Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.

Artículo de método

Recuperación mejorada de petróleo utilizando una combinación de biosurfactantes

5.6K visualizaciones

⸱

DOI:

10.3791/63207

⸱

3 de junio de 2022

 ,  ,  , 

En este artículo

Resumen

Ilustramos los métodos involucrados en el cribado y la identificación de los microbios productores de biosurfactantes. También se presentan métodos para la caracterización cromatográfica y la identificación química de los biosurfactantes, determinando la aplicabilidad industrial del biosurfactante en la mejora de la recuperación de aceite residual.

Resumen

Los biosurfactantes son compuestos tensoactivos capaces de reducir la tensión superficial entre dos fases de diferentes polaridades. Los biosurfactantes han surgido como alternativas prometedoras a los tensioactivos químicos debido a la menor toxicidad, la alta biodegradabilidad, la compatibilidad ambiental y la tolerancia a condiciones ambientales extremas. Aquí, ilustramos los métodos utilizados para la detección de microbios capaces de producir biosurfactantes. Los microbios productores de biosurfactantes se identificaron mediante el colapso de gotas, la propagación del aceite y los ensayos de índice de emulsión. La producción de biosurfactantes se validó determinando la reducción de la tensión superficial del medio debido al crecimiento de los miembros microbianos. También describimos los métodos involucrados en la caracterización e identificación de biosurfactantes. Se realizó cromatografía en capa delgada del biosurfactante extraído seguido de tinción diferencial de las placas para determinar la naturaleza del biosurfactante. LCMS, 1H NMR y FT-IR se utilizaron para identificar químicamente el biosurfactante. Ilustramos además los métodos para evaluar la aplicación de la combinación de biosurfactantes producidos para mejorar la recuperación de aceite residual en una columna de paquete de arena simulada.

Introducción

Los biosurfactantes son las moléculas anfipáticas tensoactivas producidas por microorganismos que tienen la capacidad de reducir la superficie y la tensión interfacial entre dos fases1. Un biosurfactante típico contiene una parte hidrofílica que generalmente se compone de una fracción de azúcar o una cadena peptídica o aminoácido hidrófilo y una parte hidrofóbica que se compone de una cadena de ácidos grasos saturados o insaturados2. Debido a su naturaleza anfipática, los biosurfactantes se ensamblan en la interfaz entre las dos fases y reducen la tensión interfacial en el límite, lo que facilita la dispersión de una fas....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Protocolo

1. Crecimiento de cepas microbianas

  1. Pesar 2 g de caldo de Luria en polvo y añadir a 50 ml de agua destilada en un matraz cónico de 250 ml. Mezclar el contenido hasta que el polvo se disuelva completamente y hacer el volumen a 100 ml con agua destilada.
  2. Del mismo modo, prepare dos matraces más de 100 ml de caldo de Luria y coloque tapones de algodón en el cuello de los matraces.
  3. Cubra los tapones de algodón con papel de aluminio y autoclave los matraces durante 15 min a 121 °C y 15 psi para esterilizar el medio.
  4. Después del autoclave, deje que el medio se enfríe a temperatura ambiente.
  5. Para la preparaci....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Resultados

Tres cepas bacterianas (Rhodococcus sp. IITD102, Lysinibacillus sp. IITD104 y Paenibacillus sp. IITD108) fueron examinadas para la producción de biosurfactantes mediante varios ensayos, que incluyeron ensayo de colapso de gotas, ensayo de desplazamiento de aceite, ensayo de índice de emulsión y reducción de tensión superficial. Los sobrenadantes libres de células de las tres cepas bacterianas y una solución de surfactante químico resultaron en un colapso de gota y, por lo tanto, se calificaron .......

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Discusión

Los biosurfactantes son uno de los grupos más versátiles de componentes biológicamente activos que se están convirtiendo en alternativas atractivas a los tensioactivos químicos. Tienen una amplia gama de aplicaciones en numerosas industrias, como detergentes, pinturas, cosméticos, alimentos, productos farmacéuticos, agricultura, petróleo y tratamiento de agua debido a su mejor humectabilidad, menor CMC, estructura diversificada y respeto al medio ambiente18. Esto ha llevado a un mayor interés en d.......

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Divulgaciones

Los autores declaran que no hay conflictos de intereses.

Agradecimientos

Los autores desean dar las gracias al Departamento de Biotecnología del Gobierno de la India por su apoyo financiero.

....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Pipeta de 1 mlEppendorf, AlemaniaG54412G
1H RMNEspectrómetro de tipo Bruker Avance AV-III, EE. UU
Pipeta de 20 ulThermo scientific, EE. UUH69820
AutoclaveJAISBO, IndiaSer no 5923Jain Scientific
Quemador de llama azulRocker scientific, Taiwándragón 200
Innovaciones de ButanolGLR, IndiaGLR09.022930
Columna C18Agilent Technologies, EE. UU.770995-902
CentrífugaEppendorf, Alemania5810R
CloroformoMerck, India1.94506.2521
Cloroformo-dSRL, India57034
Tubos de halcónTarsons, India546041Polipropileno esterilizado
por radiación FT-IRThermo Fisher Scientific, EE. UU.  Nicolet iS50
Campana extractoraKhera, India47408
Ácido acético glacialMerck, India1.93002
Perlas de vidrioMerck, India104014
Toboganes de vidrioPolar industrial Corporation, EE. UUBlue Star75 mm * 25 mm
Lana de vidrioMerk, India104086
Ácido clorhídricoMerck, India1003170510
IncubadoraThermo Scientific, EE. UU.MaxQ600Incubadora de agitación
IncubadoraKhera, IndiaSunbim
Yodo resublimadoMerck, India231-442-4  Gránulos resublimados
K12 – TensiómetroKruss Kruss Scientific, AlemaniaK100
Cabnet de flujo de aire laminarThermo Scientific, ChinaSerie 1300 A2
LCMSAgilent Technologies, EE. UU.1260 Infinity II
CaldoLuria HIMEDIA, IndiaM575-500GMetanol en polvo
Merck, India107018
NinhydrinTitan Biotech Limited, India1608
p-anisaldehídoSigma, EE. UU.204-602-6
Placa de PetriTarsons, India460090-90 MMPolipropileno esterilizado por radiación
SaponinaMerck, India232-462-6
Cloruro de sodioMerck, India231-598-3
Tubos de ensayoBorosil, India9800U06Tubos de vidrio Placas
TLCMerck, India1055540007
VortexGeNei, India2006114318
Baño de aguaJulabo, IndiaSW21C
. . personalizado .

Referencias

  1. Desai, J. D., Banat, I. M. Microbial production of surfactants and their commercial potential. Microbiology and Molecular Biology Reviews. 61 (1), 47-64 (1997).
  2. Banat, I. M. Biosurfactants pr....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Reimpresiones y permisos

Explorar más artículos

Producción de biosurfactantesreducción de la tensión superficialcribado microbianoensayo de colapso de gotaensayo de propagación de aceiteensayo de índice de emulsióncromatografía de capa finaidentificación de ramnolípidoscolumna de empaque de arena