Fe de erratas: un protocolo sencillo de ensayo de fosa para visualizar y cuantificar la reabsorción osteoclástica in vitro

Summary

Se emitió una fe de erratas para: Un protocolo simple de ensayo de fosa para visualizar y cuantificar la reabsorción osteoclástica in vitro. Se actualizó la sección Protocolo.

Abstract

Esto corrige el artículo 10.3791/64016

Protocol

Se emitió una fe de erratas para: Un protocolo simple de ensayo de fosa para visualizar y cuantificar la reabsorción osteoclástica in vitro. Se actualizó la sección de Protocolo.

El paso 1.1 del Protocolo se ha actualizado desde:

Preparación de solución madre de calcio (25 mM CaCl₂·2H₂O, 1,37 mM NaCl, 15 mM MgCl₂·6H₂O en tampón Tris)

Para:

Preparación de solución madre de calcio (25 mM CaCl₂·2H₂O, 1,37 M NaCl, 15 mM MgCl₂·6H₂O en tampón Tris)

El paso 1.1.1 del Protocolo se ha actualizado desde:

Prepare 1.0 M de tampón Tris y ajuste el pH a 7.4 usando 1 M de HCl.

Para:

Prepare 50 mM de tampón Tris y ajuste el pH a 7.4 usando 1 M de HCl.

El paso 1.1.2 del Protocolo se ha actualizado desde:

Coloque un vaso de vidrio en un agitador magnético y agregue 100 mL de tampón Tris de 1.0 M.

Para:

Coloque un vaso de vidrio en un agitador magnético y agregue 100 mL de tampón Tris de 50 mM.

El paso 1.2 del Protocolo se ha actualizado desde:

Preparación de solución madre de fosfato (11,1 mM Na2HPO4·H2O, 42 mM NaHCO3 en tampón Tris)

Para:

Preparación de solución madre de fosfato (11,1 mM Na2HPO4, 42 mM NaHCO3 en tampón Tris)

El paso 1.2.1 del Protocolo se ha actualizado desde:

Coloque un vaso de vidrio en un agitador magnético y agregue 100 mL de tampón Tris de 1.0 M.

Para:

Coloque un vaso de vidrio en un agitador magnético y agregue 100 mL de tampón Tris de 50 mM.

El paso 1.2.2 del Protocolo se ha actualizado desde:

Pesar 0,158 g de Na2HPO4·H2O y 0,353 g de NaHCO3 y disolver en tampón Tris uno por uno.

Para:

Pesar 0,158 g de Na2HPO4 y 0,353 g de NaHCO3 y disolver en tampón Tris uno por uno.

El paso 1.3.1 del Protocolo se ha actualizado desde:

Prepare 30 mL de solución de trabajo mezclando 15 mL de tampón Tris 1.0M, 7.5 mL de solución de caldo de calcio (paso 1.1.4) y 7.5 mL de solución de caldo de fosfato (paso 1.2.3). Filtre la solución con un filtro de 0,2 μm.

Para:

Prepare 30 mL de solución de trabajo mezclando 15 mL de tampón Tris de 50 mM, 7,5 mL de solución de caldo de calcio (paso 1.1.4) y 7,5 mL de solución de caldo de fosfato (paso 1.2.3). Filtre la solución con un filtro de 0,2 μm.

El paso 1.4 del Protocolo se ha actualizado desde:

Preparación de solución de fosfato de calcio (2,25 mM Na2HPO4·H2O, 4 mM CaCl2·2H2O, 0,14 M NaCl, 50 mM de base Tris en ddH2O)

Para:

Preparación de solución de fosfato de calcio (2,25 mM de Na2HPO4, 4 mM de CaCl2·2H2O, 0,14 M de NaCl, 50 mM de base Tris en ddH2O)

El paso 1.4.1 del Protocolo se ha actualizado desde:

Agregue 2 mL de 1 M de HCl a 40 mL de agua desionizada en un vaso de precipitados con una perla de agitación magnética y disuelva 0.016 g de Na2HPO4·H2O, 0.0295 g de CaCl2·2H2O, 0.409 g de NaCl y 0.303 g de Tris base uno por uno.

Para:

Agregue 2 mL de 1 M de HCl a 40 mL de agua desionizada en un vaso de precipitados con una perla de agitación magnética y disuelva 0.016 g de Na2HPO4, 0.0295 g de CaCl2·2H2O, 0.409 g de NaCl y 0.303 g de Tris base uno por uno.