Aquí, presentamos un protocolo para detectar bacterias productoras de sulfuro de hidrógeno con un protocolo modificado utilizado para la precipitación de sulfuro de bismuto (BS). Las ventajas clave de este método son que es fácil de evaluar y no requiere equipo especializado.
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Artículo de método
Un método visual sensible para la detección de bacterias productoras de sulfuro de hidrógeno
En este artículo
Resumen
Resumen
El sulfuro de hidrógeno (H2S) es un gas tóxico producido por bacterias en la proteólisis de aminoácidos y proteínas que contienen azufre que desempeña un papel importante en la salud humana. La prueba de producción deH2Ses una de las pruebas de identificación bioquímica bacteriana importantes. Los métodos tradicionales no solo son tediosos y lentos, sino que también son propensos a la inhibición del crecimiento bacteriano debido al efecto tóxico de las sales de metales pesados en el medio que contiene azufre, lo que a menudo conduce a resultados negativos. Aquí, establecimos un método simple y sensible para detectarH2Sen bacterias. Este método es una versión modificada de la precipitación de sulfuro de bismuto (BS) que utiliza placas de microtitulación transparentes de 96 pocillos. El cultivo bacteriano se combinó con una solución de bismuto que contenía L-cisteína y se cultivó durante 20 min, al final de los cuales se observó un precipitado negro. El límite de detección visual paraH2Sfue de 0,2 mM. Sobre la base del cambio de color visual, se puede lograr la detección simple, de alto rendimiento y rápida de las bacterias productoras deH2S. En resumen, este método se puede utilizar para identificar la producción deH2Sen bacterias.
Introducción
Las bacterias productoras de sulfuro de hidrógeno pueden utilizar aminoácidos y proteínas que contienen azufre para producir sulfuro de hidrógeno (H2S). La producción deH2Socurre generalmente en bacterias gramnegativas de la familia Enterobacteriaceae y también en miembros de Citrobacter spp., Proteus spp., Edwardsiella spp. y Shewanella spp.1. Estas bacterias tienen la capacidad de reducir el sulfato en sulfuro de hidrógeno (H2S) para obtener energía. El sulfuro de hidrógeno ha sido implicado en el desarrollo de resistencia bacteriana a los medicamentos. H2Sprotege....
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Protocolo
1. Cepas bacterianas
NOTA: Para este experimento, se utilizaron nueve cepas estándar, incluyendo Salmonella paratyphi A, Salmonella paratyphi B, Fusobacterium nucleatum, Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa PAO1, Aeromonas hydrophila YJ-1, Proteus vuigis y Klebsiella pneumoniae (Tabla 1). Salmonella paratyphi A, Fusobacterium nucleatum, Pseudomonas aeruginosa y Proteus vuigaris pueden producirH2S, como se describe en la liter....
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Resultados
Detección de bacterias productoras de sulfuro de hidrógeno
La realización de la pruebaH2Sse investigó utilizando cultivos puros de cepas bacterianas seleccionadas, como se indica en la Tabla 1. Los resultados indicaron que Salmonella paratyphi B, Fusobacterium nucleatum, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa y Proteus vuigaris pueden producirH2Scon precipitado negro de BS, mientras que Salmonella paratyphi A, Staphy.......
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Discusión
La prueba de producción de sulfuro de hidrógeno es una de las pruebas fenotípicas convencionales para la identificación y diferenciación de cepas bacterianas. Muchas especies bacterianas pueden producir sulfuro de hidrógeno en su entorno natural, como el agua acuática. Estas especies bacterianas incluyen Salmonella sp., Citrobacter sp., Proteus sp., Pseudomonas sp., algunas cepas de Klebsiella sp., Escherichia coli, y algunas especies de Clostridia15.......
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Divulgaciones
Los autores declaran no tener conflictos de intereses.
Agradecimientos
Este estudio fue apoyado por el Desarrollo del Programa Académico Prioritario de las Instituciones de Educación Superior de Jiangsu (PAPD) y el Proyecto de Investigación de Reforma Docente de la Universidad Farmacéutica de China (2019XJYB18).
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Cloruro de bismuto (III) | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd | 7787-60-2 | |
| EDTA | Nanjing Chemical Reagent Co., Ltd | 60-00-4 | |
| Enterococcus faecalis | ATCC | 19433 | |
| Fusobacterium nucleatum | ATCC | 25586 | |
| Klebsiella pneumoniae | ATCC | 43816 | |
| L-cisteína | Amresco | 52-90-4 | |
| Proteus vuigaris | CMCC | 49027 | |
| Salmonella paratyphi A | CMCC | 50001 | |
| Salmonella paratyphi B | CMCC | 50094 | |
| Staphylococcus aureus | ATCC | 25923 | |
| Trietanolamina-HCl | Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd. | 637-39-8 |
Referencias
- Thompson, L. S. The group of hydrogen sulphide producing bacteria. Journal of Medical Research. 42 (184), 383-389 (1921).
- Ono, K., et al. Cysteine hydropersulfide inactivates β-lactam antibiotics with formation o....
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Reimpresiones y permisos
Etiquetas
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