El protocolo describe el desarrollo de dos modelos de roedores que imitan las terapias hormonales de afirmación de género mediante la administración subcutánea de testosterona o estradiol más acetato de ciproterona (utilizado en terapias humanas para personas transgénero): ajuste de las dosis, identificación de biomarcadores relevantes y evaluación de los efectos.
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Artículo de método
Establecimiento de modelos de ratas que imitan las terapias hormonales de afirmación de género
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Resumen
Resumen
Las personas transgénero (TG) son individuos cuya identidad de género y sexo asignados al nacer no coinciden. A menudo se someten a la terapia hormonal de afirmación de género (GAHT), una intervención médica que permite la adquisición de características sexuales secundarias más alineadas con su identidad de género individual, proporcionando resultados consistentes en la mejora de numerosas variables sociopsicológicas. Sin embargo, el GAHT se dirige a diferentes sistemas corporales, y se han registrado algunos efectos secundarios, aunque aún no se han identificado y caracterizado por completo. Por lo tanto, las personas TG sometidas a GAHT pueden considerarse como un subgrupo susceptible de la población y se debe prestar especial atención en el marco de la evaluación de riesgos, por ejemplo, mediante el uso de modelos animales específicos. El presente trabajo describe los procedimientos establecidos para implementar dos modelos de ratas que imitan el GAHT: el modelo desmasculinizante-feminizante (dMF) que imita el GAHT para mujeres TG y el modelo desfeminizante-masculinizante (dFM) que imita el GAHT para hombres TG. Los modelos se han implementado mediante la administración de las mismas hormonas utilizadas para el GAHT humano, a saber, β-estradiol más acetato de ciproterona para el dMF y testosterona para el dFM, por las mismas vías de exposición durante un período de 2 semanas. Las ratas se examinan diariamente durante el tratamiento para evaluar el estado de salud y los comportamientos potencialmente agresivos. En el momento del sacrificio, se han tomado muestras de sangre y tejidos objetivo y se han almacenado para su análisis bioquímico, molecular e histopatológico. También se han evaluado los parámetros específicos del sexo, es decir, el recuento de espermatozoides y las dimensiones del clítoris. Además, las isoformas de CYP450, expresadas exclusiva y/o preferentemente en hígado de rata macho y hembra, se identifican y caracterizan como nuevos biomarcadores para verificar el éxito de GAHT y establecer el modelo. La afectación de la tiroides también se ha explorado como un objetivo clave en el sistema endocrino.
Introducción
La percepción psicológica del individuo de ser hombre, mujer, ninguno, ambos o en algún punto intermedio1 se llama identidad de género. Puede coincidir con el sexo biológico (cisgénero) o puede ser diferente (transgénero - TG). Un hombre TG es un individuo nacido como mujer pero que se identifica como hombre. Una mujer TG nace como hombre pero se identifica como mujer2. Se estima que, en la actualidad, hay 25 millones de personas TG en todo el mundo3, la mayoría de las cuales padecen disforia de género, una condición psicológica caracterizada por la incongruencia ....
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Protocolo
Los estudios se realizan siguiendo la Directiva 2010/63/UE, el Decreto Legislativo italiano n. 26 del 4 de marzo de 2014 y los Principios de Buenas Prácticas de Laboratorio (BPL) de la OCDE. El protocolo del estudio fue aprobado por el Ministerio de Salud italiano (autorización n.º 806/2021-PR). Aquí, se compran 16 ratas Sprague-Dawley jóvenes sexualmente maduras de ambos sexos (304 ± 13 g de ratas macho y 190 ± 7 ratas hembras, de 8-9 semanas de edad) y se alojan en dos jaulas en condiciones estándar de laboratorio (22 ± 0,5 °C, 50%-60% de humedad relativa, 12 h de alternancia de luz oscura con 12-14 cambios de aire por hora) con agu....
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Resultados
Como demostraron Tassinari et al.14 y Tammaro et al.33, los siguientes resultados mostraron el éxito de la GAHT en ratas y la idoneidad de los modelos.
No se registran muertes ni comportamientos anormales, como agresividad, y no se observan signos clínicos de toxicidad o sufrimiento (por ejemplo, disminución de la actividad, piloerección y aspecto despeinado)14.
Las concentraciones plasmáticas d.......
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Discusión
La implementación de modelos de roedores que imiten el GAHT es crucial para estudiar la posible susceptibilidad específica y vulnerabilidad de las personas TG y los resultados a largo plazo de las terapias, que suelen durar toda su vida.
Dado el escaso número de estudios similares en la literatura, el punto crítico de este experimento es la selección de las dosis para establecer los modelos; Dichas dosis deben ser lo suficientemente bajas como para ser compati.......
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Divulgaciones
Los autores declaran que la investigación se llevó a cabo sin ninguna relación comercial o financiera que pudiera crear un conflicto de intereses.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Balanza analítica ABJ 320-4NM | Kern | Z741091 | |
| Bouin | Biooptica | 05-M01008 | |
| Centrífuga 5415 R | Eppendorf | Para eppendorf | |
| Acetato de ciproterona | Sigma-Aldrich | C3412 | |
| D-MEM medio | Gibco | ||
| ExcelTaq 2X Fast Q-PCR Master Mix (SYBR, ROX), 200 RXN | Smobio | Solución de formalina TQ1210 | |
| , tamponado neutro, 10% | Sigma-Aldrich | HT501128 | |
| GraphPad Prism versión 5.0 para Windows | GraphPad Software | ||
| Hematoxylin | Biooptica | 05-06002/L | |
| Heosin | Biooptica | 05-10007/L | |
| Software de imagen | Nikon | NIS-BR | |
| Software estadístico JMP 10 | SAS Institute | ||
| Microscopía Microm | Thermo Scientific | HM 325 | |
| Nikon Microphot FX | |||
| Ratón / Rata Testosterona ELISA | Biovendor | RTC001R 96T | |
| NanoDrop 1000 Espectrofotómetro | Thermo Scientific | ND-1000 | |
| Paraffina | Biooptica | 087910 | |
| Balanzas portátiles SCOUT STX2202 | OHAUS | br/> 30253064 | |
| Primers | Life Technologies | diseñado por PrimerBlast | |
| Rat Estradiol ELISA | Biovendor | RTC009R | 96T |
| Rat TSH (hormona estimulante de la tiroides) ELISA Kit | ELK Biotechnology | ELK2283 | 96T |
| Rat TSH (hormona estimulante de la tiroides) ELK Biotechnology ELK2283 | 96T | ||
| Kit de síntesis de ADN SensiFASTcDNA | Bioline | BIO-65053 | 50 reacciones |
| Aceite de sesam | ACROS | AC241000010 | |
| ratas Sprague Dawley Envigo macho y hembra | semanas de antigüedad | ||
| Dietas estándar | Mucedola | 4RF18 | |
| T4(Tiroxina) Kit ELISA ELK | Biotechnology | ELK8716 | 96T |
| Enantato | de testosterona Sigma-Aldrich | T3006 | |
| Thermal Cycler LineGene 9600 Plus Bioer | Aurogene | ||
| Procesador de tejidos | Shandon Excelsior ES, Thermo Scientific) | ||
| KIT de purificación de ARN total | Norgen | 17200 | 50 columnas |
| Victor 3 Lector multietiqueta | Perkin Elmer | ||
| β-Estradiol 17-valerato | Sigma-Aldrich | E1631 |
Referencias
- Rokach, A., Patel, K. Human sexuality: Function, dysfunction, paraphilias, and relationships. , Academic Press. (2021).
- American Psychological Association. Guidelines for psychological practice with transgender and gender nonconforming people. Am Psychol. 70 (9), 832-864 (2015).
- Ammari, T., Sluiter, E. C., Gast, K., Kuzon, W. M.
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Reimpresiones y permisos
