El presente protocolo describe la caracterización ecocardiográfica de la morfología y función del ventrículo derecho en un modelo de rata de hipertensión arterial pulmonar.
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Artículo de método
Evaluación ecocardiográfica integral de la función del ventrículo derecho en un modelo de rata de hipertensión arterial pulmonar
* These authors contributed equally
En este artículo
Resumen
Resumen
La hipertensión arterial pulmonar (HAP) es una enfermedad progresiva causada por vasoconstricción y remodelación de las arterias pequeñas de los pulmones. Esta remodelación conduce a un aumento de la resistencia vascular pulmonar, empeoramiento de la función ventricular derecha y muerte prematura. Las terapias actualmente aprobadas para la HAP se dirigen principalmente a las vías vasodilatadoras pulmonares; sin embargo, las modalidades terapéuticas emergentes recientes se centran en otras vías novedosas involucradas en la patogénesis de la enfermedad, incluida la remodelación del ventrículo derecho (VD). Las técnicas de imagen que permiten la evaluación longitudinal de nuevas terapias son muy útiles para determinar la eficacia de nuevos fármacos en estudios preclínicos. La ecocardiografía transtorácica no invasiva sigue siendo el enfoque estándar para evaluar la función cardíaca y se usa ampliamente en modelos de roedores. Sin embargo, la evaluación ecocardiográfica del VD puede ser difícil debido a su posición y estructura anatómicas. Además, faltan guías estandarizadas para la ecocardiografía en modelos preclínicos de roedores, lo que dificulta la realización de una evaluación uniforme de la función del VD en estudios en diferentes laboratorios. En estudios preclínicos, el modelo de lesión por monocrotalina (MCT) en ratas se utiliza ampliamente para evaluar la eficacia del fármaco para tratar la HAP. Este protocolo describe la evaluación ecocardiográfica del VD en ratas con HAP ingenuas e inducidas por MCT.
Introducción
La HAP es una enfermedad progresiva definida como una presión arterial pulmonar media en reposo superior a 20 mmHg1. Los cambios patológicos en la HAP incluyen remodelación de la arteria pulmonar (AF), vasoconstricción, inflamación y activación y proliferación de fibroblastos. Estos cambios patológicos conducen a aumento de la resistencia vascular pulmonar y, consecuentemente, remodelación ventricular derecha, hipertrofia e insuficiencia2. La HAP es una enfermedad compleja que implica la diafonía entre varias vías de señalización. Los medicamentos actualmente aprobados para tratar la HAP se dirigen principalmente a las v....
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Protocolo
Todos los experimentos en este protocolo se realizaron siguiendo las pautas de cuidado animal de la Universidad de Illinois en Chicago, Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de Chicago. Las ratas macho Sprague Dawley (SD) pesaban entre 0,200 y 0,240 kg en el momento de la inyección de MCT; Sin embargo, el protocolo descrito en este artículo se puede utilizar con un rango de peso corporal más amplio. Los animales fueron obtenidos de una fuente comercial (ver Tabla de Materiales).
1. Diseño del estudio
- Animales
- Obtenga ratas SD macho y déjelas aclimatarse durante 4-7 días. Aloje a....
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Resultados
En este estudio, se utilizaron ratas tratadas con MCT como modelo de HAP. El análisis ecocardiográfico se realizó el día de estudio 23 después de la administración de MCT, y todas las mediciones y cálculos representaron promedios de tres ciclos consecutivos. Los parámetros ecocardiográficos obtenidos de ratas control (vehículo: agua desionizada) y tratadas con MCT (60 mg/kg) se muestran en la Tabla 1.
En la Figura 1A se muestran imágenes represent.......
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Discusión
La evaluación ecocardiográfica del VD es una valiosa herramienta de descubrimiento para el cribado de la eficacia de nuevos tratamientos en modelos animales de HAP. La caracterización en profundidad de la estructura y función del VD es necesaria como dianas novedosas en el tratamiento de la remodelación del RV de abordajede HAP 4,14. Este estudio describe un protocolo detallado que permite la caracterización exitosa de la estructura y función del VD.
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por NHLBI K01 HL155241 y AHA CDA849387 otorgado al autor P.C.R.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Inyección de cloruro de sodio al 0,9% USP | Baxter | 2B1324 | |
| Rollos de algodón trenzado | 4MD Medical Solutions | RIHD201205 | |
| Agente depilatorio | Wallgreens | Nair Hair Remover | |
| Gel de electrodos | Parker Laboratories | 15-60 | |
| Sistema de imagen de ultrasonido de alta frecuencia y estación de imágenes | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | Vevo 2100 | |
| Isoflurano | MedVet | RXISO-250 | |
| Ratas Dawley macho sprague | River Laboratories | CD 001 | CD IGS Ratas (Crl:CD(SD)) |
| Monocrogalina (MCT) | Sigma-Aldrich | C2401 | |
| Sonda de temperatura rectal | Physitemp | RET-3 | |
| Cámaras de inducción selladas | Scivena Scientific | RES644 | Tamaño 3 L |
| Transductor de ultrasonido de matriz de estado sólido | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | Transductor Vevo MicroScan MS250S Pinzas digitales de | |
| acero inoxidable | Calibradores digitales VWR | 62379-531 | |
| Gel de ultrasonidos | Laboratorios Parker | 11-08 | |
| Software Vevo Lab | FUJIFILM VisualSonics, Inc. | Versión 5.5.1 |
Referencias
- Galie, N., McLaughlin, V. V., Rubin, L. J., Simonneau, G. An overview of the 6th World Symposium on Pulmonary Hypertension. European Respiratory Journal. 53 (1), 1802148(2019).
- Tyagi, S., Batra, V. Novel therapeutic approaches of pulmonary arterial hyp....
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Reimpresiones y permisos
