Aquí, describimos métodos para tatuar Xenopus laevis adulto (rana africana con garras) con una máquina de tatuar rotativa. Un tatuaje adecuado da como resultado números oscuros y fácilmente legibles que duran varios meses y hacen que los animales se distingan fácilmente para fines de investigación y mantenimiento de registros.
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Artículo de método
Métodos para tatuar Xenopus laevis con una máquina de tatuar rotativa
En este artículo
Resumen
Resumen
Los modelos animales amplían el alcance de la investigación biomédica, lo que mejora nuestra comprensión de la biología del desarrollo, molecular y celular y permite a los investigadores modelar enfermedades humanas. El registro y el seguimiento de animales individuales permite a los investigadores reducir el número de animales necesarios para el estudio y perfeccionar las prácticas para mejorar el bienestar animal. Existen varios métodos bien documentados para marcar y rastrear mamíferos, incluidos los puñetazos en las orejas y las marcas en las orejas. Sin embargo, los métodos para marcar las especies de anfibios acuáticos son limitados, ya que los recursos existentes son obsoletos, ineficaces o prohibitivamente costosos. En este manuscrito, describimos los métodos y las mejores prácticas para marcar Xenopus laevis con una máquina de tatuar rotativa. Un tatuaje adecuado da como resultado tatuajes de alta calidad, lo que hace que las personas sean fácilmente distinguibles para los investigadores y representan un riesgo mínimo para la salud de los animales. También destacamos las causas de los tatuajes de mala calidad, que pueden dar lugar a tatuajes que se desvanecen rápidamente y causan daños innecesarios a los animales. Este enfoque permite a los investigadores y veterinarios marcar a los anfibios, lo que les permite rastrear réplicas biológicas y líneas transgénicas y mantener registros precisos de la salud animal.
Introducción
Los modelos animales son herramientas útiles para investigar cuestiones relacionadas con la salud humana. En la práctica, la investigación biomédica con modelos animales requiere una organización y un mantenimiento cuidadosos de una colonia animal sana. Las mejores prácticas para el manejo y la cría éticos de animales tienen como objetivo reducir el número de animales necesarios para la experimentación y perfeccionar las prácticas para garantizar el bienestar animal1. El género de ranas con garras, incluyendo Xenopus laevis (X. laevis; Rana africana de garras) y Xenopus tropicalis (X. tropicalis; Rana de uñas....
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Protocolo
Todos los procedimientos con animales descritos fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de Dartmouth College.
1. Configuración del equipo
NOTA: Se incluye un flujo de trabajo para el procedimiento y un ejemplo de configuración del banco (Figura 1).
- Conecte la pistola de tatuaje y el pedal a la fuente de alimentación. Coloque el pedal debajo de la superficie de trabajo.
- Montaje de la pistola de tatuajes
- Con una llave Allen o un destornillador hexagonal, afloje los tornillos de la empuñadura (
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Resultados
Los tatuajes de alta calidad tendrán trazos oscuros y legibles en el pecho de la rana y se pueden diferenciar claramente a varios pies de distancia (Figura 5A). En general, los números y marcas más grandes son mejores para la legibilidad, pero los nombres y números más largos se pueden hacer más pequeños para que quepan cómodamente en el pecho de la rana. La longevidad de los tatuajes es más difícil de juzgar, pero los tatuajes de ranas de alta calidad deben permanecer oscuros y legibles dur.......
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Discusión
Tatuar humanos es una forma de arte que se remonta a miles de años, y durante el tiempo que los humanos se han tatuado a sí mismos, también han tatuado o marcado animales23. El equipo y las técnicas para marcar animales, en particular mamíferos, están bien establecidos, bien documentados y son ampliamente accesibles. Si bien el marcado de animales fue originalmente para distinguir el ganado y disuadir el robo23, su papel en la investigación biomédica se ha vuelto igual de i.......
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Divulgaciones
Los autores declaran no tener intereses contrapuestos.
Agradecimientos
Agradecemos al Centro de Medicina Comparativa e Investigación de Dartmouth College por proporcionar la cría diaria de los animales utilizados en este protocolo. También agradecemos a Leah Jacob y Adwaita Bose por su ayuda para probar el protocolo y fotografiar a los animales. Por último, agradecemos al laboratorio de Ann Miller por su formación en la práctica del tatuaje. Este trabajo fue apoyado por la subvención R00 de los NIH GM147826 a J.L.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Delineadores redondos de 3 agujas | Worldwide Tattoo Supply | 1203RLB | Empaquetado |
| 5 agujas redondo desechable ULTRA | Worldwide Tattoo Supply | HTIPRS5-U | Empaquetado estéril |
| Delineadores redondos de 5 agujas | Worldwide Tattoo Supply | 1205RLB | Empaquetados estériles |
| agujas redondos | Worldwide Tattoo Supply | 1207RLB | Empaquetado estéril |
| Clip Cord | Worldwide Tattoo Supply | N/A | |
| Pedal | Worldwide Tattoo Supply | N/A | |
| Tinteros | Worldwide Tattoo Supply | N/A | |
| Kimwipes, toallitas para tareas delicadas | Fisher Scientific | 06-666A | |
| RCA Connection | Worldwide Tattoo Supply | N/A | |
| Scream Ink Pitch Black, 1oz | Suministro mundial de tatuajes | SI101 | |
| Bicarbonato de sodio (NaHCO3) | Sigma-Aldrich | S5761 | |
| Puños de acero inoxidable | Suministro mundial de tatuajes | N/A | |
| Stealth 2.0 Máquina de tatuaje rotativa | Suministro mundial de tatuajes | N/A | |
| Stealth 2.0 Máquina de tatuaje rotativa Box Set | Suministro mundial de tatuajes | STEALTH2-SET | |
| Isla de espuma de poliestireno | N/A | N/A | Esta es la tapa de un contenedor de envío frío de espuma de poliestireno |
| Tricaína (3-aminobenzonato de etilo metanosulfato) | Sigma-Aldrich | E10521 | PRECAUCIÓN: IRRITANTE |
| Toallas de papel sin blanquear | Grainger | 2U229 | Las toallas de papel DEBEN estar sin blanquear, la lejía es tóxica para los anfibios |
| Suministro | de voltaje Suministro mundial de tatuajes | N/A | |
| Botella de lavado (con agua apta para ranas) | El | agua segura para FB0340923T ranas de Fisher Scientific está declorada, pH 7.0-8.5, conductividad 1200-1800 uS | |
| X. laevis hembra adulta | Xenopus1 | N/A | |
| Bolsa de plástico con cierre hermético | N/A | N/A | Esta bolsa debe ser lo suficientemente grande como para contener la isla de espuma de poliestireno |
Referencias
- Hubrecht, R. C., Carter, E. The 3Rs and humane experimental technique: Implementing change. Animals (Basel). 9 (10), 754(2019).
- Elkan, E. R. The Xenopus pregnancy test. British Med J. 2, 1253-1256 (1938).
- Vize, P. D., Zorn, A. M.
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Reimpresiones y permisos
