Este estudio presenta un método para evaluar la función de PAK5 en el ESCC, mostrando que su sobreexpresión predice un pronóstico negativo y promueve la progresión tumoral a través del eje de señalización PAK5-GAREM1.
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Artículo de investigación
Este estudio presenta un método para evaluar la función de PAK5 en el ESCC, mostrando que su sobreexpresión predice un pronóstico negativo y promueve la progresión tumoral a través del eje de señalización PAK5-GAREM1.
El carcinoma escamoso esofágico (ESCC) es una de las principales causas de mortalidad relacionada con el cáncer a nivel mundial, especialmente en Asia. Debido a la falta de síntomas tempranos, la mayoría de los pacientes son diagnosticados en fases avanzadas, lo que limita la eficacia del tratamiento y empeora el pronóstico. Comprender los mecanismos subyacentes a la ESCC e identificar biomarcadores o dianas terapéuticas son fundamentales para mejorar los resultados en los pacientes. La proteína quinasa 5 activada por P21 (PAK5), miembro de la familia de las proteínas quinasas activadas por mitógenos, ha sido implicada en diversas malignidades al regular el ciclo celular, la migración y la invasión. Sin embargo, su papel en el ESCC sigue sin estar claro. Este estudio evaluó la expresión de PAK5 en tejidos ESCC y tejidos normales adyacentes utilizando inmunohistoquímica y realizó un análisis de supervivencia de Kaplan-Meier para evaluar la asociación entre PAK5 y el pronóstico. Se establecieron modelos celulares ESCC con sobreexpresión y knockdown de PAK5, y se realizaron ensayos funcionales, incluyendo CCK-8, formación de colonias y ensayos Transwell. Además, se realizó la secuenciación de ARNm para identificar objetivos posteriores y vías de señalización reguladas por PAK5. Estos resultados mostraron que la expresión de PAK5 estaba significativamente elevada en los tejidos ESCC en comparación con los tejidos normales y se asociaba con un pronóstico pobre. Los ensayos funcionales revelaron que PAK5 promovía la proliferación celular de ESCC, la formación, migración e invasión, mientras que el análisis transcriptómico destacó GAREM1 como un efector clave aguas abajo. Estos hallazgos indican que PAK5 contribuye a la progresión de la CCE y puede servir como biomarcador pronóstico y objetivo terapéutico.
A nivel mundial, el cáncer de esófago está entre las malignidades más letales. En China, el carcinoma escamoso esofágico (ESCC) representa el subtipo histológico predominante. Aunque se han logrado avances terapéuticos, el pronóstico para los pacientes con ESCC sigue siendo desalentador, manifestándose comouna tasa de supervivencia a 5 años de apenas un 10% a 25%. Esto se debe en gran parte a los desafíos de la detección precoz y a la limitada disponibilidad de terapias moleculareseficaces 2. A diferencia de otros tumores sólidos donde las terapias dirigidas han mostrado un gran potencia....
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Todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité de Ética del Segundo Hospital Afiliado de la Universidad Médica de Hainan (Aprobación nº LW2022602), y se obtuvo el consentimiento informado de cada participante conforme a la Declaración de Helsinki. Los reactivos y el equipo utilizado en este estudio se enumeran en la Tabla de Materiales.
1. Recogida de muestras de pacientes y tejidos
Se incluyeron un total de 40 pacientes con CCE patológicamente confirmada, todos con función hepática y renal normal antes de la cirugía. Se recogieron muestra....
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PAK5 se expresa fuertemente en la ESCC y se asocia con un pronóstico negativo
La Figura 1 ilustra el flujo de trabajo global, desde la validación clínica de PAK5 hasta el análisis funcional y transcriptómico, que identifica GAREM1 como objetivo aguas abajo. Para probar la hipótesis de que PAK5 promueve la progresión de las ESCC modulando la vía MAPK a través de GAREM1, se examinaron los patrones de expresión de PAK5 en los tejid.......
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Este estudio ofrece un examen en profundidad del papel de PAK5 en la progresión del carcinoma escamoso esofágico (ESCC) mediante la combinación de muestras clínicas, ensayos funcionales y análisis transcriptómico. Estos hallazgos amplían la comprensión de la implicación de PAK5 en el ESCC, destacando su potencial tanto como marcador pronóstico como objetivo terapéutico.
La marcada sobreexpresión de PAK5 en tejidos ESCC y su asociación con una menor supervivenc.......
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Los autores declaran que no tienen intereses financieros en competencia ni relaciones personales que pudieran haber influido en el trabajo reportado en este artículo.
Este trabajo fue apoyado por la Fundación Provincial de Ciencias Naturales de Hainan de China (Subvención nº 822QN474).
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| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Kit de detección de apoptosis Annexin V-FITC | Beyotime Biotecnología | C1062S | Kit de tinción para detección de apoptosis |
| Anticuerpo anti-PAK5 | Abcam | AB110069 | Anticuerpo primario para IHC, dilución 1:100 |
| Sistema automatizado de electroforesis | Agilent | Bioanalizador 2100 | Evaluación de la integridad del ARN |
| Kit de síntesis de ADNcDNA | Invitrogen | 1896649 | Kit de transcripción inversa |
| Solución violeta cristalina | Sigma-Aldrich | C3886 | Tinte para colonias e invasiones |
| Medio DMEM | Gibco (Thermo Fisher) | 11965092 | Medio de cultivo celular |
| Suero fetal bovino (FBS) | Gibco (Thermo Fisher) | 16000044 | Suplemento de cultivo celular |
| Citómetro de flujo | BD Biociencias | FACSCanto II | Instrumento para el análisis celular |
| GraphPad Prism | GraphPad Software | Versión 8 | Software de análisis estadístico y gráficos |
| H& Kit de tinción E | Solarbio | G1120 | Solución de tinción de hematoxilina y eosina |
| IgG Anti-Rat conjugado con HRP | Abcam | ab150165 | Anticuerpo secundario para la IHC |
| Secuenciador Illumina NovaSeq | Illumina | NovaSeq 6000 | Plataforma de secuenciación de alto rendimiento |
| Línea celular KYSE-150 | Banco de Células RIKEN | RCB2057 | Línea celular de carcinoma escamoso esofágico humano |
| Lipofectamina 3000 | ThermoFisher | L3000008 | Reactivo de transfección |
| Lector de microplacas | Instrumentos Bio-Tek | ELx808 | Instrumento de medición de absorbancia |
| DynabeadTM Oligo(dT)25s | Thermo Fisher Scientific | 61005 | Para la purificación de ARNm |
| Penicilina-estreptomicina | Gibco (Thermo Fisher) | 15140122 | Antibióticos para el cultivo celular |
| Yoduro de propidio (PI) | Sigma-Aldrich | P4864 | Tinte de ADN |
| RPMI-1640 Medium | Gibco (Thermo Fisher) | 11875093 | Medio de cultivo celular |
| Espectrofotómetro | Thermo Fisher | NanoDrop ND-1000 | Medición de concentración y pureza de ARN |
| Software SPSS | IBM | Versión 23 | Software de análisis estadístico |
| Insertos Transwell | Corning | 3422 | Insertos de ensayo de invasión celular |
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