Artículo de método

Genotipificación rápida de tejido de ratón utilizando extracto-N-Amp tejido Sigma PCR Kit

DOI:

10.3791/636

22 de enero de 2008

En este artículo

Resumen

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

La determinación del genotipo completo de una muestra de cola de ratón, incluyendo la digestión del tejido y la lectura de PCR, se realiza en una hora y media utilizando SYBR Sigma verde Extract-N-Amp PCR kit de tejido.

Resumen

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Detección genómica del ADN a través de la amplificación por PCR y la detección en un gel de electroforesis es una forma estándar que el genotipo de una muestra de tejido se determina. Preparación convencional de los tejidos para PCR-ADN a menudo listo tomar varias horas o días, dependiendo de la muestra de tejido. El genotipo de la muestra de lo que se puede retrasar por varios días, lo cual no es una opción para muchos tipos diferentes de experimentos. Aquí se demuestra la determinación del genotipo completo de una muestra de cola de ratón, incluyendo la digestión del tejido y la lectura de PCR, en una hora y media utilizando SYBR Sigma verde Extract-N-Amp PCR Kit de tejido. En primer lugar, demostrar la extracción de quince minutos de ADN de la muestra de tejido. Luego, se demuestra el tiempo real de lectura de la amplificación por PCR de la muestra, que permite la identificación de una muestra positiva, ya que está siendo amplificada. En conjunto, la lectura rápida de extracción y en tiempo real permiten una rápida identificación del genotipo de una variedad de diferentes tipos de tejidos a través del método confiable de PCR.

Protocolo

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Por favor, haga clic aquí para ver el protocolo.

Divulgaciones

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Los autores no tienen nada que revelar.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
SYBR Green Extract-N-Amp Tissue PCR KitKit de reactivoSigma-AldrichXNATGIncluye: solución de extracción, solución de neutralización B, solución de preparación de tejido, Extract-N-Amp SYBR Green PCR ReadyMix

Reimpresiones y permisos

Solicitar permiso para reutilizar el texto o las figuras de este artículo de JoVE

Solicitar permiso

Etiquetas

Genotipado de tejido de rat nkit Extract N Ampextracci n de ADNPCR en tiempo realan lisis de qPCRdigesti n de tejidoskit de Sigmaamplificaci n por PCRan lisis de la curva de fusi nprotocolo de genotipado

Artículos relacionados