El aneurisma intracraneal (AI) se construyó en ratones utilizando los factores de riesgo de hipertensión y cambios hemodinámicos. Los cambios hemodinámicos fueron inducidos por la ligadura de las ramas de la arteria carótida, mientras que la hipertensión se logró mediante la ligadura de las ramas posteriores de la arteria renal. La formación de IA se detectó mediante angiografía por resonancia magnética, microscopía estereoscópica y análisis anatomopatológico.
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Artículo de método
Un modelo murino modificado de aneurisma intracraneal basado en el cambio hemodinámico y la hipertensión
* These authors contributed equally
En este artículo
Resumen
Resumen
El aneurisma intracraneal (AI) representa un riesgo significativo para la salud debido a la morbilidad y mortalidad asociadas con la ruptura del aneurisma. Sin embargo, los mecanismos moleculares que subyacen al desarrollo de la IA siguen sin estar claros y se requiere un modelo de ratón adecuado. Se estableció un modelo murino de IA mediante la ligadura de la arteria pterigopalatina (PPA) para inducir cambios hemodinámicos aditivos, combinados con inducción de hipertensión. En ratones machos C57BL/6, se ligaron vasos, incluyendo la PPA derecha, la arteria carótida externa (ECA), la arteria occipital (OcA) y la arteria carótida común contralateral izquierda (CCA), para inducir cambios hemodinámicos. Una semana después, se ligaron las ramas posteriores bilaterales de la arteria renal (ARP) y se introdujo una dieta con sal al 8% para inducir hipertensión. Se realizó angiografía por resonancia magnética (ARM), estereomicroscopía y tinción inmunohistoquímica (IHQ) para evaluar los cambios morfológicos y patológicos en la AI tres meses después de la inducción. En el grupo experimental, cuatro ratones murieron después de la inducción inicial. Se detectó IA en diferentes localizaciones en cinco de los once ratones restantes. Tanto los exámenes microscópicos como los de ARM confirmaron la formación de IA. Los análisis anatomopatológicos y de IHQ revelaron disrupción de la lámina elástica interna, desconexión de las fibras de colágeno e infiltración de macrófagos M1 CD86 positivos, hallazgos consistentes con los observados en la AI humana. Este modelo de ratón de IA replica los cambios patológicos observados en muestras humanas y puede servir como una herramienta valiosa para investigar los mecanismos moleculares de la formación y progresión de IA.
Introducción
La prevalencia de aneurisma intracraneal (AI) se estima en 3,2% de la población general1. La AI representa un riesgo significativo para la salud debido a su alta morbilidad y mortalidad asociadas. La AI es una condición patológica compleja y multidimensional influenciada por cambios hemodinámicos, inflamación y remodelación vascular 2,3. Los cambios hemodinámicos y la hipertensión están implicados en la formación y progresión de los aneurismas 4,5. La IA ocurre frecuentemente en bifurcaciones ce....
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Protocolo
Todos los procedimientos operativos en ratones se adhirieron a los criterios del Comité de Revisión Ética y fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad Jiaotong de Shanghai. Los ratones machos C57BL/6 (8 semanas de edad, 20-25 g) se alojaron a una temperatura de 22 °C con un ciclo de luz/oscuridad de 12 h/12 h. El proceso operativo se muestra en la Figura 1A. Brevemente, en animales anestesiados, la arteria carótida común izquierda (ACC), la arteria carótida externa derecha (ECA), la arteria occipital (OcA) y la arteria pterigopalatina (PPA) fueron ligadas p....
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Resultados
Tasa de formación de IA
En el grupo experimental (n = 15), 2 ratones murieron dentro de la primera semana después del procedimiento inicial por razones desconocidas. Un ratón murió de una infección en la herida posterior al tercer día después del segundo procedimiento, y otro ratón murió el día 38 por razones desconocidas, sin que se detectaran aneurismas. En el grupo de control (n = 5), los 5 ratones sobrevivieron hasta el sacrificio. Entre los ratones supervivientes del grupo experimental (n = 11), .......
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Discusión
Este estudio presenta un enfoque modificado para la construcción de un modelo murino de IA a través de la ligadura de la PPA para inducir cambios hemodinámicos aditivos en combinación con la hipertensión. Las imágenes de resonancia magnética y el análisis microscópico demostraron cambios significativos en los aneurismas en el círculo de Willis. Las alteraciones patológicas observadas en este modelo son consistentes con las encontradas en muestras humanas. Este modelo de ratón puede servi.......
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Divulgaciones
El manuscrito ha sido leído y aprobado por todos los autores nombrados, y no hay otras personas que cumplan con los criterios de autoría pero que no estén en la lista. Los autores no tienen conflictos de intereses asociados con el manuscrito, y no ha habido apoyo financiero significativo para este trabajo que pudiera haber influido en su resultado. Los financiadores no participaron en la recopilación de datos, el análisis de datos ni la redacción de documentos. El manuscrito no ha sido publicado previamente en línea o en forma impresa, incluyendo revistas, sitios web o blogs.
Agradecimientos
Este estudio contó con el apoyo del Centro Nacional de Medicina Traslacional (Shanghai TMSK-2021-147), el Proyecto de Investigación del Hospital Renji de Shanghai (RJTJ-QT-007) y la Fundación de Ciencias Postdoctorales de China (Número de certificado: 2024M760658).
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Angiografía por resonancia magnética 7.0 T | Bruker | BioSpec 70/20 | |
| C57BL/6 ratones | Charles River Laboratories | sexo: macho | |
| anticuerpo CD86 | CST | 91882 | |
| Elástico Van Gieson (EVG)tinción | Solarbio | G1597 | |
| Masson | Solarbio | G1340 | |
| Micro pinza | Shanghai Jinzhong Instrument Company | ||
| Microfil | Flow Tech Inc. | MV-120 | |
| Máquina de anestesia para animales pequeños | Microscopio | R500 | |
| Shanghai Optical Instrument Company | XYH-6B | ||
| Sutura | Shanghai Jinhuan Medical Company | 6-0, 8-0 |
Referencias
- Vlak, M. H., Algra, A., Brandenburg, R., Rinkel, G. J. Prevalence of unruptured intracranial aneurysms, with emphasis on sex, age, comorbidity, country, and time period: A systematic review and meta-analysis. Lancet Neurol. 10 (7), 626-636 (2011).
- Turjman, A. S., Turjman, F., Edelman, E. R.
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Reimpresiones y permisos
