiperpolarizados son sus tiempos de relajación finita de celosía de espía. Varios factores afectan las tasas de relajación, como la composición del tampón, el pH de la solución, la temperatura y el campo magnético. En este último aspecto, el tiempo de relajación de la celosía de espín se puede medir en las fortalezas clínicas del campo, pero en los campos más bajos, donde estos compuestos se dispensan desde el polarizador y se transportan a la RMN, la relajación es aún más rápida y difícil de medir. Para tener una mejor comprensión de la cantidad de magnetización perdida durante el transporte, utilizamos relajaometría rápida de ciclismo de campo, con detección de resonancia magnética de 13núcleos C a 0,75 T, para medir la dispersión de la resonancia magnética nuclear de la tiempo de relajación de la celosía de la hiperpolarización [1-13C]piruvato. La polarización nuclear dinámica de disolución se utilizó para producir muestras hiperpolarizadas de piruvato a una concentración de 80 mmol/L y pH fisiológico (7,8). Estas soluciones se transfirieron rápidamente a un relajantemetro de ciclo de campo rápido para que la relajación de la magnetización de la muestra pudiera medirse en función del tiempo utilizando un ángulo de volteo pequeño calibrado (3o-5o). Para mapear la dispersión T1 del C-1 de piruvato, registramos datos para diferentes campos de relajación que oscilan entre 0.237 mT y 0.705 T. Con esta información, determinamos una ecuación empírica para estimar la relajación de la celosía de espín del sustrato hiperpolarizado dentro del rango mencionado de campos magnéticos. Estos resultados se pueden utilizar para predecir la cantidad de magnetización perdida durante el transporte y para mejorar los diseños experimentales para minimizar la pérdida de señal.

Introducción

Las imágenes espectroscópicas de resonancia magnética (MRSI) pueden producir mapas espaciales de metabolitos detectados por imágenes espectroscópicas, pero su uso práctico a menudo está limitado por su sensibilidad relativamente baja. Esta baja sensibilidad de los métodos de espectroscopia y imágenes por resonancia magnética in vivo se deriva del pequeño grado de magnetización nuclear alcanzable a temperaturas corporales y a las intensidades razonables del campo magnético. Sin embargo, esta limitación puede superarse mediante el uso de polarización nuclear dinámica (DNP) para mejorar en gran medida la magnetización in vitro de sustratos líquidos, que posteriormente se....

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Protocolo

1. Preparación de muestras

NOTA: Los pasos 1.1-1.8 se realizan una sola vez

  1. Preparar 1 mL de stock 13Solución de ácido piruvico enriquecido con C, ampliamente utilizado para la investigación in vivo 1,2,5,6, que consiste en 15-mmol/L de triarylmethyl radical disuelto en [1- 13 C]ácido piruvico (ver Tabla de Materiales). Las alícuotas de esta solución de stock se utilizarán para las muestras que se polarizarán individualmente y posteriormente se someterán a ....

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Resultados

La Figura 2 presenta un ejemplo de un barrido de microondas de rango completo de alta resolución para el ácido piruvico. Para el caso presentado, esa frecuencia óptima de microondas corresponde a 94.128 GHz, resaltado en el inserto de la figura. Nuestro sistema DNP normalmente puede funcionar en el rango de 93.750 GHz a 94.241 GHz con un tamaño de paso de 1 MHz, tiempo de polarización de hasta 600 s y potencia de hasta 100 mW. Una gama completa de frecuencias se investiga sólo para sustratos.......

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Discusión

El uso de DNP para mejorar la adquisición de señal es una solución técnica a la insuficiente señal de resonancia magnética disponible a partir de núcleos de 13C a concentraciones limitadas, como las utilizadas en inyecciones de animales, pero presenta otros desafíos experimentales. Cada medición de relajación que se muestra en la Figura 7 representa una medición de una muestra preparada de forma única porque no se puede repolarizar después de la disolución para la remedición. Esto.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen revelaciones.

Agradecimientos

Los autores desean agradecer al Instituto de Ontario para la Investigación del Cáncer, el Programa de Traducción de Imágenes y al Consejo de Investigación de Ciencias Naturales e Ingeniería de Canadá por financiar esta investigación. También nos gusta reconocer discusiones útiles con Albert Chen, GE Healthcare, Toronto, Canadá, Gianni Ferrante, Stelar s.r.l., Italia, y William Mander, Oxford Instruments, Reino Unido.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
[1-13C]Ácido pirúvicoSigma-Aldrich, St. Louis, MO, EE. UU.677175
Tubo de RMN de 10 mmNorell, Inc., Morganton NC, EE. UU. 1001-8
Agua
Ácido etilendiaminotetraacético sal disódica dihidratada (EDTA)Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EE. UUE5134
HyperSense Dynamic Polarizador nuclearOxford Instruments, Abingdon, Reino UnidoIncluye lo siguiente: software "DNP-NMR Polarizer" utilizado para controlar y monitorear todo el polarizador DNP; "RINMR" utilizado para monitorear los niveles de polarización de estado sólido; "HyperTerminal" utilizado para comunicar el software DNP con el software RINMR que monitorea el nivel de polarización de estado sólido. También incluye el espectrómetro de sobremesa MQC para monitorizar la polarización del estado líquido junto con su propio software RINMR
MATLAB R2017b, MathWorks, Natick, MA, Incluyescripts para el ajuste no lineal de la desintegración de la magnetización a lo largo del tiempo y el análisis T1 NMRD del ácido pirúvico hiperpolarizado.
OX063 Radical triarilmetilOxford Instruments, Abingdon, Reino Unido
Medidor de pH - SympHonyVWR International, Mississauga, ON., CanadáSB70P
ProHanceBracco Diagnostics Inc.Gadoteridol, Gd-HP-DO3A
Etanol puro (100% puro)Alcoholes comerciales, Toronto, ON, CanadáP016EAAN
cuñadesarrollada internamente
Cloruro de sodioSigma-Aldrich, St. Louis, MO, EE. UUS7653
Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, EE. UU. S8045 
SpinMaster FFC2000 1T C/DCStelar s.r.l., Mede (PV) ItaliaIncluye el software "AcqNMR" que se utiliza para establecer parámetros experimentales, monitorear el ajuste y la adaptación de la bobina de RF, cargar diferentes secuencias de pulsos, calibrar el ángulo de volteo, la adquisición de datos y el ajuste de curvas, entre otras funciones. También incluye un tope de profundidad, algunos pesos y un tope de profundidad.
Cristales Trizma Pre-Engastados (pH 7.6)Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USAT7943
desionizada. Bobina de. Hidróxido de sodio

Referencias

  1. Golman, K., Zandt, R. I., Lerche, M., Pehrson, R., Ardenkjaer-Larsen, J. H. Metabolic imaging by hyperpolarized 13C magnetic resonance imaging for in vivo tumor diagnosis. Cancer Research. 66 (22), 10855-10860 (2006).
  2. Witney, T. H., Brindle, K. M.

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Reimpresiones y permisos

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