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Electromiografía de fibra única estimulada (SFEMG) para evaluar la transmisión de la unión neuromuscular en modelos de roedores

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DOI:

10.3791/66452

8 de marzo de 2024

En este artículo

Resumen

En este estudio, demostramos un protocolo refinado de electromiografía de fibra única (SFEMG) para permitir la medición in vivo de la transmisión de la unión neuromuscular (NMJ) en modelos de roedores. Se describe un enfoque paso a paso de la técnica SFEMG para permitir la cuantificación de la variabilidad y el fracaso de la transmisión de NMJ en el músculo gastrocnemio de rata.

Resumen

Como conexión final entre el sistema nervioso y el músculo, la transmisión en la unión neuromuscular (NMJ) es crucial para la función motora normal. La electromiografía de fibra única (SFEMG) es una técnica clínicamente relevante y sensible que mide las respuestas potenciales de acción de una sola fibra muscular durante las contracciones voluntarias o las estimulaciones nerviosas para evaluar la transmisión de la NMJ. La evaluación y cuantificación de la transmisión de NMJ implica dos parámetros: fluctuación de fase y bloqueo. La fluctuación se refiere a la variabilidad en el tiempo (latencia) entre potenciales de acción consecutivos de una sola fibra (SFAP). El bloqueo significa el fracaso de la transmisión NMJ para iniciar una respuesta SFAP. Aunque el SFEMG es una prueba bien establecida y sensible en entornos clínicos, su aplicación en la investigación preclínica ha sido relativamente poco frecuente. Este informe describe los pasos y criterios empleados en la realización de SFEMG estimulado para cuantificar la fluctuación y el bloqueo en modelos de roedores. Esta técnica se puede utilizar en estudios preclínicos y clínicos para obtener información sobre la función de la NMJ en el contexto de la salud, el envejecimiento y la enfermedad.

Introducción

La electromiografía de fibra única (SFEMG) fue desarrollada inicialmente por Stålberg y Ekstedt en la década de 1960 para identificar y analizar los potenciales de acción de las fibras musculares individuales, principalmente para estudiar la fatigamuscular. El SFEMG es la técnica clínica más sensible para la evaluación de la transmisión de la unión neuromuscular (NMJ)2. El SFEMG se lleva a cabo mediante el registro selectivo de potenciales de acción de una sola fibra (SFAP)3. La transmisión de la NMJ puede verse comprometida debido a factores como el envejecimiento 4,5 y diversos trastornos neuromusculares como la miastenia gravis y la esclerosis lateral amiotrófica6. Además, condiciones como la isquemia, las fluctuaciones de temperatura y el uso de agentes bloqueantes neuromusculares pueden dar lugar a deficiencias en la transmisión de la NMJ, que se manifiestan por una mayor variabilidad de la transmisión de la NMJ y la aparición de fallos de la NMJ2.

Hay dos enfoques para registrar la SFEMG: la estimulada y la voluntaria. El SFEMG voluntario consiste en el registro de SFAPs de dos NMJs suministrados por el mismo axón motor utilizando un electrodo de aguja concéntrico insertado en el músculo que se está probando durante la activación voluntaria7. En consecuencia, el SFEMG voluntario requiere la cooperación del sujeto y solo puede evaluar unidades motoras de bajo umbral (las que se activan durante contracciones débiles)3. El SFEMG estimulado utiliza un par de electrodos estimulantes para estimular los axones motores mientras se registran los SFAP con un electrodo de aguja SFEMG insertado en el músculo que se está probando7.

Tanto en la SFEMG voluntaria como en la estimulada, la fluctuación de fase y el bloqueo son los dos parámetros utilizados para evaluar y cuantificar la transmisión de NMJ8. La fluctuación describe la variabilidad en el tiempo (latencia) entre SFAP consecutivos. Durante la SFEMG voluntaria, la fluctuación de fase se cuantifica evaluando las diferencias de latencia entre un par de SFAP (suministrados por el mismo axón motor) durante 50 a 100 descargas consecutivas. Durante la SFEMG estimulada, la fluctuación se cuantifica evaluando las diferencias de latencia entre el momento de la estimulación y el inicio del SFAP durante 50 a 100 descargas consecutivas. El bloqueo indica el fracaso de la transmisión de NMJ para desencadenar una respuesta SFAP, y se puede cuantificar como la presencia o ausencia de cada par de SFAP durante el SFEMG voluntario o para cada NMJ durante el SFEMG estimulado 2,7.

Si bien es una prueba establecida y sensible en el entorno clínico, la SFEMG solo se ha aplicado con poca frecuencia en la investigación preclínica 4,5,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18 . En este informe, describimos el enfoque para realizar y analizar registros de SFEMG en modelos preclínicos de roedores. Además, presentamos datos representativos que destacan hallazgos representativos en SFEMG que indican un deterioro de la transmisión de NMJ después de la administración de un agente bloqueante neuromuscular no despolarizante, el rocuronio.

Protocolo

Todos los protocolos fueron aprobados y realizados de acuerdo con las regulaciones establecidas por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Missouri.

1. Preparación animal y administración de anestesia

  1. Póngase el equipo de protección personal adecuado.
  2. Antes del procedimiento, mida el peso de la rata para determinar la dosis adecuada para los medicamentos basados en el peso y la configuración del ventilador.
  3. Inducir la anestesia con isoflurano inhalado al 3%-5%. Una vez que se haya establecido un nivel adecuado de anestesia, coloque a la rata en posición prona y mantenga la anestesia con isoflurano inhalado al 1%-3%.
  4. Verifique la adecuación de la profundidad de la anestesia presionando suavemente la almohadilla del pie de la extremidad posterior con pinzas para observar la ausencia de una respuesta de retirada.
  5. Mantener la temperatura corporal a 37 °C.
  6. Aplique un ungüento a base de petróleo aprobado por un veterinario en los ojos para prevenir la sequedad. Controle la profundidad de la anestesia observando la frecuencia respiratoria y evaluando las respuestas de retirada al aplicar presión sobre la almohadilla para los pies con fórceps.
  7. Afeitar la extremidad trasera para ser evaluada con una maquinilla. Después de una depilación adecuada, con cinta adhesiva, coloque la extremidad a estudiar con el tobillo fijo a aproximadamente 90° de dorsiflexión, la rodilla en extensión y la cadera en abducción.
  8. Monitorea continuamente la respiración y la frecuencia cardíaca de la rata durante todo el experimento.
    NOTA: Un aumento en la frecuencia cardíaca se usa comúnmente como un indicador de una profundidad anestésica inadecuada.
  9. Administre isoflurano para eutanasiar a la rata, con una dosis de 5% o más, hasta que la respiración haya cesado durante al menos 3 minutos. Confirmar la eutanasia por decapitación.

2. Colocación y configuración de electrodos

NOTA: La transmisión de la NMJ del nervio ciático y el músculo gastrocnemio se evalúa mediante el sistema de electromiografía (EMG). Consulte la tabla de materiales.

  1. Inserte un par de agujas monopolares aisladas de 28 G para estimular el nervio ciático con el cátodo en la región de la extremidad posterior proximal, mientras que el ánodo está más proximalmente dentro del tejido subcutáneo que recubre el sacro.
  2. Asegúrese de que los electrodos estimulantes no estén colocados en proximidad inmediata del nervio ciático o excesivamente profundos para evitar daños directos al nervio ciático u otras estructuras adyacentes.
  3. Coloque un electrodo de tierra desechable en la extremidad posterior contralateral o en la cola.
  4. Coloque con cuidado un electrodo de aguja de 25 mm de calibre 27 diseñado específicamente para EMG de una sola fibra, con una superficie de grabación hecha de material de platino-iridio en el músculo gastrocnemio derecho. Asegúrese de que los electrodos SFEMG se corten en autoclave antes de cada uso para mantener la esterilidad.
  5. Inserte el electrodo de aguja SFEMG en paralelo con las fibras musculares gastrocnemias para capturar los potenciales de acción de una sola fibra (SFAP).
  6. Evite el daño muscular mientras inserta y maniobra la aguja SFEMG dentro del músculo.

3. Procedimiento de electromiografía de fibra única estimulada (SFEMG)

  1. Aplique estimulación de corriente constante al nervio ciático derecho a una frecuencia de 10 Hz utilizando un rango de intensidad de 0,3-10 mA y una duración de pulso de 0,1 ms.
  2. Configure los ajustes del filtro dentro de un filtro de baja frecuencia de 1 kHz y un filtro de alta frecuencia de 10 kHz. Ajuste la ganancia de 200 μV a 1000 μV por división para facilitar la visualización de los potenciales. Establezca la velocidad de barrido en 500 μs por división.
  3. Ajuste la intensidad del estímulo para activar y aislar los SFAP para su registro y posterior análisis.
    1. Para identificar y analizar una respuesta como SFAP, asegúrese de que se cumplan los criterios específicos que se mencionan a continuación: Asegúrese de que el tiempo de aumento desde el pico de referencia hasta la fase negativa sea inferior a 500 μs, que la amplitud mínima (pico de referencia a negativo) sea de al menos 200 μV y que la respuesta exhiba sistemáticamente un comportamiento de todo o nada (tamaño y forma estables entre las respuestas).
      NOTA: Es esencial que las respuestas recurrentes exhiban fases ascendentes consistentes sin muescas ni puntos de inflexión. Tenga en cuenta que el último criterio es crucial para distinguir una señal de calidad de la suma de múltiples señales.
  4. Calcular la fluctuación de fase o la variabilidad de la latencia de la SFAP (tiempo entre la estimulación y la fase ascendente del pico negativo de la SFAP) entre descargas consecutivas, después de al menos 50 estimulaciones (50-100 estimulaciones), y evaluar y cuantificar el bloqueo.
    NOTA: El bloqueo puede evaluarse como la presencia o ausencia en cada sinapsis o como el porcentaje de estimulaciones que no logran desencadenar la generación de potencial de acción de una sola fibra. La fluctuación de fase se calcula utilizando la siguiente ecuación7 (la fluctuación de fase suele calcularse automáticamente mediante los sistemas de electromiografía clínica):
    Diagrama de fórmula de fluctuación de MCD; Método para calcular la fluctuación de fase en microsegundos utilizando intervalos entre pulsos.
    MCD = Valor medio de la diferencia consecutiva
    IPI = Intervalo Interpotencial
  5. Repita el proceso para obtener respuestas SFAP adicionales. En promedio, evalúe 10 sinapsis de cada animal para calcular el jitter y posteriormente determine los valores promedio por animal.
  6. Excluir de los análisis los SFAP con fluctuación de fase inferior a 4 μs para evitar la inclusión de potenciales que podrían haber sido evocados por la estimulación muscular directa11.
  7. Al registrar potenciales que muestran bloqueo intermitente, aumente la intensidad del estímulo para verificar que el fracaso del SFAP no sea atribuible a la estimulación submáxima.

Resultados

Para demostrar el aumento de la fluctuación de fase y el bloqueo en el contexto de la falla de la transmisión de NMJ, se realizó SFEMG estimulado con y sin administración intravenosa de rocuronio. El rocuronio es un agente bloqueante neuromuscular no despolarizante de acción intermedia ampliamente utilizado en entornos clínicos para inducir parálisis muscular durante cirugías o procedimientos médicos. Opera uniéndose competitivamente a los receptores nicotínicos de acetilcolina en el NMJ19. Antes de la administración de rocuronio, la rata adulta de tipo salvaje (Sprague Dawley) fue preparada y anestesiada como se describe en la sección 1. Debido a la parálisis inducida por rocuronio, se utilizó soporte ventilatorio invasivo para obtener datos representativos (en contraste con el abordaje típico para la anestesia durante los registros de SFEMG descrito anteriormente en la sección 1). Se colocó un tubo endotraqueal y se mantuvo la ventilación a 60 respiraciones/min utilizando un modo controlado por presión con una presión de 17 mmHg y una presión positiva al final de la espiración de 3 cm H2O mientras se administraba isoflurano al 2%-3%. Una vez logrado el soporte ventilatorio y la anestesia, se registraron los potenciales de acción de una sola fibra con y sin tratamiento con rocuronio (bolo de bromuro de rocuronio de 0,05 mg/kg por vía intravenosa). La Figura 1 muestra tres registros representativos del potencial de acción de una sola fibra del mismo NMJ en una rata adulta. La Figura 1A muestra la morfología típica de un potencial de acción de una sola fibra (después de una sola estimulación) con un tiempo de aumento de menos de 500 μs desde la línea de base hasta el pico negativo y una amplitud mínima (pico a pico) de al menos 200 μV. La Figura 1B muestra características de aumento de la fluctuación de fase y bloqueo intermitente después de la inyección de rocuronio. La Figura 1C muestra la normalización de la fluctuación y el bloqueo de la misma sinapsis después de la resolución del bloque NMJ. Para simplificar la visualización, la Figura 1B,C solo muestra las respuestas después de 9 estimulaciones consecutivas. Además, para una mejor comprensión, la Figura 2 muestra un ejemplo adicional de tres potenciales de acción superpuestos de una sola fibra observados después de 10 estimulaciones consecutivas, lo que revela un aumento de la fluctuación y el bloqueo.

Para cuantificar el impacto del rocuronio en la transmisión de NMJ utilizando SFEMG estimulado, se realizaron registros de 5 NMJ sin ningún tratamiento y de 5 NMJ después de la administración de rocuronio y se analizaron para determinar la fluctuación de fase y el bloqueo (Figura 3). Después del rocuronio, la fluctuación de fase (Figura 3A) y el bloqueo (Figura 3B) aumentaron significativamente.

Gráficos de potencial de acción de fibra única que muestran tendencias de latencia y amplitud; Resultados del análisis de fluctuación.
Figura 1: Tres registros representativos de electromiografía de una sola fibra de la misma unión neuromuscular (NMJ). (A) Ejemplo de un potencial de acción de una sola fibra después de una sola estimulación nerviosa que muestra los criterios de amplitud (línea de base a amplitud de pico negativo de al menos 200 μV) y tiempo de aumento (línea de base a pico negativo menos de 500 μs) criterios para la aceptación como potencial de fibra única. (B) Ejemplo de potenciales de acción de una sola fibra superpuestos después de 9 estimulaciones consecutivas que muestran un aumento de la fluctuación y el bloqueo que indica una transmisión alterada de NMJ después de la administración de rocuronio (fluctuación: 68,35 μs). (C) Ejemplo de potenciales de acción de una sola fibra superpuestos después de 9 estimulaciones consecutivas que muestran fluctuación reducida y sin bloqueo, lo que indica una normalización de la transmisión de NMJ después de la resolución del tratamiento con rocuronio (fluctuación: 21,7 μs). Las trazas representativas de SFEMG revelan potenciales de acción de fibras musculares individuales registradas a partir de una sinapsis sana sin bloqueo y con fluctuación normal en la vista superpuesta. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Gráfico de amplitud de potencial de acción de fibra única; latencia vs amplitud; evento de estimulación bloqueado.
Figura 2: Tres potenciales de acción de fibra única (SFAP) superpuestos registrados después de estimulaciones consecutivas durante la administración de rocuronio. Se registraron tres potenciales de acción de una sola fibra (SFAP) superpuestos después de 10 estimulaciones consecutivas durante la administración de rocuronio, lo que indica un aumento de la fluctuación y el bloqueo. Los valores de fluctuación de fase para A, B y C fueron de 24,3 μs, 46,9 μs y 88,7 μs, respectivamente. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Gráficos de barras de bloqueo de transmisión y fluctuación de NMJ; retraso medio, porcentaje de estimulación; datos de investigación.
Figura 3: Evaluación electromiográfica de fibra única de la transmisión de la unión neuromuscular (NMJ) después del tratamiento con un agente bloqueante de NMJ no despolarizante. (A) Durante la administración de rocuronio (0,05 mg/kg), SFEMG mostró una mayor variabilidad de la transmisión (fluctuación) en comparación con la condición saludable (sin tratar: 12,9 μs, IC del 95% [7,2-16,9 μs] frente al rocuronio: 40,70 μs, IC del 95% [34,7-70,7 μs]) (prueba de Mann Whitney: p = 0,0079). (B) El porcentaje de estimulaciones con bloqueo de la NMJ de cada sinapsis en SFEMG aumentó en comparación con el estado sano (sin tratar: 0%, IC del 95% [0-0%] frente al rocuronio: 31%, IC del 95% [14,0-59,0%]) (prueba de Mann Whitney: p = 0,0079). Todas las mediciones (fluctuación de fase y porcentajes de estimulaciones con bloqueo de NMJ) se obtuvieron de una sola rata, n = 5 sinapsis no tratadas y n = 5 sinapsis después del tratamiento con rocuronio. Los datos se muestran como mediana ± intervalo de confianza del 95%. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.

Discusión

El SFEMG se usa comúnmente para pruebas diagnósticas en pacientes con sospecha de formas autoinmunes, adquiridas y genéticas de la enfermedad NMJ. La SFEMG es considerada la prueba más sensible para el diagnóstico del trastorno de la NMJ, miastenia gravis20,21. La estimulación nerviosa repetitiva (RNS) es otro método que se utiliza con mayor frecuencia en las pruebas diagnósticas clínicas y consiste en estimular un nervio periférico con una serie de estímulos y cuantificar la respuesta potencial de acción muscular compuesta sumada del músculo inervado 5,22. El RNS ha demostrado consistentemente tener una sensibilidad significativamente menor en comparación con el SFEMG23,24. La ventaja del SFEMG radica en la capacidad de evaluar selectivamente las fibras musculares individuales y cuantificar no solo el fallo de la transmisión (bloqueo) de NMJ, sino también la variabilidad (jitter)2,25,26. Si bien es una prueba establecida y sensible en el entorno clínico, la SFEMG solo se ha aplicado con poca frecuencia en la investigación preclínica 4,5,9,10,11,12,13,14,15,16 . Los modelos animales de enfermedades neuromusculares desempeñan un papel fundamental en la determinación de los mecanismos subyacentes de las enfermedades humanas y en el desarrollo de intervenciones terapéuticas. La capacidad de aplicar medidas de resultado y biomarcadores, como el SFEMG, en diferentes especies puede agilizar y acelerar la transición de descubrimientos preclínicos prometedores a estudios clínicos en humanos27. Por ejemplo, un estudio multicéntrico realizado en Japón se centró en establecer valores de referencia para el SFEMG utilizando agujas concéntricas en sujetos humanos sanos. El estudio indicó que los valores de corte recomendados para la MCD individual fueron de 58,8 μs para el SFEMG estimulado en el músculo extensor de los dedos comunes (EDC)28. Cabe destacar que el músculo gastrocnemio no suele estar sometido a SFEMG, siendo el EDC el músculo más cercano estudiado en este contexto. En consecuencia, se observó que los valores de fluctuación de fase que obtuvimos de las ratas eran inferiores a los informados en los estudios clínicos. Estas discrepancias sugieren que la distribución del factor de seguridad varía según el músculo y la especie considerada.

En este informe, presentamos un enfoque escalonado para la aplicación de SFEMG estimulado en roedores, incluidos los pasos para la preparación de los animales, la colocación de electrodos, el registro del potencial de acción de una sola fibra y los análisis. Además, presentamos datos representativos en un modelo inducido de falla de NMJ (administración de rocuronio) para ayudar a demostrar claramente los conceptos de aumento de fluctuación y bloqueo, así como el concepto de todo o nada de un potencial de acción de una sola fibra en el registro de SFEMG. Anteriormente, en un estudio experimental, una rata sin el agente bloqueante mostró un cambio menor en la MCD (alrededor de 10 μs) sin bloqueo en los primeros 3000 s. Por el contrario, una rata inyectada con 0,08 mg/Kg de vecuronio mostró un aumento de la fluctuación después de 200 s, lo que llevó a un bloqueo alrededor de 500 s, con una MCD inicial de alrededor de 50 μs, lo que coincide con nuestros resultados17. Establecer la dosis correcta de rocuronio en las ratas fue esencial para alcanzar el nivel objetivo de bloqueo neuromuscular y mitigar las posibles complicaciones. Mientras que varios estudios emplearon dosis que oscilaron entre 0,1 mg/kg y 5 mg/kg para inducir la parálisis muscular 17,29,30, optamos por una dosis de 0,05 mg/kg. Esta elección se alinea con el reconocimiento de que el deterioro de la NMJ se inicia antes del inicio de la parálisis muscular.

La adquisición de respuestas de potencial de acción de una sola fibra utilizando SFEMG implica varios pasos cruciales. En particular, la obtención de registros selectivos requiere práctica para realizar varias tareas al mismo tiempo, incluida la administración adecuada de la estimulación nerviosa mientras se adquieren respuestas adecuadas. Durante las grabaciones, el electrodo de registro SFEMG se inserta y ajusta cuidadosamente con movimientos pequeños y constantes para minimizar el trauma muscular y mejorar el rendimiento. Una vez que se ha identificado un potencial de acción, se deben realizar pequeños ajustes de la posición del electrodo de estimulación y registro para optimizar la amplitud del potencial de acción de una sola fibra y la "nitidez" (tiempo de subida corto). Una vez que se identifica un potencial y se optimizan la amplitud y el tiempo de aumento, los movimientos de los electrodos deben minimizarse para garantizar la estabilidad de las respuestas de todo o nada. La posición constante de los electrodos es crucial, ya que incluso pequeños cambios en la posición de la aguja de registro pueden dar lugar a fluctuaciones en las características del potencial de acción, como la forma, la amplitud y la latencia. Es importante asegurarse de que los potenciales de acción sean estables y cumplan con la apariencia de todo o nada. La variabilidad de las respuestas puede estar relacionada con el movimiento del electrodo o la superposición de múltiples potenciales de acción de una sola fibra de diferentes NMJ. Juntos, estos factores juegan un papel clave en el logro de la reproducibilidad y la medición estable del potencial de acción 2,26. Además, excluir de los análisis los SFAP con fluctuación de fase inferior a 4 μs es un enfoque prudente para garantizar la fiabilidad de los resultados. Este criterio estricto ayuda a evitar la inclusión de potenciales que potencialmente podrían ser artefactos inducidos por la estimulación muscular directa, mejorando así la precisión de la evaluación11. Otro factor importante en los estudios de fluctuación de estimulación es la estimulación subliminal, particularmente en condiciones patológicas, donde muchos picos aparentemente han aumentado la fluctuación. Es esencial confiar en el operador para garantizar que la intensidad del estímulo supere el umbral para todos estos picos, ya que esta determinación no puede hacerse retrospectivamente31.

La técnica de SFEMG estimulado descrita en este manuscrito utiliza un electrodo de SFEMG especializado en lugar de un electrodo de aguja de electromiografía concéntrica estándar. Nuestro electrodo SFEMG presenta una superficie de registro de 0,0005mm2, en contraste con la superficie de grabación de aproximadamente 0,019mm2 de un electrodo de aguja de electromiografía concéntrica de tamaño pediátrico estándar. Esta distinción es crucial, ya que los electrodos de aguja concéntricos más grandes, con menos selectividad debido a sus superficies de registro más grandes, pueden ser adecuados para que el SFEMG voluntario capture pares de potencial de acción aparente de una sola fibra. Sin embargo, en la estimulación SFEMG, donde a menudo se estimulan simultáneamente múltiples axones o unidades motoras, el empleo de electrodos de aguja concéntricos más grandes se vuelve más desafiante7.

Hay que tener en cuenta algunas limitaciones. También es importante señalar que el SFEMG no puede determinar el mecanismo subyacente a un defecto en la transmisión neuromuscular, como se puede lograr con los registros intracelulares realizados ex vivo27. Otra consideración esencial con respecto al SFEMG es su limitación en el registro selectivo de tipos específicos de fibras musculares. En consecuencia, es probable que los registros de SFEMG representen una mezcla variable de diferentes tipos de fibras musculares5.

Divulgaciones

W. David Arnold recibió fondos de investigación de NMD Pharma y Avidity Biosciences y es consultor para NMD Pharma, Avidity Biosciences, Dyne Therapeutics, Novartis, Design Therapeutics y Catalyst Pharmaceuticals.

Agradecimientos

Los autores desean agradecer al Dr. Martin Brandhøj Skov de NMD Pharma por sus valiosos consejos sobre la dosificación de rocuronio y a Arash Karimi del Departamento de Ingeniería Biomédica de la Universidad de Stony Brook por su ayuda en los cálculos. Este estudio fue financiado en parte por los NIH y la WDA (R01AG067758 y R01AG078129).

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
  Electrodo de aguja de fibra única reutilizable de 27 gTechnomed202860-000electrodo de registro de fibra única
Jeringa de vidrio de 2 mLKent Scientific CorporationSOMNO-2ML
Cable desmontableTechnomed202845-0000para conectar el electrodo registrador a la máquina de electrodiagnóstico
Electrodo de disco desechable de 2" x 2" con cablesCadwell302290-000electrodo de tierra
agujas monopolares desechables 28 GTechnomed202270-000electrodos estimulantes de cátodo y ánodo
Cable de aguja EMG (caja de interruptores Amp/stim)Cadwell190266-200para conectar electrodos monopolares a un estimulador electrodiagnóstico
Helping Hands pinza de cocodrilo con base de hierroRadio Shack64-079 Mantenimiento dela colocación de electrodos de registro 
Isoflurano (frasco de 250 ml)Piramal HealthcareNA
jeringa irrigadora monoyecto de punta curvaCovidien81412012utiliza para la aplicación de gel de electrodos Sistema de
monitoreo fisiológico PhysioSuite con calentamiento homeotérmico RightTempKent Scientific CorporationPS-RTIncluye almohadilla de calentamiento infrarrojo, sonda rectal y sonda de temperatura de la almohadilla
Recortadora Pro Pet Kit de aseoOster078577-010-003cortapelos para depilación
Tubos endotraqueales para ratas (16 g)Kent Scientific Corporation
Bromuro de rocoronioSigmaPHR2397-500MGagente bloqueador neuromuscular
Sierra Summit Sistema EMGCadwell Industries, Inc., Kennewick, WANAsistema de electrodiagnóstico portátil
SomnoSuite Low-Flow Sistema de anestesia digitalKent Scientific CorporationSOMNOIncluye adaptador antiderrame y antivapor para la parte superior de la botella; Tubo adaptador en Y; filtro de limpieza de carbón
vegetal ungüento oftálmico veterinario a base de petróleo Puralube26870aplicado durante la anestesia para evitar lesiones en la córnea

Referencias

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