En este estudio, se desarrolló un sistema de alimentación para las etapas ninfa y larval de la garrapata dura utilizando una cápsula unida al ratón de laboratorio. La cápsula de alimentación está hecha de materiales flexibles y permanece firmemente unida al ratón durante al menos una semana y permite un monitoreo cómodo de la alimentación de las garrapatas.
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Artículo de método
Un modelo basado en cápsulas para la infestación por etapas inmaduras de garrapatas duras en ratones de laboratorio
En este artículo
Resumen
Resumen
Las garrapatas son parásitos obligatorios de alimentación sanguínea en todas las etapas del desarrollo (excepto los huevos) y se reconocen como vectores de diversos patógenos. El uso de modelos de ratón en la investigación de garrapatas es fundamental para comprender su biología y las interacciones tick-host-patógeno. Aquí demostramos una técnica no laboriosa para la alimentación de etapas inmaduras de garrapatas duras en ratones de laboratorio. El beneficio del método es su simplicidad, corta duración y la capacidad de monitorear o recoger ticks en diferentes puntos de tiempo de un experimento. Además, la técnica permite la fijación de dos cápsulas individuales en el mismo ratón, lo que es beneficioso para una variedad de experimentos donde se requieren dos grupos diferentes de garrapatas para alimentarse del mismo animal. La cápsula no irritante y flexible está hecha de materiales de fácil acceso y minimiza las molestias de los animales experimentales. Además, la eutanasia no es necesaria, los ratones se recuperan completamente después del experimento y están disponibles para su reutilización.
Introducción
Las garrapatas son vectores importantes de varios patógenos y representan un grave riesgo para la salud animal y humana1. La creación de un sistema de alimentación eficaz es crucial al estudiar su biología, interacciones garrapata-huésped-patógeno, o el establecimiento de medidas de control eficaces. Actualmente, varios sistemas de alimentación artificial, que evitan el uso de animales vivos están disponibles para las garrapatas2,3,4 y estos deben ser utilizados siempre que las condiciones experimentales lo permitan. Sin embargo, en diversos entornos e....
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Protocolo
Tenga en cuenta que este protocolo solo se puede aplicar cuando se cumplen todas las medidas de bienestar y seguridad en el laboratorio. Este protocolo recibió permiso para utilizar ratones para la alimentación de garrapatas por el Comité de ética para experimentos animalesComEth Anses/ENVA/UPEC, Números de permiso E 94 046 08. Para el punto final, los animales fueron expuestos aCO2 durante 9 min en dos fases de 4 y 5 min cada una.
1. Preparación de la cápsula
- Pegue espuma de EVA de 2 mm de espesor y la espuma adhesiva doble pegajosa juntas(Figura 1A).
- Usando un punzón de cuero de....
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Resultados
Proponemos el método detallado paso a paso para alimentar etapas inmaduras de garrapata dura en cápsulas de espuma de EVA aplicadas a la espalda de un ratón (Figura 2). Este protocolo no laborioso es adecuado para varios tipos de experimentos cuando se requiere una supervisión y recolección precisa de garrapatas. Las principales ventajas de este método son su simplicidad, materiales rentables de fácil acceso y corta duración. Además, logramos conectar dos cápsulas a un individuo de ratón (
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Discusión
El paso más crítico en el protocolo es el encolado firme de la cápsula a la piel del ratón. Por lo tanto, el pegamento de látex debe aplicarse homogéneamente a toda la superficie de espuma de EVA de la cápsula y se debe aplicar presión constante durante 3 minutos, especialmente en el lado izquierdo y derecho de la cápsula. También recomendamos la colocación de la cápsula tan lejos hacia adelante en la parte posterior como sea posible para evitar su eliminación por el ratón utilizando sus patas traseras. En nuestros exper.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Reconocemos la asistencia técnica de Alain Bernier Instituto Nacional francés de Investigación Agrícola (INRAE), y Océane Le Bidel (ANSES). El estudio fue apoyado por el DIM One Health - Région éle-de-France (Acrónimo del proyecto: NeuroPaTick). Los ratones fueron comprados por ANSES. El Dr. Jeffrey L. Blair es reconocido por revisar la versión anterior del manuscrito.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Espuma EVA de 2 mm de grosor, (baja densidad) | Tienda de cosplay | EVA-45kg (950/450/2 mm) | También se puede pedir a través de Amazon (n.º de referencia B07BLMJDXD) |
| Tubo termorretráctil Manguito de envoltura de alambre eléctrico 31 mm/1,22 pulgadas | Amazon | B0848S3S6T | Diferentes diámetros de tubo termorretráctil están disponibles a través de Amazon. |
| Ratones BALB/cByJ | Charles River | Código de cepa 627 | |
| Ratones C57BL/6 | Charles River | Código de cepa 664 | |
| No tóxico Látex Pegamento | Desgarro | Tejido & Adhesivo para cuero | También disponible a través de Amazon (ref. no. B001RQCTUU) |
| Herramienta de perforación Herramienta de arte a mano | Amazon | B07QPWNGBF | Salado por amazon como Herramientas de trabajo de cuero Cortador artesanal de cuero redondo de acero de 1-25 mm que trabaja para correa de cinturón |
| Cubiertas de encuadernación de PVC transparentes | Amazon | B078BNLSNP | Cualquier lámina de PVC transparente de entre 0,150 mm y 0,180 mm es adecuada |
| Almohadilla autoadhesiva Esponja Cinta de espuma de doble capa | Amazon | B07RHDZ35J | Salado por amazon como 2 rollos de cinta de espuma de doble cara, cinta de montaje blanca súper fuerte Espuma |
| Pegatinas de sello transparente (círculos de 20 mm de diámetro) | Amazon | B01DAA6X66 |
Referencias
- Sonenshine, D. E., Roe, M. Biology of Ticks. , Oxford University Press. (2014).
- Kröber, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends in Parasitology. 23 (9), 445-449 (2007).
- Bonnet, S., et al.
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Reimpresiones y permisos
