La lesión cerebral traumática (LCT) se asocia comúnmente con el deterioro de la memoria. Aquí, presentamos un protocolo para evaluar la memoria de trabajo espacial después de una LCT a través de una tarea métrica. Una prueba métrica es una herramienta útil para estudiar el deterioro de la memoria de trabajo espacial después de una LCT.
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Artículo de método
Una prueba métrica para evaluar la memoria de trabajo espacial en ratas adultas después de una lesión cerebral traumática
* These authors contributed equally
En este artículo
Resumen
Resumen
Las deficiencias de la memoria sensorial, a corto y largo plazo son efectos secundarios comunes después de una lesión cerebral traumática (LCT). Debido a las limitaciones éticas de los estudios en humanos, los modelos animales proporcionan alternativas adecuadas para probar los métodos de tratamiento y para estudiar los mecanismos y las complicaciones relacionadas de la afección. Los modelos experimentales de roedores han sido históricamente los más utilizados debido a su accesibilidad, bajo costo, reproducibilidad y enfoques validados. Una prueba métrica, que prueba la capacidad de recordar la colocación de dos objetos a varias distancias y ángulos entre sí, es una técnica para estudiar el deterioro en la memoria de trabajo espacial (SWM) después de una LCT. Las ventajas significativas de las tareas métricas incluyen la posibilidad de observación dinámica, bajo costo, reproducibilidad, relativa facilidad de implementación y ambiente de bajo estrés. Aquí, presentamos un protocolo de prueba métrica para medir el deterioro de SWM en ratas adultas después de TBI. Esta prueba proporciona una forma factible de evaluar la fisiología y la fisiopatología de la función cerebral de manera más efectiva.
Introducción
La prevalencia de déficits neurológicos como la atención, la función ejecutiva y ciertos déficits de memoria después de una lesión cerebral traumática moderada (LCT) es de más del 50 por ciento1,2,3,4,5,6,7,8. La LCT puede conducir a deficiencias graves en la memoria espacial a corto plazo, a largo plazo y de trabajo9. Estas alteraciones de la memoria se han observado en modelos d....
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Protocolo
Los experimentos se realizaron siguiendo las recomendaciones de las Declaraciones de Helsinki y Tokio y las Directrices para el uso de animales de experimentación de la Comunidad Europea. Los experimentos fueron aprobados por el Comité de Cuidado Animal de la Universidad Ben-Gurion del Negev. Una línea de tiempo de protocolo se ilustra en la Figura 1.
1. Procedimientos quirúrgicos y TBI de percusión fluida
- Seleccione ratas Sprague-Dawley adultas macho y hembra, alojadas a una temperatura ambiente de 22 ± 1 ° C, y una humedad del 40% -60%, con ciclos de luz-oscuridad de 12-12 h.
- Proporcionar ....
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Resultados
La importancia de las comparaciones entre los grupos se determinó mediante la prueba de Mann-Whitney. La significación estadística de los resultados se consideró en P < 0,05, mientras que la relevancia estadísticamente alta se midió en P < 0,01.
Los resultados no mostraron diferencias en el SEN entre todos los grupos antes de la intervención y 28 días después de la LCT. Cada grupo consistía en 12 hembras o 12 ratas macho. Las puntuaciones NSS obtenidas 48 h después de TBI se presentan en.......
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Discusión
Al dirigirse específicamente al proceso de información espacial métrica, esta prueba métrica proporciona una herramienta necesaria para comprender la deficiencia de memoria después de una LCT. El protocolo presentado en este trabajo es una modificación de las tareas conductuales descritas anteriormente11. Una tarea métrica descrita anteriormente utilizó dos paradigmas diferentes, cada uno de los que consta de tres sesiones de habituación y una sesión de prueba. El primer paradigma consistía en ace.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Agradecemos a la profesora Olena Severynovska; Maryna Kuscheriava M.Sc; Maksym Kryvonosov M.Sc; Daryna Yakumenko M.Sc; Evgenia Goncharyk M.Sc; y Olha Shapoval, candidata a doctorado en el Departamento de Fisiología, Facultad de Biología, Ecología y Medicina, Universidad Oles Honchar Dnipro, Dnipro, Ucrania por sus contribuciones útiles y de apoyo. Los datos se obtuvieron como parte de la tesis doctoral de Dmitry Frank.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Clorhexidina al 2% en solución de alcohol al 70% | SIGMA - ALDRICH | 500 cc | Para la antisepsia general de la piel en el campo |
| operatorio Bupivacaína 0,1 % | |||
| 4 tableros de diferentes espesores (1,5 cm, 2,5 cm, 5 cm y 8,5 cm) | Esto es para evaluar el defecto | ||
| 4-0 Sutura de nylon | 4-00 | ||
| Botellas | Techniplast | ACBT0262SU | botellas de 150 ml llenas con 100 ml de agua y 100 ml de solución de sacarosa al 1% (p/v) |
| Botellas (cuatro) para tareas | Para los objetos se utilizaron dos botellas pequeñas, la primera redonda (altura 13,5 cm) y la segunda facetada (altura 20 cm) y dos botellas grandes facetadas, la primera de 9x6 cm (altura 21 cm) y la segunda de 7x7 cm (altura 21 cm). | ||
| Taladro de sierra de diamante | Kit de sierra de vidrio | ||
| Báscula de pesaje digital | SIGMA - ALDRICH | Rs 4,000 | |
| Tijeras de disección | SIGMA - ALDRICH | Z265969 | |
| Etanol 99.9 % | Farmacia Solución | 5%-10% utilizada para limpiar el equipo y eliminar olores | |
| EthoVision XT (Software de vídeo) | Noldus, Wageningen, Países Bajos | ||
| Opcional Dispositivo de percusión de fluidos | hecho a medida en el taller | No se recomienda ninguna marca específica. | |
| Esponjas de gasa | Fisher | 22-362-178 | |
| Guantes (guantes finos de laboratorio) | Opcional. | ||
| Calentador con termómetro | Heatingpad-1 | Modelo: HEATINGPAD-1/2 | No se recomienda ninguna marca específica. |
| Horizon-XL | Mennen Medical Ltd | ||
| Isofluran, USP 100% | Piramamal Critical Care, Inc | NDC 66794-017 | Líquido anestésico para inhalación |
| Office 365 ProPlus | Microsoft-Microsoft | Office Excel | |
| Microscopio Olympus BX 40 | Pinza Olympus | ||
| Operating | SIGMA - ALDRICH | ||
| En funcionamiento Tijeras | SIGMA - Ordenador ALDRICH | ||
| PC para grabación de USV y análisis de datos | Intel | Intel® core i5-6500 CPU @ 3.2GHz, 16 GB RAM, sistema operativo de 64 bits | |
| Cajas de plexiglás unidas por un paso | Dos cajas de plexiglás transparentes de 30 cm &veces; 20 cm &veces; 20 cm unidas por un estrecho 15 cm &veces; 15 cm &veces; 60 cm | ||
| paso Purina Chow | Purina | 5001 | La comida de laboratorio para roedores dada a ratas, ratones y hámsteres es una nutrición del ciclo de vida que se ha utilizado en la investigación biomédica para más de 5 |
| jaulas de ratas (jaula casera para ratas u otro recinto) | Techniplast | 2000P | No se recomienda ninguna marca específica |
| Hojas de bisturí 11 | SIGMA - ALDRICH | S2771 | |
| SPSS | SPSS Inc., Chicago, IL, USA | Paquete | |
| Instrumento estereotáxico | hecho a medida en el taller | No se recomienda una marca específica | |
| Dispositivo de cronometraje | Temporizador de intervalos:Temporización para la grabación de | Opcional. Cualquier temporizador servirá, aunque es conveniente usar un temporizador de intervalos si está haciendo cosquillas a varias ratas Dispositivo | |
| tareas topológicas y métricas Hecho | por él mismo en la Universidad Ben Gurion del Negev | Plataforma circular blanca de 200 cm de diámetro y 1 cm de grosor sobre mesa Cámara de | |
| video | Logitech | C920 HD PRO WEBCAM | Cámara de video digital para grabación de alta definición del comportamiento de las ratas bajo la prueba de laberinto plus |
| Windows 10 | Microsoft |
Referencias
- Binder, L. M. Persisting symptoms after mild head injury: A review of the postconcussive syndrome. Journal of Clinical and Experimental Neuropsychology. 8 (4), 323-346 (1986).
- Binder, L. M. ....
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Reimpresiones y permisos
