Aislamiento y cultivo de células epiteliales gingivales humanas primarias utilizando Y-27632

Zhiwei Xie; Jizhou Shi; Min Zong; Qiuping Xu; Chang Liu; Jie Wen; Qun Zhang; Panpan Liu; Guanyi Liu; Jing Guo; Xunwei Wu

doi:10.3791/62978

Artículo de método

Aislamiento y cultivo de células epiteliales gingivales humanas primarias utilizando Y-27632

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DOI:

10.3791/62978

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6 de noviembre de 2021

Zhiwei Xie¹^,²^,³ , Jizhou Shi⁴ , Min Zong³ , Qiuping Xu¹ , Chang Liu¹ , Jie Wen¹ , Qun Zhang¹ , Panpan Liu¹ , Guanyi Liu¹ , Jing Guo²^,⁵ , Xunwei Wu¹

¹Department of Tissue Engineering and Regeneration, School and Hospital of Stomatology, Cheeloo College of Medicine, Shandong University & Shandong Key Laboratory of Oral Tissue Regeneration & Shandong Engineering Laboratory for Dental Materials and Oral Tissue Regeneration, ²Department of Orthodontics, School and Hospital of Stomatology, Cheeloo College of Medicine, Shandong University & Shandong Key Laboratory of Oral Tissue Regeneration & Shandong Engineering Laboratory for Dental Materials and Oral Tissue Regeneration, ³Department of Stomatology, Shengli Oilfield Central Hospital, ⁴Department of Pediatric Surgery, Shengli Oilfield Central Hospital, ⁵Ningbo Stomatology Hospital of Savaid Stomatology School, Hangzhou Medical College

En este artículo

Resumen

Aquí presentamos un método modificado para el aislamiento y cultivo de células epiteliales gingivales humanas mediante la adición del inhibidor de Rock, Y-27632, al método tradicional. Este método es más fácil, consume menos tiempo, mejora las propiedades de las células madre y produce un mayor número de células epiteliales de alto potencial tanto para el laboratorio como para aplicaciones clínicas.

Resumen

El tejido gingival es la primera estructura que protege los tejidos periodontales y desempeña un papel significativo en muchas funciones orales. El epitelio gingival es una estructura importante del tejido gingival, especialmente en la reparación y regeneración del tejido periodontal. El estudio de las funciones de las células epiteliales gingivales tiene un valor científico crucial, como la reparación de defectos orales y la detección de la compatibilidad de los biomateriales. Como las células epiteliales gingivales humanas son células queratinizadas altamente diferenciadas, su vida útil es corta y son difíciles de pasar. Hasta ahora, solo hay dos formas de aislar y cultivar células epiteliales gingivales, un método de explante directo y un método enzimático. Sin embargo, el tiempo requerido para obtener células epiteliales utilizando el método de explante directo es más largo, y la tasa de supervivencia celular del método enzimático es menor. Clínicamente, la adquisición de tejido gingival es limitada, por lo que se necesita un sistema de aislamiento y cultivo in vitro estable, eficiente y simple. Mejoramos el método enzimático tradicional agregando Y-27632, un inhibidor de la quinasa asociada a Rho (ROCK), que puede promover selectivamente el crecimiento de las células epiteliales. Nuestro método enzimático modificado simplifica los pasos del método enzimático tradicional y aumenta la eficiencia del cultivo de células epiteliales, lo que tiene ventajas significativas sobre el método de explante directo y el método enzimático.

Introducción

La encía humana, la estructura de defensa de primera línea que protege el tejido periodontal, no solo es una barrera física y química^1,sino que también segrega diferentes clases de mediadores inflamatorios que participan en las respuestas inmunes y constituyen una barrera inmune^2,^3. El epitelio gingival juega un papel importante en la reparación y regeneración del tejido periodontal. Por lo tanto, estudiar la defensa y la inmunidad del epitelio gingival es de gran importancia para comprender la aparición, el diagnóstico y el tratamiento de la periodontitis. El aislamiento y cultivo de c....