Evaluación de la cicatrización aguda de heridas utilizando los modelos de esponja de alcohol de polivinilo subcutáneo dorsal y modelos de herida sin piel de cola excisional.

Meredith  J. Crane; William  L. Henry Jr; Holly  L. Tran; Jorge  E. Albina; Amanda M. Jamieson

doi:10.3791/60653

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Artículo de método

Evaluación de la cicatrización aguda de heridas utilizando los modelos de esponja de alcohol de polivinilo subcutáneo dorsal y modelos de herida sin piel de cola excisional.

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DOI:

10.3791/60653

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25 de marzo de 2020

Meredith J. Crane¹ , William L. Henry Jr¹ , Holly L. Tran¹ , Jorge E. Albina² , Amanda M. Jamieson¹

¹Department of Molecular Microbiology & Immunology, Brown University, ²Division of Surgical Research, Department of Surgery, Rhode Island Hospital and The Warren Alpert School of Medicine of Brown University

En este artículo

Resumen

Aquí, se describen dos modelos de cicatrización de heridas murinas, uno diseñado para evaluar las respuestas de cicatrización de heridas celulares y citoquinas y el otro para cuantificar la tasa de cierre de heridas. Estos métodos se pueden utilizar con modelos de enfermedades complejas como la diabetes para determinar los mecanismos de varios aspectos de la cicatrización deficiente de heridas.

Resumen

La cicatrización de heridas es un proceso complejo que requiere la progresión ordenada de la inflamación, la formación de tejido de granulación, la fibrosis y la resolución. Los modelos murinos proporcionan una valiosa visión mecanicista de estos procesos; sin embargo, ningún modelo solo aborda completamente todos los aspectos de la respuesta de cicatrización de heridas. En su lugar, es ideal utilizar varios modelos para abordar los diferentes aspectos de la cicatrización de heridas. Aquí, se describen dos métodos diferentes que abordan diversos aspectos de la respuesta de cicatrización de heridas. En el primer modelo, las esponjas de alcohol polivinílico se implantan por vía subcutánea a lo largo del dorso del ratón. Después de la recuperación de la esponja, las células pueden ser aisladas por interrupción mecánica, y los fluidos se pueden extraer por centrifugación, lo que permite una caracterización detallada de las respuestas celulares y de citoquinas en el ambiente agudo de la herida. Una limitación de este modelo es la incapacidad de evaluar la tasa de cierre de la herida. Para ello, se utiliza un modelo de escisión de la piel de la cola. En este modelo, una pieza rectangular de 10 mm x 3 mm de piel de cola se extirpada a lo largo de la superficie dorsal, cerca de la base de la cola. Este modelo se puede fotografiar fácilmente para el análisis planimétrico para determinar las tasas de curación y se puede extirpar para el análisis histológico. Ambos métodos descritos se pueden utilizar en cepas de ratón genéticamente alteradas, o en combinación con modelos de condiciones comorbilidades, como diabetes, envejecimiento o infección secundaria, con el fin de dilucidar los mecanismos de cicatrización de heridas.

Introducción

Hay muchos sistemas de modelos murinos disponibles para examinar los procesos de cicatrización de heridas, cada uno posee ventajas y limitaciones específicas^1,^,^2. Los siguientes métodos presentan dos modelos de heridas murinas, cada uno de los cuales aborda un aspecto particular de la respuesta de cicatrización de heridas, y que se pueden utilizar para identificar la causa y el efecto de las perturbaciones en la respuesta a la lesión. El proceso de cicatrización de heridas ocurre en fases distintas. La primera fase es inflamatoria, caracterizada por la rápida afluencia de plaquetas, neutrófilos y monocitos/mac....