Generación de un modelo de decidualización artificial de ratón con ovariectomía para la investigación de la decidualización endometrial

Resumen

Aquí, describimos el método de generación de un modelo de decidualización artificial utilizando el ratón ovariectomizado, un experimento clásico de decidualización endometrial en el campo de investigación de la decidualización endometrial.

Resumen

La decidualización endometrial es un proceso de diferenciación único del endometrio, estrechamente relacionado con la menstruación y el embarazo. El deterioro de la decidualización conduce a diversos trastornos endometriales, como infertilidad, aborto espontáneo recurrente y parto prematuro. El desarrollo y uso del modelo de decidualización endometrial en estudios reproductivos ha sido un punto culminante para los investigadores reproductivos durante mucho tiempo. El ratón ha sido ampliamente utilizado en el estudio de la reproducción y la decidualización. Hay tres modelos de ratón bien establecidos con respecto a la decidualización, a saber, la decidualización natural del embarazo (NPD), la decidualización artificial (AD) y la decidualización in vitro (IVD). Entre ellos, AD se considera un modelo confiable para la decidualización del mouse, que es fácil de implementar y cercano a NPD. Este trabajo se centra en un método modificado del proceso de generación y aplicación del modelo de decidualización artificial de ratón con ovariectomía para evitar efectos ováricos, que pueden obtener resultados altamente reproducibles con pequeñas varianzas dentro del grupo. Este método proporciona un modelo animal bueno y confiable para el estudio de la decidualización endometrial.

Introducción

Con el desarrollo de la tecnología de reproducción asistida por humanos, la tasa actual de embarazo clínico de fertilización in vitro-transferencia de embriones (FIV-ET) ha alcanzado o incluso superado la del embarazo natural. A pesar de ello, muchas pacientes en la práctica clínica de reproducción asistida todavía se someten a múltiples transferencias embrionarias pero no logran el embarazo deseado. Sin embargo, su mecanismo molecular específico aún no está claro, por lo que la intervención clínica es ineficaz, lo que es uno de los desafíos significativos que enfrenta la medicina reproductiva ^1,2.

Protocolo

Todos los experimentos con animales descritos fueron aprobados por el Comité sobre el Uso y Cuidado de Animales (No. 20171202) del Hospital Amateur Drum Tower del Hospital Afiliado de la Facultad de Medicina de la Universidad de Nanjing. Todas las operaciones siguen las pautas nacionales y de cuidado y uso de animales apropiados.

NOTA: Los ratones se criaron en un ambiente específico libre de patógenos (SPF), con una temperatura de 22 °C ± 1 °C, humedad relativa de 50% ± 1%, un ciclo de luz/oscuridad de 12 h/12 h, y libre acceso a alimentos y agua.

1. Ovariectomía en ratones

1. Esterilice ....

Resultados

Los índices del modelo de decidualización del ratón incluyen la morfología general del útero, la relación de masa del útero decidualizado y no decidualizado, la morfología histológica del endometrio y el nivel de expresión de las moléculas marcadoras de decidualización. La morfología general del útero decidualizado artificial de ratones inducido por aceite es más cercana a la del útero en el embarazo. El cuerpo uterino se vuelve grueso y la cavidad uterina se vuelve más pequeña que el lado no inducido. El volumen y el pe.......

Discusión

La decidualización en ratones es un proceso espontáneo que depende de la presencia de embriones, que es diferente de los humanos. Sin embargo, se ha encontrado que la estimulación artificial, como la inyección uterina de perlas de vidrio y la laceración uterina, puede inducir la decidualización del endometrio en lugar de embriones. Además, los investigadores encontraron que muchos factores podrían inducir deciduales o participar en la decidualización, como la inyección de hormonas esteroides, prostaglandinas y factores i.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Estrógeno	Sigma	E2758	Suplemento hormonal
Progesterona	Sigma	P0130	Suplemento hormonal
Aceite de sésamo	Sigma	S3547	Suplemento hormonal
Pentobarbital sódico	Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd.		Anestesia
Inyección de meloxicam	Qilu Animal Health Products Co., Ltd		Analgesia
Kit de tinción de fosfatasa alcalina (método de acoplamiento de Kaplow/azo)	Solarbio	G1480	Tinción de fosfatasa alcalina
Eosin	Servicebio	G1005-2	Tinción HE
Hematoxilina	Servicebio	G1005-1	Tinción HE
ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix	Vazyme	Q711-02	qPCR
70% etanol	Lircon	ZH1120090	Desinfectar
Yodóforo	Runzekang	RZK-DF	Desinfectar
Eritromicina Pomada Ocular	Guangzhou Baiyunshan		Ratones Eyeball Protect
4-0 Sutura	Ethicon	W329	Sutura de incisión
10% formalina	Yulu	L25010118	Tissue fix
Compuesto para temperatura de corte óptima	Sakura	4583	Ssection
Reactivo Trizol	Ambion	15596018	qPCR