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Artículo de método

Identificación rápida de Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis y Ureaplasma urealyticum mediante ensayo de flujo lateral de amplificación de ARN

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DOI:

10.3791/68413

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20 de junio de 2025

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1The First People's Hospital of Foshan

En este artículo

Resumen

Aquí, presentamos un protocolo que demuestra el ensayo de flujo lateral de amplificación de ARN y evaluamos la eficacia para la detección rápida de Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis y Ureaplasmaurealyticum.

Resumen

Neisseria gonorrhoeae (NG), Chlamydia trachomatis (CT) y Ureaplasma urealyticum (UU) son patógenos comunes asociados con enfermedades de transmisión sexual (ETS). La NG es el agente causante de la gonorrea, que puede dar lugar a diversos trastornos del sistema genitourinario, como epididimitis, prostatitis, cervicitis e infertilidad. La TC es un microorganismo responsable de la uretritis no gonocócica y de la enfermedad inflamatoria pélvica. La UU se asocia con uretritis no gonocócica, cervicitis, prostatitis e infertilidad. Las tecnologías moleculares actuales para el análisis de NG, CT y UU suelen ser complejas y requieren mucho tiempo. Las pruebas moleculares rápidas para estos patógenos pueden facilitar el diagnóstico temprano de las ETS. El ensayo de flujo lateral de amplificación de ARN (RGT) es un método que no requiere extracción de ácido nucleico. En este proceso, las muestras se lisan para liberar fragmentos de ácido nucleico, que luego se amplifican a través de la transcripción inversa y la transcripción. El producto de ARN amplificado es reconocido y capturado por sondas específicas, formando un complejo de sonda de detección de ARN-sonda de oro que se puede inmovilizar en una membrana de nitrocelulosa a través de flujo lateral para producir bandas visibles. Todo el procedimiento dura menos de 1 h. El objetivo de este estudio fue evaluar la eficacia de RGT para la detección rápida de NG, CT y UU. Se incluyeron un total de 1.416 muestras. La consistencia de NG, CT y UU cuando se analizaron por RGT en comparación con el método de sondeo de fluorescencia de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) fue de 99,03% (307/310), 99,38% (159/160) y 99,02% (303/306), respectivamente. La consistencia de NG, CT y UU cuando se analizó por RGT en comparación con la secuenciación génica fue de 99,17% (238/240), 98,95% (188/190) y 98,30% (173/176), respectivamente. En comparación con el método de cultivo de aislamiento de patógenos, las tasas de detección para los ensayos NG, CT y UU fueron del 100,00% (9/9, 17/17, 8/8). La alta sensibilidad y especificidad, la facilidad de uso y los requisitos de tiempo reducidos hacen que este ensayo sea ideal para la detección rápida y precisa de NG, CT y UU.

Introducción

Las infecciones de transmisión sexual (ITS) representan importantes desafíos de salud pública mundial, ya que provocan una grave morbilidad y mortalidad genital y reproductiva1. Neisseria gonorrhoeae (NG) es el agente causal de la gonorrea, con aproximadamente 87 millones de nuevos casos reportados anualmente en todo el mundo2. Este patógeno induce principalmente inflamación al invadir el epitelio cilíndrico del tracto urogenital3. Chlamydia trachomatis (CT), otro microorganismo, es responsable de uretritis no gonocócica e infecciones pélvicas, lo que representa alrededor de 130 millones de nuevos casos cada año4. Ureaplasma urealyticum (UU), la célula autorreplicante más simple y pequeña, invade fácilmente el tejido cervical dañado y se asocia con uretritis no gonocócica, cervicitis, prostatitis e infertilidad5. Todas estas infecciones suelen ser asintomáticas tanto en pacientes femeninos como masculinos, pero pueden provocar complicaciones graves si no se tratan con prontitud. Las infecciones maternas pueden dar lugar a graves resultados adversos del embarazo, como muerte fetal, aborto espontáneo, parto prematuro e infección fetal directa6. Por lo tanto, el desarrollo de un método rápido, sensible, específico y fácil de usar para la detección de patógenos es de suma importancia.

La detección rápida y precisa de patógenos es fundamental para el diagnóstico y el tratamiento eficaces de la enfermedad. Los métodos de cultivo tradicionales, que requieren el aislamiento, el cultivo y la identificación de patógenos, tienen desventajas significativas, como que requieren mucho tiempo y tienen poca sensibilidad. Aunque la secuenciación de genes cuenta con una alta tasa de precisión, requiere un entorno y equipos complejos, lo que la hace costosa y también requiere mucho tiempo. Las tecnologías moleculares convencionales para el análisis de NG, CT y UU han sido ampliamente aceptadas; Sin embargo, estos métodos suelen ser complicados y requieren mucho tiempo, ya que requieren instrumentación sofisticada, técnicos capacitados y tiempos de procesamiento prolongados. Por lo tanto, existe una necesidad apremiante de un método de diagnóstico molecular simple y confiable para abordar las limitaciones de los enfoques convencionales. El ensayo de flujo lateral de amplificación de ARN (RGT) ofrece una alternativa rápida, sensible y específica sin necesidad de procedimientos complejos 7,8. En este método, las muestras se lisan directamente para liberar fragmentos de ácido nucleico sin extracción de ácido nucleico, y estos fragmentos se amplifican mediante transcripción inversa y transcripción. A continuación, el producto de ARN amplificado es reconocido y capturado por sondas específicas, formando un complejo de sonda de detección de ARN-sonda de oro, que puede inmovilizarse en una membrana de nitrocelulosa mediante flujo lateral para crear bandas visibles9. Todo el proceso dura menos de 1 hora, lo que lo hace muy adecuado para pruebas de laboratorio de emergencia.

En este estudio, reclutamos 1.416 muestras para evaluar el uso de RGT para la detección de NG, CT y UU. Las muestras se analizaron utilizando los métodos RGT, sondeo de fluorescencia por PCR, secuenciación de genes y cultivo de aislamiento de patógenos. Los resultados indicaron que el método RGT fue preciso y consistente con los métodos diagnósticos convencionales. En conclusión, la alta sensibilidad y especificidad, la facilidad de uso y la reducción de los requisitos de tiempo hacen que este ensayo sea ideal para la detección rápida y precisa de NG, CT y UU, lo que sugiere su prometedora aplicación en el diagnóstico médico preliminar de enfermedades de transmisión sexual.

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Protocolo

Este estudio se llevó a cabo de acuerdo con las directrices éticas y la aprobación otorgada por la Junta de Revisión Institucional del Primer Hospital Popular de Foshan, provincia de Guangdong, China (Documento de Revisión Ética No. LR (2025) 136). Se recolectaron prospectivamente 1.416 muestras de hisopos genitales (716 de pacientes femeninas, 700 de pacientes masculinos) de individuos con sospecha clínica de ETS que no se habían sometido a terapia antibiótica en los 14 días anteriores (Tabla suplementaria 1). Para cada participante, se obtuvieron hisopos pareados y se analizaron en paralelo: uno por el método de prueba (RGT) y el otro por el método de referencia (sondeo de fluorescencia por PCR, secuenciación de genes y cultivo de aislamiento de patógenos, respectivamente). La concordancia entre métodos se cuantificó mediante el coeficiente Kappa de Cohen (κ), con una interpretación guiada por los criterios de Landis y Koch.

NOTA: El protocolo de ensayo para TC y UU sigue pasos de procedimiento idénticos a los descritos para NG, con modificaciones limitadas a reactivos específicos del patógeno. Las formulaciones detalladas de los reactivos se proporcionan en el paso 2.1 (Tabla complementaria 2, Tabla complementaria 3 y Tabla complementaria 4).

1. Recogida de muestras

  1. Tipo de muestra aplicable: Recoja hisopos genitales (hisopo cervical femenino, hisopo uretral masculino).
  2. Colección de especímenes
    1. Inserte el hisopo genital en el orificio uretral masculino durante 2-3 cm o en el orificio cervical femenino durante aproximadamente 1-2 cm.
    2. Gire una vez y manténgalo presionado durante 10 s.
    3. Retire el hisopo e insértelo en el tubo de recolección que contiene 1 ml de solución salina normal.
    4. Rompa y deseche la cola del hisopo, luego apriete la tapa del tubo.
    5. Registre el tiempo de recolección y realice la prueba con prontitud.
  3. Almacenamiento y transporte de muestras
    1. Transporte las muestras a temperatura ambiente (RT) en un plazo de 4 h o a 2-8 °C con una bolsa de hielo en un plazo de 24 h.
    2. Almacene los gránulos de celda restantes de las muestras procesadas a -20 °C durante 3 meses o -80 °C durante un máximo de 6 meses si las pruebas no se pueden realizar de manera oportuna.

2. Preparación

  1. Reactivos
    1. Para el ensayo de reactivos de ácido nucleico NG, consulte la Tabla complementaria 2.
    2. Para los reactivos del ensayo de ácido nucleico CT, consulte la Tabla complementaria 3.
    3. Para el ensayo de reactivos de ácido nucleico UU, consulte la Tabla complementaria 4.
    4. Almacenamiento: Almacene todos los reactivos a temperaturas comprendidas entre -40 °C y -15 °C y las tarjetas de detección a temperaturas comprendidas entre 2 °C y 30 °C.
      NOTA: El tampón de amplificación y la solución de detección deben equilibrarse a RT antes de su uso, en función de los requisitos de detección diarios. Después de alcanzar el RT, deben almacenarse a 4 °C y pueden utilizarse para la siguiente detección. Evite congelar y descongelar repetidamente. La enzima de amplificación debe almacenarse a -20 °C, excepto durante el proceso experimental. Un aumento en la temperatura de almacenamiento puede conducir a una disminución o pérdida de la actividad enzimática.
  2. Requisitos del entorno experimental
    1. Realice el experimento en cuatro zonas físicamente separadas:
      1. Área de preparación de reactivos: Mantener a 22 ± 1 °C con presión de aire positiva (caudal de aire filtrado con aire de partículas de alta eficiencia (HEPA) ≥ 0,3 m/s). Almacene los reactivos prealículos en armarios esterilizados con UV.
      2. Área de preparación de la muestra: Realice toda la manipulación de la muestra en una cabina de seguridad biológica Clase II pretratada con etanol al 70%.
      3. Área de amplificación: Opere termocicladores sobre mesas antivibratorias.
      4. Área de análisis del producto: Utilice un banco esterilizado por UV (30 min de exposición antes/después del uso).
    2. Regule el personal y el flujo de aire en cada sección para evitar la contaminación cruzada de la siguiente manera:
      1. Mantenga el flujo de aire unidireccional desde la preparación del reactivo hasta las zonas de análisis del producto.
      2. Asegure la presión negativa en el área de preparación de la muestra (-5 Pa en relación con las zonas adyacentes).
      3. Restringir el movimiento de personal; Descontamine los guantes con etanol al 75% antes de las transiciones de zona.
      4. Instale puertas de esclusa con sistemas de enclavamiento (retardo mínimo de 30 s entre aperturas).
    3. Utilice consumibles específicos de la zona (por ejemplo, tubos de centrífuga, puntas de pipeta, etc.) y deseche los consumibles después de un solo uso.
    4. Mantener la limpieza y el control de calidad:
      1. Limpie los bancos diariamente con hipoclorito de sodio al 10% seguido de etanol al 75% o agua destilada.
      2. Validar la esterilidad de los consumibles mediante pruebas de endotoxinas (ensayo de lisado de amebocitos de Limulus, <0,25 UE/ml).
      3. Controle la calidad del aire semanalmente utilizando placas de sedimentación (agar de soja tríptico [TSA], ≤5 unidades formadoras de colonias (UFC)/placa después de 4 horas de exposición).
  3. Cualificaciones del personal
    1. Poseer certificados o titulaciones relacionadas con la tecnología PCR que garanticen la exactitud y fiabilidad de este experimento.

3. Lisar las células para extraer el ARN

  1. Procesamiento de muestras
    1. Agite el tubo de recolección de muestras a 2.600 veces/min durante 10 s para desalojar las células de la cabeza del hisopo en la solución.
    2. Transfiera 1 mL de la solución a un tubo de microcentrífuga de 1,5 mL utilizando una pipeta calibrada ajustada a 1000 μL.
    3. Centrifugar a 12.000 × g durante 2 min a 25 °C.
    4. Aspire 950 μL del sobrenadante sin alterar el pellet. Vuelva a suspender los gránulos en 25 μL de solución residual pipeteando hacia arriba y hacia abajo 10 veces con una pipeta calibrada de 200 μL ajustada a 50 μL.
  2. Lisis de muestras y materiales de control de calidad
    1. Preequilibrio del tampón de lisis celular y control negativo a 25 °C durante 15 min.
    2. Centrifugar los materiales de control de calidad a 1000 × g durante 10 s a 25 °C para asegurarse de que todos los polvos se depositen en el fondo del tubo.
    3. Añada 30 μL de tampón de lisis a los materiales de control de calidad y 20 μL a las muestras.
    4. Incubar durante 10 min a 25 °C.
      NOTA: Cuando se utiliza el tampón de lisis celular, es esencial mezclarlo bien. Mezclar pipeteando 15 veces (punta de 200 μL) y añadir tanto las partículas como el líquido al precipitado. Maneje el control positivo en una cabina de bioseguridad de Clase II tratada con rayos UV seguida de una descontaminación con hipoclorito de sodio al 10%.

4. Amplificación isotérmica de ARN

  1. Preequilibrio del tampón de amplificación
    1. Descongele el tampón de amplificación y equilibre a 25 °C ± 1 °C durante 15 min.
  2. Configuración del control
    1. Incluya tanto el control positivo como el negativo en cada ejecución experimental.
  3. Etiquetado de tubos
    1. Etiquete los tubos de amplificación de acuerdo con el número de muestras.
  4. Montaje de reacción
    1. Pipetee 17 μL de tampón de amplificación en cada tubo con una pipeta calibrada de 20 μL. Añada 2 μL de la muestra o del lisado de control directamente en la gota tampón.
      NOTA: Asegúrese de que el lisado entre en el tampón sin entrar en contacto con la pared del tubo (centrifugar brevemente a 500 × g durante 5 s si es necesario). Tape inmediatamente los tubos para evitar la contaminación por aerosoles.
  5. Activación térmica
    1. Incubar los tubos en un termociclador precalentado bajo el siguiente programa:
      Paso 1: 95 °C durante 2 min (desnaturalización)
      Paso 2: 42 °C durante 2 min (recocido de imprimación).
  6. Amplificación enzimática
    1. Agregue 1 μL de enzima de amplificación a cada tubo y mezcle moviendo el tubo 5 veces, seguido de una breve centrifugación (500 × g durante 5 s). Transfiera los tubos a un segundo termociclador precalentado a 42 °C durante 45 min inmediatamente.
      NOTA: Utilice incubadoras separadas para evitar fluctuaciones de temperatura, una configurada a 95 °C y la otra a 42 °C. Para tiradas de varias muestras, mantenga los tubos de amplificación restantes a 42 °C mientras agrega la enzima de amplificación al último tubo de amplificación.

5. Ensayo de flujo lateral

  1. Preequilibrio de la solución de detección
    1. Transfiera la solución de detección a la incubadora a 42 °C durante 10 min.
  2. Homogeneización
    1. Agite la solución de detección a 2.600 veces/min durante 15 s hasta que el color sea uniforme.
  3. Mantenimiento de la temperatura
    1. Mantenga la solución de detección a 25 °C ± 2 °C durante ≤30 minutos antes de usarla.
  4. Inicio de la reacción
    1. Añada 30 μL de solución de detección a cada tubo de amplificación utilizando una pipeta calibrada de 20-200 μL.
      NOTA: La punta de la pipeta debe entrar en contacto con la pared del tubo en un ángulo de 45° durante la dispensación para evitar la formación de burbujas.
  5. Hibridación
    1. Mezclar la solución pipeteando hacia arriba y hacia abajo 5 veces e incubar en una incubadora precalentada a 53 °C durante 10 min.
  6. Preparación del dispositivo de ensayo
    1. Retire las tarjetas de detección de las bolsas de aluminio.
      NOTA: Evite tocar la zona de aplicación de la muestra.
  7. Ejemplo de aplicación
    1. Transfiera toda la mezcla al puerto de muestra de la tarjeta de detección con una pipeta de 20-200 μL.
    2. Coloque inmediatamente la tarjeta de detección en una incubadora a 42 °C durante 15 min.

6. Análisis de resultados

  1. Entorno controlado para la lectura
    1. Mantenga las tarjetas de detección en una incubadora precalentada a 53 °C durante la interpretación visual para estabilizar la intensidad de la señal.
  2. Protocolo de interpretación visual
    1. Lea los resultados de la prueba directamente mediante la inspección visual de las bandas en las tarjetas de detección dentro de los 10-20 minutos.
      NOTA: El resultado deja de ser válido después de 20 min.
  3. Para la matriz de interpretación de los resultados de RGT, consulte la Tabla complementaria 5.
    NOTA: La interpretación visual del resultado se muestra en la Figura 1.

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Resultados

Consistencia de los métodos de sondeo de fluorescencia RGT y PCR
Se analizaron un total de 310 muestras para NG, compuesta por 161 hembras y 149 machos. La tasa de coincidencia positiva fue del 98,78% (IC95%: 93,39%-99,97%), mientras que la tasa de coincidencia negativa fue del 99,12% (IC 95%: 96,87%-99,89%). La tasa de coincidencia global fue del 99,03% (IC 95%: 97,20%-99,80%). El valor de consistencia de Kappa fue de 0,975 (IC 95%: 0,947-1,003, Z = ...

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Discusión

En este estudio, se empleó RGT para detectar patógenos de ITS, incluidos NG, CT y UU. Cuando se realizó bajo estrictos protocolos operativos, el ensayo RGT demostró una fuerte concordancia con los métodos de diagnóstico establecidos, como el sondeo de fluorescencia por PCR, la secuenciación de genes y las técnicas de cultivo de aislamiento de patógenos. La sensibilidad y especificidad del ensayo RGT fueron comparables o superiores a las de las metodologías previamente reportadas, como lo...

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Divulgaciones

Los autores no tienen conflictos de intereses que revelar.

Agradecimientos

Agradecemos a Wuhan Zhongzhi Bio-technologies Inc. por los reactivos y la orientación técnica ofrecida para este estudio.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Hipoclorito de sodio al 10% (p/v) Preparación en el laboratorio.Preparación en el laboratorio.Solución de lejía diluida para la descontaminación e inactivación de patógenos en equipos o superficies.
Etanol al 75% (v/v)Ante Food Co., Ltd (Anhui, China)http://www.antegroup.com/product_detail_cn/id/81.htmlSolución acuosa de etanol utilizada para la desinfección
de superficies Pipeta de volumen ajustable (0.5– 10 μ L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101004Micropipeta monocanal para un manejo preciso de volúmenes de escala de microlitros.
Pipeta de volumen ajustable (100– 1000 μ L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101014Pipeta monocanal calibrada para la manipulación de líquidos de gran volumen.
Pipeta de volumen ajustable (10– 100 μ L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101008Pipeta monocanal optimizada para volúmenes intermedios, comúnmente utilizada en protocolos de biología molecular.
Pipeta de volumen ajustable (20– 200 μ L)DLAB Scientific Co., Ltd.7010101009Pipeta monocanal para transferencias de volumen medio, adecuada para la alícuota precisa de reactivos.
Gabinete de bioseguridad (HF Safe-1200)HealForce Bio-Meditech Holdings Limited (Hong Kong, China)HF Safe-1200A Clase II que garantiza la protección del personal, las muestras y el medio ambiente durante la manipulación de microorganismos patógenos o cultivos celulares.
Tubos de centrífugaHaozhi Medical Devices Co., Ltd. (Guangzhou, China)Guangzhou Yuexiu Medical Device Filing No. 20210414Para extracción de ácidos nucleicos, granulación de células y otros procedimientos de laboratorio.
Ensayo de ácido nucleico de Chamydia trachomatis (CT) (amplificación de ARN-ensayo de flujo lateral)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC. (Wuhan, China)A.10.309-STD-RG-002Para la detección cualitativa de ARN de ácido nucleico de Chamydia trachomatis en muestras de hisopos genitales y del tracto urinario.
CO2 IncubadoraThermo Fisher Scientific(Asheville, EE. UU.) LLCSN:Se utiliza para el cultivo celular, proporcionando un entorno estable con temperatura controlada (37 y grados; C), la humedad y la concentración de CO2 (normalmente 5%) para garantizar un crecimiento celular óptimo.
Placa de Cultura Corning Incorporated (Corning, EE.UU.)50 mm y agudo; 9 mmPara el cultivo y la expansión de células adherentes.
Kit de detección de ácido nucleico para Chamydia trachomatis (CT) (PCR-Fluorescence Probing)Fosun Diagnostics (Shanghai, China) Co., LtdChina Certificado de registro de dispositivos médicos No. 20143402234Para la detección cualitativa de ácido nucleico de Chamydia trachomatis en muestras de hisopos genitales y del tracto urinario.
Kit de detección de ácido nucleico para Neisseria gonorrhoeae (NG) (PCR-Fluorescence Probing)Fosun Diagnostics (Shanghai, China) Co., LtdChina Certificado de registro de dispositivos médicos No. 20173401080Para la detección cualitativa de ácido nucleico de Neisseria gonorrhoeae en muestras de hisopos genitales y del tracto urinario.
Kit de detección de ácido nucleico a Ureaplasma urealyticum (UU) (PCR-Fluorescence Probing)Fosun Diagnostics (Shanghai, China) Co., LtdChina Certificado de registro de dispositivos médicos No. 20173400536Para la detección cualitativa de ácido nucleico de Ureaplasma Urealyticum en muestras de hisopos genitales y del tracto urinario.
Medio DMEMThermo Fisher Scientific Inc. (Waltham, EE. UU.)11965092Para el cultivo de Chlamydia trachomatis.
Puntas de pipeta de filtro (10 μ L)Guangzhou Surbiopure Biotechnology Co., Ltd (Guangzhou, China)TF-10-BXLPara un pipeteo preciso en los experimentos.
Puntas de pipeta de filtro (200 μ L)Guangzhou Surbiopure Biotechnology Co., Ltd (Guangzhou, China)TF-200-BXLPara un pipeteo preciso en los experimentos.
Hisopo genitalHaozhi Medical Devices Co., Ltd. (Guangzhou, China)Hz112Hisopos estériles con punta de algodón para recoger muestras clínicas de las superficies de las mucosas genitales.
Suero fetal bovino Gibco (FBS)Thermo Fisher Scientific Inc. (Waltham, EE. UU.)10270106Para el cultivo de Chlamydia trachomatis.
Portaobjetos de vidrioHaozhi Medical Devices Co., Ltd. (Guangzhou, China)Guangzhou Yuexiu Medical Device Filing No. 20210414Portaobjetos de vidrio estándar con tratamiento antidecoloración para la preparación de frotis celulares o secciones de tejido, compatibles con los protocolos de tinción de Gram.
Kit de síntesis de ADNc Goldenstar RT6 Ver2Beijing Tsingke Biotech Co., Ltd (Beijing, China)TSK302SPara la síntesis de la primera hebra de ADNc en el primer paso de la RT-PCR de dos pasos. Contiene todos los reactivos necesarios para la síntesis de ADNc a partir de ARN.
Kit de tinción de GramBaso Diagnostics,Inc. (Zhuhai, China)BA4012Un kit de tinción que contiene violeta cristalino, yodo, decolorante y safranina para diferenciar Neisseria Gonorrhoeae.
IBM SPSS Statistics (V25.0)International Business Machines Corporation (Nueva York, EE. UU.)Versión 25.0Para el análisis de datos.
Esterilizador de infrarrojosHuaxixinrui (Qingdao) Analytical Instruments Co., Ltd.MJ-200WPara la descontaminación instantánea de asas o pinzas de inoculación, minimizando la contaminación cruzada en cabinas de bioseguridad.
Circuito de inoculaciónBKMAM Biotechnology Co., Ltd. (Hunan, China)110306002Para la transferencia, el rayado o la inoculación de muestras microbianas.
Microscopio invertido (IX-51)Olympus Corporation (Tokio, Japón)Código de Activos del Trabajo:  71807101Para observar las células adherentes o la dinámica de células vivas en placas de cultivo.
Sistema automatizado de espectrometría de masas microbianas MALDI BiotyperBruker Daltonics GmbH & Co. KG (Bremen, Alemania)Registro Nacional de Importación de Dispositivos Médicos Nº 20182222017Un sistema basado en espectrometría de masas MALDI-TOF para la identificación rápida de microbios mediante perfiles de proteínas, que permite la identificación de especies de bacterias y hongos en laboratorios de microbiología clínica.
Líneas celulares de McCoyconservadas en el laboratorio.Conservado en el laboratorio.Para el cultivo de Chlamydia trachomatis.
Incubadora termostática de microplacas Leopard70-4 (capacidad de 4 placas)Leaptec Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd.Leopard70-4Una incubadora de microplacas con capacidad para hasta 4 microplacas estándar, con un rango de temperatura de ambiente a 70 grados; C,  utilizado para las etapas de incubación.
Microscopio (OLYMPUS CX43)Olympus Corporation (Tokio, Japón)https://lifescience.evidentscientific.com.cn/zh/microscopes/upright/cx43-33/Para la observación de muestras clínicas (p. ej., morfología celular, muestras teñidas).
Mini baño de metal MiniG-R100Leaptec Scientific Instruments (Pekín) Co., Ltd.MiniG-R100Para una regulación rápida de la temperatura durante el experimento, como el calentamiento, la incubación o la terminación de reacciones en muestras de pequeño volumen.
Ensayo de ácido nucleico de Neisseria gonorrhoeae (NG) (amplificación de ARN-ensayo de flujo lateral)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC. (Wuhan, China)A.10.309-STD-RG-001Para la detección cualitativa de ARN de ácido nucleico de Neisseria gonorrhoeae en muestras de hisopos genitales y del tracto urinario.
Reactivo de extracción de ácidos nucleicosWuhan Zhongzhi Biotechnologies INC. (Wuhan, China)A.10.105-SC-001Para la extracción, enriquecimiento y purificación de ácidos nucleicos.
Medio de transporte de muestrasQIAGEN N.V. (Venlo, Países Bajos)5128-1220Este medio está específicamente formulado para la recolección, conservación y transporte de muestras clínicas, lo que garantiza la viabilidad de Chlamydia trachomatis  y  Neisseria gonorrhoeae  para las pruebas diagnósticas posteriores.
Centrífuga termostáticaBeckman Coulter, Inc. (Brea, EE. UU.)SN: MRZ21L037Para la granulación de células, microbianos o ácidos nucleicos.
TM medioShanghai Yihua Ciencia Médica & Technology Co., Ltd (Shanghai, China)Shanghai Pu Medical Device Filing No. 20140081El medio TM se puede utilizar para el aislamiento, cultivo e identificación de Neisseria gonorrhoeae a partir de muestras clínicas para ayudar en el diagnóstico de gonorrea.
Tripsina-EDTA (0,25%)Thermo Fisher Scientific Inc. (Waltham, EE. UU.)25200072Para la disociación suave de las células adherentes durante el subcultivo o los procedimientos experimentales.
Ensayo de ácido nucleico de Ureaplasma urealyticum (UU) (amplificación de ARN-ensayo de flujo lateral)Wuhan Zhongzhi Biotechnologies INC. (Wuhan, China)A.10.309-STD-RG-003Para la detección cualitativa de ARN de ácido nucleico de Ureaplasma Urealyticum en muestras de hisopos del tracto genital y urinario.
Ureaplasma urealyticum y Mycoplasma hominis Kit de cultivo de aislamiento selectivo, identificación y sensibilidad a medicamentosHebei Zhongaisheng Biotechnology Co., Ltd.(Hebei, China)Registro de dispositivo médico de Hebei No. 20152400168Para el aislamiento selectivo, cultivo, identificación y determinación de la sensibilidad a los medicamentos de Ureaplasma urealyticum y Mycoplasma hominis.
Mezclador de vórticeXinkang Medical Instrument Co. Ltd (Jiangsu, China)XK80-A Dispositivo delaboratorio para homogeneizar muestras líquidas por agitación rápida.
Gabinete de bioseguridad 300504406

Referencias

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