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Artículo de método

Un Protocolo de Estrés de Inmovilización Crónica para Inducir el Comportamiento Similar a la Depresión en Ratones

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DOI:

10.3791/59546

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15 de mayo de 2019

* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Este artículo proporciona un protocolo simplificado y estandarizado para la inducción de un comportamiento depresivo en ratones inmovilizados crónicamente mediante el uso de un restrainer. Además, se explican las técnicas fisiológicas y de comportamiento para verificar la inducción de la depresión.

Resumen

La depresión aún no se entiende completamente, pero se han notificado varios factores causales. Recientemente, la prevalencia de la depresión ha aumentado. Sin embargo, los tratamientos terapéuticos para la depresión o la investigación sobre la depresión son escasos. Así, en el presente documento, proponemos un modelo de ratón de depresión inducido por la restricción del movimiento. El estrés leve crónico (CMS) es una técnica bien conocida para inducir un comportamiento depresivo. Sin embargo, requiere un procedimiento complejo que consiste en una combinación de varias tensiones leves. Por el contrario, el estrés de inmovilización crónica (CIS) es un modelo de estrés crónico de fácil acceso, modificado a partir de un modelo de restricción que induce el comportamiento depresivo al restringir el movimiento usando un restrainer durante un determinado período. Para evaluar los comportamientos depresivos, la prueba de preferencia de sacarosa (SPT), la prueba de suspensión de cola (TST) y el ensayo ELISA para medir los niveles de corticosterona marcador de tensión se combinan en el presente experimento. Los protocolos descritos ilustran la inducción de la CEI y la evaluación de los cambios en el comportamiento y los factores fisiológicos para la validación de la depresión.

Introducción

El trastorno depresivo mayor (MDD) es la principal causa de discapacidad mental en todo el mundo, con una incidencia que está aumentando más rápido de lo previsto. En 2001, la Organización Mundial de la Salud predijo que el MDD sería la segunda enfermedad más común en el mundo para 2020. Sin embargo, ya era el segundo más común en 20131. Además, los antidepresivos actuales tienen muchas limitaciones, incluyendo la efectividad retardada, resistencia a los medicamentos, recaída, y varios efectos secundarios2,3. Por lo tanto, los investigadores deben desarrollar antidepresivos más eficaces....

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Protocolo

Todos los protocolos experimentales y el cuidado de los animales se llevaron a cabo de acuerdo con las directrices del Comité Universitario de Cuidado Animal para la Investigación Animal de la Universidad Nacional de Gyeongsang (GLA-100917-M0093).

1. Materiales

  1. Ratones
    1. Utilice machos de fondo de cepa C57BL/6 con un peso de 22–24 g en la semana postnatal 7. Habituate en la sala de cría durante 1 semana antes de los experimentos.
      NOTA: Todos los ratones fueron comprados a una empresa de animales de laboratorio.
    2. Los ratones domésticos se alojan individualmente en un vivario con temperatura controlada (22-24 oC) ....

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Resultados

En el experimento representativo, todos los datos se adquirieron de 6 a 8 ratones por grupo. Los materiales representativos y el método para insertar el ratón voluntariamente en el restrainer se muestran en la Figura1.

Para realizar la prueba de comportamiento y el muestreo de sangre después de la inducción de la CEI, los ratones fueron sometidos al procedimiento experimental, tal como se resume en la Figura 2A. Como se muestra en

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Discusión

La complejidad del cerebro y la heterogeneidad de MDD hacen que sea difícil crear modelos animales que reproduzcan completamente la condición. Muchos investigadores han superado esta dificultad utilizando un enfoque basado en endofenotipo32, en el que la anhedonia (falta de interés en recompensar los estímulos) y la desesperación se consideran comportamientos evolutivamente conservados y cuantificables en modelos animales, que también se ven en pacientes con depresión33. En.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Esta investigación fue apoyada por el Programa de Investigación científica básica a través de la Fundación Nacional de Investigación de Corea (NRF) financiado por el Ministerio de Educación (NRF-2015R1A5A2008833 y NRF-2016R1D1A3B03934279) y la concesión de lnstitute de Ciencias de la Salud (IHSSS GNU-2016-02) en la Universidad Nacional de Gyeongsang.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Jeringas desechables de 1 mlSungshim MedicalP000CFDO
BalanceA& D CompanyFX-2000i
Boquilla de bolaJeung Do B& PJD-C-88
Cámara CCTVKOCOMKCB-381
Kits de corticosterona ELISACayman Chemical
Luxómetro digitalTESTES-1330A
Ethovision XT 7.1Noldus Information Technology
IsofluranoHANA PHARM CO., LTD.Solución Ifran
RatonesKoatechC57BL/6
cepa RestrainerDae-jong Instrument IndustryDJ-428
Sacarosa (sacarosa)DAEJUNG7501-4400
Sistema de anestesia de isoflurano para animales pequeñosSummit
BarraEl aparato se fabricó en el laboratorio para la prueba TST
de suspensión traseraEl aparato se fabricó en el laboratorio
TimerElectronics TomorrowTL-2530
Botella de aguaJeung Do B& PJD-C-79
acrílica Caja

Referencias

  1. Ferrari, A. J., et al. Burden of Depressive Disorders by Country, Sex, Age, and Year: Findings from the Global Burden of Disease Study 2010. PLoS Medicine. 10 (11), (2013).
  2. Trivedi, M. H., et al.

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Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Prueba de preferencia de sacarosaPrueba de suspensión por la colaELISA de corticosteronaMedición del peso corporalMonitoreo de la ingesta de alimentosDieta suplementada con glutaminaProtocolo de restricción de ratonesAnálisis conductual