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Artículo de método

Estudios sobre el efecto antiinflamatorio de las píldoras Xiaoyao en el tratamiento de la osteoporosis posmenopáusica en ratones

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DOI:

10.3791/67051

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23 de agosto de 2024

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En este artículo

Resumen

La osteoporosis posmenopáusica se ha convertido en un problema de salud pública mundial. El objetivo de este estudio es explorar los efectos terapéuticos y los mecanismos relacionados de las píldoras de medicina tradicional china Xiaoyao sobre esta afección.

Resumen

La osteoporosis es una enfermedad metabólica común de las mujeres ancianas y posmenopáusicas, sin síntomas evidentes durante sus primeras etapas. En las últimas etapas de esta afección, los pacientes son propensos a sufrir fracturas, lo que puede afectar seriamente su salud y calidad de vida. El aumento de la esperanza de vida en todo el mundo ha convertido a la osteoporosis en una preocupación mundial. Las píldoras Xiaoyao fueron anteriormente
Se utiliza en el tratamiento de la depresión. Además, el fármaco parecía tener una actividad similar a la del estrógeno, lo que afectó a la expresión de ALP, un marcador temprano específico del osteoblasto, y COL-1, un componente importante de la matriz extracelular ósea. Las píldoras de Xiaoyao se evaluaron por sus efectos sobre la osteoporosis posmenopáusica (PMOM) en ratones. Se accedió a la información objetivo de cada componente herbal de las píldoras Xiaoyao a través de la base de datos de Farmacología de los Sistemas de Medicina Tradicional China (TCMSP). La información de GeneCards, OMIM, PharmGkb, TTD, DrugBank y otros sitios web se utilizó para construir la red reguladora del complejo herbal a través de Cytoscape y la red String para evaluar las interacciones de las proteínas. Los ratones fueron ovariectomizados y tratados con dosis altas y bajas de píldoras Xiaoyao y estos se compararon con los controles. Sus síntomas se evaluaron mediante inmunocitoquímica de los tejidos óseos. Los resultados sugirieron que las píldoras de Xiaoyao tenían la capacidad de aliviar los síntomas de PMOM en ratones ovariectomizados a través de la vía de señalización IL-17. Este fármaco tiene el potencial de convertirse en un nuevo agente terapéutico para el tratamiento de la osteoporosis.

Introducción

La Organización Mundial de la Salud (OMS) define la osteoporosis (OP) como una enfermedad caracterizada por una disminución de la masa ósea y un deterioro de la microarquitectura del tejido óseo, lo que conduce a un aumento de la fragilidad ósea y, por lo tanto, a un mayor riesgo de fractura1. La importancia clínica de la osteoporosis es que puede conducir a fracturas, las cuales se asocian con alta mortalidad, morbilidad y costos económicos2. La osteoporosis posmenopáusica (PMOP) es causada por una disminución de los niveles de estrógeno en las mujeres después de la menopausia, lo que conduce a un aumento de la activida....

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Protocolo

El Comité de Ética de Animales de Laboratorio de la Universidad Médica de Youjiang para las Nacionalidades aprobó el protocolo del estudio (número de aprobación: 2022101502). Los ratones hembra C57BL/6, de 10 a 12 semanas de edad, clase SPF y pesos corporales (22 ± 2) g, se alojaron en el Centro de Experimentación Animal de Clase SPF de la Universidad Médica de Youjiang para las Nacionalidades. Los animales de experimentación se mantuvieron a una temperatura de 24-26 °C y una humedad relativa de 55% a 60%.

1. Base de datos y plataforma de análisis de farmacología de los sistemas de medicina tradicional china

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Resultados

Ingredientes activos y objetivos de acción de las píldoras Xiaoyao
Al buscar en la base de datos de TCMSP y realizar el cribado según los criterios de biodisponibilidad oral (OB) ≥ 30% y propiedades similares a los medicamentos (DL) ≥ 0,18, se encontró que existían 125 ingredientes activos en las píldoras de Xiaoyao. Entre ellos, los ingredientes 6, 4, 9, 13, 2, 6, 83 y 2 eran de Paeonia lactiflora blanca, Atractylodes macrocephala, Menthae herba, Chaihu, Angelica sinens.......

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Discusión

Según las estadísticas, la osteoporosis causa 1,5 millones de fracturas cada año en los Estados Unidos, y la gran mayoría de ellas ocurren en mujeres posmenopáusicas27. Con el aumento del envejecimiento de la población, se prevé que la mayoría de las futuras fracturas de cadera del mundo se producirán en Asia y que en 2050 el número total de ellas en todo el mundo alcanzará los 8,2 millones28. El costo de prevenir las fracturas es casi igual al de tratarlas, y el uso de med.......

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Divulgaciones

Los autores declaran que no existe conflicto de intereses.

Agradecimientos

El Programa de Investigación Científica y Desarrollo Tecnológico (20224128) de la ciudad de Baise apoyó este trabajo. Los autores agradecen al Dr. Dev Sooranna del Imperial College de Londres y a YMUN por editar el manuscrito. YYX y ZYW contribuyeron por igual a este estudio.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Muestra de 1 mlGuangxi Beilunhe Medical Industrial Group Co.JYQ001Para anestesia en ratones
4%poliformaldehídoBeijing Solarbio Science & Tecnología Co., Ltd.P1110Para la fijación de tejidos
, sutura absorbible 6-0 (aguja en ángulo)Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co.HZX-06Para sutura postoperatoria
Bola de algodón absorbenteWinnerMIANQIU-500gPara esterilización y hemostasia
Portaobjetos adhesivosJiangsu Shitai Experimental Equipment Co.188105Para el corte de tejidos
: AmobarbitalSigma Aldrich (Shanghai) Trading Co.A-020-1MLPara anestesia en ratones
Solución de azulado BeijingSolarbio Science & Tecnología Co., Ltd.G1866Coloración azul de los núcleos de las células después de la acción de la solución de diferenciación de hematoxilina
C57BL/6 ratonesBeijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.(SCXK 2033-0063)Para uso en experimentos con animales, cuchillas quirúrgicas
de acero al carbono,Premier Medical Equipment, Co.SP239Para cirugía de ratón
CIKS/TRAF3IP2 Conejo pAbBIOSS ANTICUERPOSbs-6202RSe une a Act1 en los tejidos
Solución de hematoxilina de Cole (para tinción convencional)Beijing Solarbio Ciencia & Tecnología Co., Ltd.G1140Para la tinción de secciones de parafina
Anticuerpo policlonal de colágeno tipo Iproteintech14695-1-APSe une a COL-1 en tejidos
DAB Kit de sustrato,20xBeijing Solarbio Science & Tecnología Co., Ltd.DA1010Para el desarrollo del color del tejido
, hoja quirúrgica desechable, 50 * 60 CMNanchang, Xuhui Medical Equipment Co.SP4529777Para cirugía de ratón
Solución de descalcificación EDTA (pH 7.2)Beijing Solarbio Science & Tecnología Co., Ltd.E1171-500mlPara la descalcificación de tejidos
Tampón de Bloching de peroxidasa endógena mejoradaBeyotime BiotechnologyP0100BSecuestro de peroxidasas endógenas celulares o tisulares
Líquido transparente desparafinado respetuoso con el medio ambienteServicebioG1128-1LPara desparafinar secciones de parafina
Alcohol etílicoCHRON CHEMICALS64-17-5 (CAS)Para la deshidratación de secciones de parafina
diluyente de anticuerpos de uso generalEpizyme BiotechPS119Lde anticuerpos
Solución de diferenciación de hematoxilinaServicebioG1039-500MLPara la diferenciación después de la tinción con hematoxilina y la eliminación de colorantes excesivamente unidos y no específicamente adsorbidos de los tejidos
Kit de tinción de hematoxilina eosina (HE)Beijing Solarbio Science & Tecnología Co., Ltd.G1120-3 * 100mlPara tinción de tejidos
Mango de cuchillo quirúrgico de acero inoxidable de alta calidadPremier Medical Equipment Co.SP0088Para cirugía con ratón
Affinipure conjugado con HRP Cabra Anti-Conejo IgG(H+L)proteintechSA00001-2Se une al anticuerpo primario y amplifica la señal
IL-17A Anticuerpo policlonalproteintech13082-1-APSe une a la IL-17 en los tejidos
IL-6 Anticuerpo policlonalproteintech21865-1-APSe une a la IL-6 en los tejidos Pluma de
inmunohistoquímicaPekín Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co.ZLI-9305 (YA0310)Para dibujar círculos en inmunohistoquímica
Sutura quirúrgica médica No absorbente (bola) 5-0 3.5mYangzhou Yuanlikang Medical Equipment Co.FHX-5-2Para sutura postoperatoria,
agujas de sutura médica, agujas de ángulo, 4 * 10 3/8Chaohu Binxiong Medical Equipment Co.FHZ612-4Para sutura postoperatoria
Bálsamo neutroBeijing Solarbio Science & Tecnología Co., Ltd.G8590Como sellador de rebanadas
PBS(1X)Shenzhen Mohong Technology Co.,LtdB0015Tampón para el lavado de portaobjetos y dilución parcial
de solución Tampón de bloqueo rápido sin proteínas (1X)Epizyme BiotechPS108PEvitar la unión inespecífica de proteínas
Conejo Anticuerpo de fosfatasa alcalina antióseaANTICUERPOS BIOSSBS-6292RSe une a la fosfatasa alcalina en los tejidos
a solución salinaUniversidad Médica de Youjiang Para nacionalidadesLHN500Para animales por sonda nasogástrica
Maquinillas de afeitar/eléctricasHANGZHOU HUAYUAN PET PRODUCTS CO., LTD.DTJ-002Para ratones de afeitado
Portaagujas médicas de acero inoxidable Aguja gruesa de 14 cmPremier Medical Equipment Co.SP784Para cirugía de ratones
Pinzas oftálmicas de acero inoxidable de 10,5 cm curvadas (sin gancho)ZhuoyouyueYKNWW-10.5Para cirugía de ratones
Tijeras oftálmicas de acero inoxidable / Tijeras quirúrgicas 10 cm Punta recta Premier MedicalEquipment Co.ZYJD-10-ZJPara cirugía de ratón
Aguja gástrica con punta de acero inoxidable Calibre 12 CodoGWJ-12-55WPara uso en ratones por sonda nasogástrica
Líquido de reparación de antígenos Tris-EDTA (50x)proteintechPR30002Para la reparación de antígenos de secciones de parafina
Tablero de disección de madera 25 * 16 cmJP16 * 24Para cirugía
de ratones Píldoras Xiaoyao JiuzhitangCo., Ltd.YPG-041Para la administración de medicamentos en animales
Others
R 4.3.1Procesamiento de datos
Cytoscape3.9.1Recurso Nacional para la Biología de RedesConstrucción de una red reguladora para la medicina tradicional china
ImageJ 1.54fInstitutos Nacionales de SaludProcesamiento de imágenes para resultados de inmunohistoquímica
Adobe Photoshop 24.0.0AdobePara la combinación de imágenes
GraphpadPrism 9.5SoftwareGraphPad Análisis estadístico de
datos DimensionOLYMPUSPara cortar y fotografiar
OLYMPUS BX53OLYMPUSPara tinción HE y fotografía de sección inmunohistoquímica
, Para dilución Hospital afiliado de 55 mm

Referencias

  1. Kanis, J. A., Melton, L. J. 3rd, Christiansen, C., Johnston, C. C., Khaltaev, N. The diagnosis of osteoporosis. J Bone Miner Res. 9 (8), 1137-1141 (1994).
  2. Amin, U., Mcpartland, A., O'sullivan, M., Silke, C. An overview of the management of osteoporosis in the aging female population. Wom....

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