Aquí, describimos un protocolo estandarizado diseñado para dilucidar los mecanismos celulares y moleculares que subyacen a la remodelación ósea durante la OTM. Una comprensión profunda de estos mecanismos en ratones requiere un protocolo meticulosamente planificado para garantizar la precisión y la fiabilidad 7,11. Los estudios realizados por nuestro grupo de investigación han demostrado que este protocolo reduce eficazmente la variabilidad del operador al incorporar un manómetro de tensión y un aparato especialmente diseñado, estableciendo 0,35 N como la fuerza óptima para OTM en un modelo de ratón 4,16,17,18,19,20 . Para mejorar la eficacia de los procedimientos experimentales y maximizar el uso de muestras animales, las muestras utilizadas para el análisis de micro-TC también pueden someterse a un procesamiento para la histología de rutina. Posteriormente, la OTM puede ser evaluada en secciones de 5 μm, utilizando el CEJ como punto de referencia para las mediciones16,19. La tinción con hematoxilina y eosina, junto con técnicas especializadas como la fosfatasa ácida resistente al tartrato (TRAP) y el tricrómico de Masson, también sirven como métodos efectivos para evaluar la integridad de la raíz y cuantificar osteocitos, osteoclastos y osteoblastos dentro de las regiones de interés 4,5,16.
Las alteraciones dinámicas en la microestructura del hueso alveolar durante la OTM en roedores se han investigado utilizando sistemas de micro-CT. Estas evaluaciones tienen como objetivo ofrecer información valiosa para el tratamiento clínico ortodóncico14,15. El micro-CT es una técnica analítica capaz de capturar estructuras internas con alta resolución y precisión a nivel de micras. Este método permite la reconstrucción de especímenes a pequeña escala en imágenes 3D detalladas, lo que permite un análisis cualitativo y cuantitativo preciso de las muestras22. De acuerdo con estudios previos, la OTM se evaluó cuantificando la discrepancia lineal entre la CEJ de los primeros y segundos molares del hemimaxilar derecho en comparación con el hemimaxilar izquierdo 17,18,19,20. En el contexto de las imágenes dentales, la micro-TC presenta varias ventajas. Puede identificar pequeños defectos en las superficies radiculares, medir con precisión los cambios dentales lineales y evaluar la morfología ósea trabecular y cortical22,23. Cabe destacar que la guía actual para evaluar la microestructura ósea en roedores mediante micro-TC enfatiza el conjunto mínimo de variables recomendadas para describir la morfometría ósea trabecular y cortical23. Además, es crucial analizar la ocurrencia de OIIRR, una complicación grave durante el tratamiento ortodóncico16,21. Los investigadores deben evaluar la intensidad de la reabsorción radicular, ya que la presencia de OIIRR indica que la fuerza aplicada puede ser excesiva, requiriendo ajustes 16,21.
El cumplimiento de los pasos críticos en la investigación de OTM en modelos animales es esencial para obtener resultados fiables. Esto incluye una selección cuidadosa de los animales, teniendo en cuenta factores como la tensión, la edad, el metabolismo óseo, la tasa de crecimiento y los antecedentes genéticos. La elección de modelos animales influye significativamente en los resultados de los estudios, ya que las variaciones en estos factores afectan la fisiología ósea y la respuesta a las fuerzas ortodóncicas6. El momento de la eutanasia de los animales también es fundamental porque captura etapas específicas de la remodelación ósea en respuesta a las fuerzas ortodóncicas. Por ejemplo, Taddei et al.4 realizaron análisis moleculares a las 0, 12 y 72 horas, con análisis histopatológico a los 6 días, lo que permitió evaluar los cambios temporales en los marcadores de remodelado óseo durante la OTM. Además, se han investigado las variaciones relacionadas con la edad en la OTM, arrojando luz sobre cómo el envejecimiento afecta a los procesos de remodelación ósea23.
El uso de un muelle helicoidal de NiTi, aunque eficaz para inducir el movimiento de los dientes, presenta ciertos inconvenientes que pueden afectar al bienestar animal y a los resultados experimentales. Se observa que la inserción de un resorte helicoidal de NiTi requiere más tiempo y es técnicamente más exigente en comparación con métodos alternativos, como el uso de bandas elásticas7. Este aumento de la complejidad puede conducir a un mayor riesgo de lesiones durante la inserción, lo que a su vez puede resultar en efectos adversos como una mayor pérdida de peso corporal después del procedimiento y una tasa de mortalidad elevada entre los animales7. En nuestra experiencia, el monitoreo diario de los animales y la implementación de medidas de apoyo, como el ablandamiento de la alimentación, han demostrado ser fundamentales para minimizar los efectos adversos asociados con el uso de resortes helicoidales de NiTi para OTM en modelos animales. Estas medidas no solo contribuyen al bienestar de los animales, sino que también mejoran la confiabilidad y validez de los resultados experimentales al reducir los factores de confusión y garantizar la consistencia en los protocolos de investigación 4,16,17,18,19,20.
El empleo de OTM en ratones, combinado con el análisis de micro-CT, ofrece un modelo adecuado para sondear los mecanismos de adaptación ósea, reabsorción radicular y respuestas celulares a estímulos de fuerza mecánica. Este enfoque integrado proporciona información valiosa sobre los intrincados procesos que subyacen al tratamiento ortodóncico y facilita el desarrollo de nuevas estrategias e intervenciones terapéuticas.