Este trabajo presenta un protocolo para realizar una implantación estereoquirúrgica y neuroquirúrgica de matrices de microelectrodos en el marmoset común. Este método permite específicamente grabaciones electrofisiológicas en animales que se comportan libremente, pero se puede adaptar fácilmente a cualquier otra intervención neuroquirúrgica similar en esta especie (por ejemplo, cánula para administración de fármacos o electrodos para estimulación cerebral).
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Artículo de método
Cirugía estereotaxia para la implantación de matrices de microelectrodos en el Marmoset común (Jacchus Callithrix)
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Resumen
Resumen
Los marmosets(Callithrix jacchus)son pequeños primates no humanos que están ganando popularidad en la investigación biomédica y preclínica, incluyendo las neurociencias. Filogenéticamente, estos animales están mucho más cerca de los seres humanos que los roedores. También muestran comportamientos complejos, incluyendo una amplia gama de vocalizaciones e interacciones sociales. Aquí, se describe un procedimiento neuroquirúrgico estereotaxico eficaz para la implantación de matrices de electrodos de grabación en el marmoset común. Este protocolo también detalla los pasos pre y postoperatorios del cuidado de los animales que se requieren para realizar con éxito una cirugía de este tipo. Por último, este protocolo muestra un ejemplo de potencial de campo local y registros de actividad de pico en un marmoset de trabajo libre 1 semana después del procedimiento quirúrgico. En general, este método proporciona una oportunidad para estudiar la función cerebral en marmosets despiertos y de comportarse libremente. El mismo protocolo puede ser fácilmente utilizado por los investigadores que trabajan con otros primates pequeños. Además, se puede modificar fácilmente para permitir otros estudios que requieren implantes, como electrodos estimulantes, microinyecciones, implantación de optrodes o cánulas guía, o ablación de regiones de tejido discretas.
Introducción
Los marmostes comunes (Callithrix jacchus) están ganando reconocimiento como un organismo modelo importante en muchos campos de la investigación, incluyendo la neurociencia. Estos primates del nuevo mundo representan un importante modelo animal complementario tanto para roedores como para otros primates no humanos (NCP), como el macaco rhesus. Al igual que los roedores, estos animales son pequeños, fáciles de manipular y relativamente económicos para cuidar y criar1,2,3,4,en comparación con los NCP más grandes. Además, estos animale....
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Protocolo
Los experimentos con animales se realizaron de acuerdo con la Guía de Institutos Nacionales de Salud para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio y fueron aprobados por el Comité de ética del Instituto Santos Dumont (protocolo 02/2015AAS).
1. Preparación de la cirugía
- Conecte cada matriz de electrodos a un soporte de electrodo compatible con el marco estereotaxico que se utilizará.
- Conecte un soporte de electrodo al micromanipulador estereotaxico y ajuste un microhilo a las coordenadas interaurales. Repita esto para las matrices y soportes de electrodos adicionales, si es necesario.
NOTA: La coordenada interaural ....
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Resultados
El propósito de este estudio fue describir un procedimiento neuroquirúrgico estereotaxico para la implantación de matrices de microelectrodos para grabaciones electrofisiológicas en el marmoset común. Una cirugía típica (desde la inducción de la anestesia hasta la recuperación de la anestesia) durará aproximadamente 5 a 7 h, dependiendo del número de matrices implantadas. Aquí, dos matrices fueron implantadas simétricamente, una en cada hemisferio cerebral. Cada matriz contenía 32 microcables de acero inoxidable dispuest.......
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Discusión
Este trabajo proporciona una descripción detallada de los procedimientos involucrados en la implantación de matrices de registro de microelectrodos en el cerebro de la marmalseta. Este mismo protocolo se puede utilizar fácilmente al implantar electrodos, ya sean caseros o disponibles comercialmente, en otros primates pequeños. Además, se puede adaptar fácilmente para otros extremos experimentales que requieren una focalización precisa de las estructuras cerebrales. Por lo tanto, este protocolo es deliberadamente vago con.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Los autores quieren agradecer a Bernardo Luiz por su asistencia técnica en el rodaje y la edición. Esta obra fue apoyada por el Instituto Santos Dumont (ISD), el Ministerio de Educación de Brasil (MEC) y la Coordenaéo de Aperfei-oamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES).
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Equipments | |||
| 683 Ventilador para animales pequeños | Harvard Apparatus, Inc. | 55-0000 | |
| Montaje de anestesia | BRASMED | COLIBRI | |
| Barber Clippers | Mundial | HC-SERIES | |
| Taladro dental | Norgen | B07-201-M1KG | |
| Almohadilla térmica homeotérmica y monitor | Harvard Apparatus, Inc. | 50-7212 | |
| Martí Marco estereotáxico | Narishige Laboratorio de Instrumentos Científicos | SR-6C-HT | |
| Monitor de Paciente y Oxímetro de Pulso | Bionet Co., Ltd | BM3 | |
| Micromanipulador Estereotáxico | Narishige Laboratorio de Instrumentos Científicos | SM-15R | |
| Microscopio Quirúrgico | Opto | SM PLUS IBZ | |
| Instruments | |||
| Allis pinza de tejido | Sklar | 36-2275 | |
| Alm Retractor, punta redondeada, 4x4 dientes | Rhosse | RH11078 | |
| Pinzas McPherson en ángulo | Oftalmologiabr | 11301A Tijeras | |
| quirúrgicas curvas | Harvard Apparatus, Inc. | 72-8422 | |
| Pinza de tejido curvo | Sklar | 47-1186 | |
| Pinza de disección delicada | WPI | WP5015 | |
| Broca dental | Microdont | ISO.806.314.001.524.010 | |
| Pinza de tejido Essring | Sklar | 19-2460 | |
| FG 1/4 Broca dental | Microdont | ISO.700.314.001.006.005 | |
| Portaagujas Halsey | WPI | 15926-G | |
| Halstead Pinza para mosquitos | WPI | 503724-12 | |
| Pinza Hemostática, Recta | Sklar | 17-1260 | |
| Pinza de Jewler | Sklar | 66-7436 | |
| McPherson-Vannas Microtijera Optatlómica, punta de 3 mm | Argos Instrumental | ARGOS-4004 | |
| Pereosteal Mango raspador | Golgran | 38-1 | |
| Bisturí Harvard Apparatus | , Inc. | 72-8354 | |
| Destornilladores | Eurotool | SCR-830.00 | |
| Hierro de corte | Hikari | 21K006 | |
| Tijera quirúrgica | Harvard Apparatus, Inc. | 72-8400 | |
| Pinza dentada | WPI | 501266-G | |
| Desechable/De un solo uso | |||
| 26 G | Descarpack | 7898283812785 | |
| campo quirúrgico de 130 cm x 140 cm, ProtDesc preesterilizado | 7898467276344 | ||
| Aguja 24G, Preesterilizada | Descarpack | 7898283812846 | |
| campo quirúrgico de 50 cm x 50 cm, preesterilizada | Esterili-med | 110100236 | |
| Sondas con punta de algodón, preesterilizadas | Jiangsu Suyun Medical Materials Co. LTD | 23007 | |
| Qutips | Higie Topp | 7898095296063 | |
| con punta de algodón Hecho | en casa | ||
| Tubo endotraqueal sin manguito, diámetro interno 2,0 mm, diámetro exterior 2,9 mm | Solidor | 7898913077201 | |
| Alambre de cobre estañado, 0,15 mm de diámetro | |||
| M1.4x3 Tornillos de acero inoxidable | USMICROTORNILLO | M14-30M-SS-P | |
| Cinta médica | Missner | 7896544910102 | |
| Suturas quirúrgicas de nailon | Shalon | N540CTI25 | |
| Cuchilla de bisturí, preesterilizada | AdvantiVe | 1037 | |
| soldadura | Kester | SN63PB37 | |
| solución salina estéril 0.9% | Isofarma | 7898361700041 | |
| quirúrgicos estériles | Maxitex | 7898949349051 | |
| Bata quirúrgica estéril | ProtDesc | 7898467281208 | |
| Gasa quirúrgica, 15 cm x 26 cm preesterilizado | Hé ika | 7898488470315 | |
| Gelfoam | Pfizer | ||
| Medicamentos/Productos químicos | |||
| 0,25 mg/ml Atropina | Isofarma | ||
| 10% Lidocaína Spray | Produtos Quí micos Farmacê uticos Ltda. | ||
| Antibiótico veterinario Enrofloxacino al 2,5% | Chemitec | 0137-02 | |
| Dexametasona Antiinflamatorio Veterinario | MSD | R06177091A-00-15 | |
| Peróxido de hidrógeno | Farmax | 7896902211537 | |
| Isoflourane | BioChimico | 7897406113068 | |
| Jet Solución | de polimerización acrílicaArtigos Odontoló gicos Clá ssico | ||
| Jet Auto Polimerizado Acrílico | Artigos Odontoló gicos Clá ssico | ||
| Ketamina 10% | Syntec | ||
| Lidocaína y Fenilefrina 1,8 ml anestésico local | SS White | 7892525041049 | |
| Povidona-Yodo solutiom | Farmax 7896902234093 | ||
| Riohex 2% jabón quirúrgico | Rioquí mica | 7897780209418 | |
| Pintura de plata | SPI Suministros | 05002-AB | |
| Cloruro de tramadol 50 mg/ml | Uniã o Quí mica | 7896006245452 | |
| Gel refrescante (ácido poliacrílico) | Allergan |
Referencias
- Okano, H., Hikishima, K., Iriki, A., Sasaki, E. The common marmoset as a novel animal model system for biomedical and neuroscience research applications. Seminars in Fetal and Neonatal Medicine. 17 (6), 336-340 (2012).
- Harris, R. A., et al.
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Reimpresiones y permisos
