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Mantenimiento de cultivos de laboratorio de Gryllus bimaculatus, un modelo versátil de ortópteros para la agricultura de insectos y la fisiología de invertebrados

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DOI:

10.3791/63277

8 de junio de 2022

En este artículo

Resumen

Este documento describe métodos básicos para estandarizar factores importantes como la densidad, la disponibilidad de alimento, la fuente de hidratación y los controles ambientales para la cría a largo plazo de cultivos de laboratorio del grillo comestible, Gryllus bimaculatus.

Resumen

Gryllus bimaculatus (De Geer) es un grillo de cuerpo grande distribuido por África y el sur de Eurasia, donde a menudo se cosecha en la naturaleza como alimento humano. Fuera de su área de distribución nativa, el cultivo de G. bimaculatus es factible debido a su plasticidad dietética, ciclo reproductivo rápido, falta de requisitos de diapausa, tolerancia a la cría de alta densidad y robustez contra patógenos. Por lo tanto, G. bimaculatus puede ser un modelo versátil para estudios de fisiología, comportamiento, embriología o genética de insectos.

Los parámetros culturales, como la densidad de población, los refugios dentro de la jaula, el fotoperíodo, la temperatura, la humedad relativa y la dieta, afectan el crecimiento, el comportamiento y la expresión génica del grillo y deben estandarizarse. En la creciente literatura sobre insectos agrícolas para el consumo humano, estos grillos se emplean con frecuencia para evaluar mezclas de alimentos candidatas derivadas de residuos de cultivos, subproductos de procesamiento de alimentos y otros flujos de desechos de bajo costo.

Para apoyar los experimentos en curso que evalúan el rendimiento del crecimiento de G. bimaculatus y la calidad nutricional en respuesta a sustratos variables de alimentación, se desarrolló un conjunto completo de protocolos estándar para la cría, el mantenimiento, el manejo, la medición y la eutanasia en el laboratorio, que se presenta aquí. Un alimento para grillos estándar de la industria ha demostrado ser nutricionalmente adecuado y funcionalmente apropiado para el mantenimiento a largo plazo de las poblaciones reproductoras de grillos, así como para su uso como alimento de control experimental. La cría de estos grillos a una densidad de 0.005 grillos / cm3 en jaulas de polietileno de 29.3 L con pantalla a una temperatura promedio de 27 ° C en un fotoperíodo de 12 claros (L) / 12 oscuros (D), con fibra de coco humedecida que sirve como fuente de hidratación y medio de oviposición ha sostenido con éxito grillos sanos durante un período de 2 años. Siguiendo estos métodos, los grillos en un experimento controlado produjeron una masa promedio de 0.724 g 0.190 g en la cosecha, con un 89% de supervivencia y un 68.2% de maduración sexual entre la siembra (22 días) y la cosecha (65 días).

Introducción

Como lo tipifica el insecto icónico, la mosca de la fruta Drosophila melanogaster, el uso de insectos como organismos modelo de laboratorio proporciona claras ventajas para los estudios en genética, toxicología y fisiología1. El pequeño tamaño de los insectos reduce el espacio necesario para los cultivos y la cantidad de alimento y materiales consumibles necesarios. Muchos insectos se reproducen rápidamente, lo que los hace especialmente adecuados para la creación de líneas genéticas especializadas y estudios que requieren la evaluación de múltiples generaciones sucesivas.

Muchos estudios se centran en insec....

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Protocolo

1. Preparación del sustrato de oviposición

NOTA: La fibra de coco es un sustrato de oviposición ideal para G. bimaculatus. Para obtener métodos detallados sobre cómo separar la fibra de coco del ladrillo de fibra de coco comprimido y una nota sobre la seguridad respiratoria, consulte materiales suplementarios paso 1.1.

  1. Lávese las manos con agua y jabón.
  2. Tara un recipiente limpio en una balanza y pesar una masa de fibra de coco seca aproximadamente del tamaño de un puño humano.
  3. Coloque la fibra de coco en un recipiente limpio y sellable, que pueda acomodar la expansión ....

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Resultados

Los datos que demuestran la cría exitosa de grillos desde la eclosión hasta los 65 días de edad se recopilaron durante un ensayo de alimentación en septiembre de 2021. Los grillos se cultivaron a partir de huevos siguiendo los pasos 1.1.1-2.6.1 de estos protocolos, y seis jaulas replicadas se abastecieron con 24 grillos aleatorios de 22 días de edad (tercer instar) siguiendo el paso 2.7 anterior. Los grillos se criaban en condiciones ambientales de la habitación; sin embargo, debido a un mal funcionamiento de la unidad d.......

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Discusión

La simplicidad de este enfoque para la cría de cricket puede beneficiar a una variedad de áreas de investigación y representa una plantilla genérica para la cría exitosa de cricket, fácilmente adaptable a una variedad de necesidades experimentales. En comparación con varios otros estudios de G. bimaculatus, el tamaño adulto del cuerpo individual es más pequeño y la maduración es más lenta14, lo que atribuimos a la temperatura de cría subóptima que nos imponen las circunstancias. Los métod.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen conflictos de intereses que declarar.

Agradecimientos

El financiamiento para este proyecto fue posible gracias a subvenciones internas de la Universidad de Wisconsin-Madison. Las más sinceras gracias a Kevin Bachhuber de Bachhuber Consulting Inc. por acceder a su guía inédita para la cría comercial de cricket y a Michael Bartlett Smith por su ayuda en la refinación y solución de problemas de estos métodos.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Contenedor de 31 cuartos de galón (29,3 L) con tapa a presión y tapaHOMZ3430CLBLSe utiliza para alojar ganado de cría
Soporte de luz de cultivo de 3 niveles/12 bandejasFischer ScientificNC1938548
Contenedor de 50 galones (189,27 L) con tapaSterilite#14796603Se utiliza como contención secundaria cuando se manipulan grillos
Cilindro graduado de polipropileno de 50 mlFischer ScientificS95171
Contenedor de 7,5 cuartos de galón (7,1 L) con tapaHOMZ3410CLBLSe utiliza para almacenar existencias Exprimental
Accuris 500 g x 0,01 g BalanzaFabricado por Accuris, una subsidiaria de Benchmark ScientificW3300-500Comprado a Dot Scientific a través del servicio de compras del sistema de la Universidad de Wisconsin "ShopUW+"
Ace Premier 1 Inch Flat Chip BrushAce Hardware #1803261
Botella de lavado de agua desionizada Bel-Art SP SciencewareFischer Scientific03-421-160 
Pantalla de ventana de aluminio brillante PhiferUNSPSC# 11162108Tamaño de malla 18 x 16"
Tazas de plástico transparente desechables para porciones de 5.5 oz con tapasWal-MartN/A
Agua
Diablo 4-4/8" x 13 TPI Hoja de Rompecabezas Bimetálica con Acabado Ultra FinoHome Depot#313114935
Relleno de Huevos-Papel, 12 x 12"Uline S-5189
Placas de Petri Fisherbrand con Tapa Transparente 100 x 15mmFischer ScientificFB0875714
Placas de Petri Fisherbrand con Tapa Transparente 60 x 15mmFischer Scientific FB0875713A
Georgia-Pacific Envision Toallas de papel marrón HomeDepot#205675843
Barras de pegamento termofusible de alto rendimiento InfinityTough Guy Infinity BondInfinity IM-Tough-Guy-12
Mazuri Cricket DietLand O' Lakes InternationalSKU#  3002219-105
Stanley TimeIt Twin 2-outlet Grounded Grounded Mechanical 24 Hour TimerWal-MartN/A
Vermont Organics Reclamation Soil 11 lb Coir BlockHome Depot#300679904
desionizada

Referencias

  1. Hales, K. G., Korey, C. A., Larracuente, A. M., Roberts, D. M. Genetics on the fly: a primer on the Drosophila model system. Genetics. 201 (3), 815-842 (2015).
  2. Merkel, G. The effects of temperature and food quality on the larval development....

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Etiquetas

Cr a de grillosCultivo de laboratorioOrganismo modeloSustrato de oviposici nAlimento para grillosProtocolos de cr aDensidad de poblaci n

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