Dispositivos microfluídicos impresos en 3D de bajo coste para prototipado rápido y aplicaciones biológicas

Resumen

Hemos desarrollado un dispositivo microfluídico impreso en 3D de bajo coste y un software de código abierto basado en Python que puede generar gradientes de concentración programables. Hemos validado esta plataforma personalizable mediante osmometría y análisis colorimétrico, permitiendo estudios de exposición osmótica reproducible y ensayos biomédicos con materiales por debajo de 5 dólares y impresión 3D de consumo propio.

Resumen

Los dispositivos microfluídicos ofrecen un control preciso sobre la mezcla de soluciones y la generación de gradientes, esenciales para ensayos celulares en criobiología e investigación biomédica. Sin embargo, los métodos tradicionales de fabricación son costosos, tardados, y requieren conocimientos especializados, lo que limita su accesibilidad. Para abordar estos desafíos, desarrollamos un flujo de trabajo de dispositivo microfluídico rentable, fiable y totalmente impreso en 3D para facilitar prototipos rápidos y económicos utilizando una impresora de consumo y resinas plásticas biocompatibles. Aquí demostramos este flujo de trabajo con un dispositivo de mezcla fluídica capaz de generar gradientes de concentración programables y combinaciones de soluciones. Los dispositivos de mezcla comerciales cuestan más de 300 dólares cada uno y no pueden personalizarse. Utilizando materiales de resina asequibles y un diseño innovador de canal abierto sellado con cinta adhesiva transparente, superamos problemas comunes de fabricación como el bloqueo de canales, lo que permitió la fabricación rápida y reproducible de arquitecturas microfluídicas complejas, todo ello a un coste de materiales inferior a 5 dólares. Aquí demostramos este flujo de trabajo, integrando bombas de jeringuilla dual para crear gradientes osmóticos lineales, que van desde condiciones isoosmóticas (~300 mOsm/kg) hasta hiperosmóticas (~9.000 mOsm/kg), seguidas de un retorno a la isotonicidad en intervalos definidos. Para garantizar la automatización y la reproducibilidad, desarrollamos una herramienta de software de código abierto basada en Python que regula con precisión la activación de la bomba de jeringuillas, los caudales y el tiempo de gradiente. El rendimiento del dispositivo se validó mediante mediciones osmométricas continuas, que confirmaron tanto la linealidad y precisión de la generación de gradientes, como mediciones colorimétricas para confirmar la eficacia de la mezcla. Esta plataforma microfluídica accesible y rentable mejora significativamente la reproducibilidad de los estudios de exposición osmótica y muestra potencial para diversas aplicaciones biomédicas, incluyendo el cribado de fármacos y la modulación química precisa.

Introducción

Los dispositivos microfluídicos se han vuelto esenciales para controlar concentraciones y entornos químicos en ensayos celulares, estudios de estrés osmótico y experimentos de administración de fármacos en investigación biomédica, criobiología y otras aplicaciones^{diagnósticas 1,2}. Estos dispositivos permiten el control preciso del flujo y la concentración de fluidos a escala micrométrica. Por ejemplo, se han utilizado dispositivos microfluídicos para la adición y eliminación de agentes crioprotectores durante la criopreservación celular para prevenir daños^{osmóticos 3}. De manera similar, estos dispositivos microfluídicos también se utilizan para establecer diluciones en serie de antibióticos para probar la susceptibilidad antimicrobiana contra organismos^{resistentes 4}. Esto permite identificar combinaciones óptimas de fármacos para tratar infecciones antimicrobianas resistentes (RAM). Además, permite la obtención de imágenes y monitorización de células vivas, reduce el consumo de reactivos y facilita la precisión en los gradientes de concentración, en contraste con técnicas macroscópicas, como la cámara de Boyden, que proporcionan gradientes más gruesos y estáticos sin monitorización celular en tiempo^{real 1,5}. Estas capacidades permiten imitar ambientes químicos in vivo in vitro para estudios de alta resolución sobre comportamiento celular, migración celular, ensayos de invasión celular, respuesta a fármacos y pruebas de toxicidad.

A pesar de las ventajas de los dispositivos microfluídicos, las técnicas tradicionales de microfabricación para estos dispositivos (por ejemplo, la fotolitografía y el moldeo de polidimetilsiloxano (PDMS)) suelen ser costosas, costosas y requieren equipos y experiencia^{especializadas 6}. Por lo tanto, crear un nuevo dispositivo mediante litografía suave puede requerir días de trabajo, y los cambios iterativos en el diseño también requieren mucho^{trabajo 6}. Recientemente, la impresión 3D se ha convertido en una alternativa de prototipado rápido para superar estas limitaciones. Sin embargo, la adopción temprana de la microfluídica impresa en 3D estuvo limitada por el coste de las impresoras de alta resolución (a menudo ≥ 10.000 dólares), y las unidades económicas no proporcionan suficiente^{resolución 7}. La mejora en la estereolitografía basada en LCD de bajo coste ha avanzado significativamente en este campo, ya que las impresoras de consumo (a menudo ~$150-$500) ahora ofrecen resolución a microescala (~20-50 μm), suficiente para muchas aplicaciones^{microfluídicas 5}. Teniendo en cuenta estos avances, el objetivo general de nuestro trabajo fue establecer un flujo de trabajo rentable y eficiente para dispositivos microfluídicos totalmente impresos en 3D que puedan generar gradientes de concentración controlados sin las barreras típicas de la complejidad^{de fabricación 8}. Nuestro objetivo era desarrollar un método rápido y fiable para producir sistemas de modelos microfluídicos personalizados aprovechando una impresora LCD 3D de consumo y resina biocompatible, haciéndolos accesibles a una amplia gama de laboratorios.

Aquí presentamos un dispositivo microfluídico impreso en 3D capaz de mezclar soluciones, generar gradientes de concentración continuos y programables, y formar combinaciones de soluciones y gradientes de concentración programables. El dispositivo se fabrica mediante estereolitografía de escritorio y se ensambla completamente, utilizando un diseño de canal abierto completamente sellado con una película adhesiva transparente que obstruye el canal inducida por resina; es un desafío ampliamente informado en estereolitografía microfluídica ^9,10; sin embargo, este enfoque desarrolla un dispositivo microfluídico robusto y a prueba de fugas sin requerir equipos especializados de tratamiento superficial o unión, y supera el problema común de la resina sin curar que obstruye los pequeños canales durante la^{impresión 11}. Además, utilizando resinas baratas y curables por UV, cada dispositivo puede producirse rápidamente por solo unos pocos euros en materiales. Otra ventaja es que su diseño no es fijo; puede modificarse y reimprimirse fácilmente, a diferencia de los dispositivos comerciales que cuestan cientos de dólares cada uno y no pueden^{personalizarse 12, 13 y 14}.

Para controlar la concentración de la solución, el dispositivo impreso en 3D se integró con bombas de jeringuilla dobles (una para cada solución de entrada) controladas por un script Python de código abierto, como se describió previamente para aplicaciones^{microfluídicas 15}. Esto permite regular con precisión los caudales, los escalones de gradiente y el tiempo de forma automatizada. ¹⁵ Caudales en nuestro sistema suelen oscilar entre unos pocos microlitros y 30 μl/min por entrada, dentro de los cuales se logró una mezcla uniforme de forma consistente, manteniendo un esfuerzo cortante mínimo. Utilizando este sistema, generamos perfiles lineales de concentración que abarcan desde condiciones aproximadamente iso-osmóticas (~300 mOsm/kg) hasta condiciones hiperosmóticas extremas (~9.000 mOsm/kg) y de nuevo a isotónicas, en intervalos de tiempo definidos. Las lecturas continuas del osmómetro confirmaron que los gradientes generados eran lineales y precisos, y un simple ensayo colorimétrico verificó la mezcla eficiente de las soluciones de entrada. Estos resultados validan que gradientes de concentración complejos y variables en el tiempo pueden lograrse de forma reproducible con nuestra plataforma totalmente impresa en 3D, destacando su potencial para mejorar el rendimiento y la estandarización de los estudios de exposición osmótica a una fracción del coste habitual.

Esta plataforma microfluídica impresa en 3D demuestra los recientes avances hacia soluciones "lab-on-a-chip" que proporcionan una resolución suficiente para muchas aplicaciones microfluídicas basadas en células ^16,17. Además, los expertos predicen que la fabricación aditiva se espera que se convierta en un método líder para la fabricación de microdispositivos a medida que persistan los avances en la tecnología y los materiales de^{impresoras 6}. Una ventaja clave de nuestro enfoque es que la accesibilidad no se perjudica con el rendimiento. En consonancia con estudios previos que demostraron estrategias de fabricación microfluida de bajo^{coste 18,19}, estas impresoras asequibles producen características de dispositivo comparables a muchas de los sistemas industriales comerciales en términos de fiabilidad y precisión 7. Por tanto, los investigadores pueden adoptar este método con la confianza de que cumplirá con los requisitos de precisión de la mayoría de las aplicaciones. Esta plataforma puede adaptarse a una variedad de necesidades, desde la automatización de la adición y eliminación de crioprotectores en varios pasos, hasta el cribado de respuestas a fármacos a distintos rangos de concentraciones y la entrega de modulación química precisa en modelos órgano-on-chip¹⁶. En particular, los tamaños de resolución impresa (alrededor de 100 μm de canal) son suficientes para muchos ensayos biológicos¹⁶, proporcionando un buen rango para escalas típicas de longitud de células o partículas. En resumen, al reducir significativamente el tiempo de fabricación, el coste y los requisitos de experiencia, esta plataforma microfluídica totalmente impresa en 3D permite a los investigadores prototipar e implementar soluciones microfluídicas personalizadas de forma eficiente. Aunque siguen siendo necesarios pasos manuales de postprocesado como el pulido superficial y el sellado con cinta adhesiva, el flujo de trabajo global sigue siendo accesible y ahorra tiempo en comparación con los métodos convencionales de microfabricación.

Protocolo

1. Diseño del portaobjetos de mezcla microfluídica

1. Utilizando un software CAD adecuado (por ejemplo, AutoCAD 3D o TinkerCAD, AutoDesk, Inc), diseña un microcanal serpenteante con entradas de dos canales y una unión en forma de Y de mezcla, seguido de una vía para facilitar una mezcla eficaz y proporcionar una longitud de canal adecuada para la difusión. Combina los elementos del canal en una sola región.
2. Crea una corredera rectangular (85 mm x 28 mm x 3 mm) para servir de base de sustrato. Luego, se resta el microcanal serpentino previamente diseñado de la superficie superior de la lámina para formar una estructura de canal abierto con la profundidad y anchura adecuadas.
3. Crea cada puerto roscado de conector (1/4"-28 UNF) para tubos de diámetro exterior de 1/16" como característica separada y fusionarlo con el cuerpo de la corredera, asegurando que la rosca interna UNF coincida con los conectores con precisión.

2. Preparación del diseño para la impresión

1. Para prepararse para el proceso de impresión 3D, importa los archivos STL de ensamblaje microfluídico diseñado en el diseño de diapositivas a software de corte de código abierto, como CHITUBOX Basic v2.3.1 (Shenzhen CBD Technology Co. Ltd, China).
2. Carga configuración predefinida específica de impresora y ajustes de perfiles de resina (Phrozen_Sonic_Mini_8K_Power_Resin_SG_00.cfgx) en el software de corte. Importa el archivo completo de configuración de impresora y resina desde el repositorio GitHub correspondiente a través de: Configuración de cortes > Configuración de importación.
   NOTA: Una guía completa sobre impresión en resina 3D está fuera del alcance de este trabajo; sin embargo, la mayoría de los fabricantes de impresoras 3D ofrecen guías sobre cómo ajustar la configuración de resina y posicionar las impresiones para tener éxito, es decir, https://phrozen3d.com/blogs/tutorials/resin-print-failures.
3. Ajusta la orientación del modelo a unos 45-50° respecto a la placa de imposición (46,67° usado aquí), para obtener los mejores resultados de impresión. Esta posición evita problemas de succión durante la impresión y mantiene los pequeños canales y agujeros despejados.
   NOTA: Una vez importada la lámina de mezcla STL, la diapositiva se coloca plana sobre la superficie de impresión. La orientación del deslizamiento debe rotarse para permitir que la resina drene y minimizar el riesgo de diferencias de presión que pueden causar la formación de elementos huecos contra una superficie plana.
4. Añade el soporte estructural para la corredera usando la función de soporte automático en el software de corte. Asegúrate de que el canal esté orientado hacia otro lado del cabezal de impresión visible en la ventana principal de Chitubox. Luego, aumenta la distancia entre la diapositiva y la placa de impresión a 5 mm usando el botón de traducción y el menú que se encuentran en el lado izquierdo de la pantalla principal de Chitubox. Este hueco permitirá la construcción de estructuras de soporte y una balsa de soporte para la parte con la parte de la presa de agua.
5. Luego, añadir los soportes adicionales manualmente, aumentando la densidad de las piezas de soporte en el punto más cercano al cabezal de impresión y añadiendo soportes a ambos lados de la corredera para asegurar que la pieza permanezca en posición estática mientras se eleva a través de la resina viscosa.
6. Revisa cuidadosamente los soportes generados automáticamente y añade soportes adicionales manualmente según sea necesario para mejorar la estabilidad, especialmente en características complejas como bordes y canales.
7. Corta el modelo y examina cuidadosamente cada capa, asegurándote de que no haya huecos visibles entre los cortes.
8. Haz clic en el botón de detección de islas a través de: Slice > Detección de islas para encontrar regiones no compatibles que pueden causar errores de impresión. Si se detectan regiones aisladas, se repite el proceso de corte.
9. Una vez que el modelo supera la inspección de la isla sin detectar áreas aisladas, guarda el archivo del modelo preparado como un archivo ".ctb" en una memoria USB, dejándolo listo para la impresión 3D.
   NOTA: Los ajustes de resina fueron importados por recomendación del fabricante y probados usando el modelo XP Finder proporcionado por el fabricante, y pueden encontrarse en https://phrozen3d.com/pages/phrozens-xp-finder-and-rp-tester-test-model-download-and-tutorials. Dado que los ajustes pueden variar según las condiciones ambientales del laboratorio y entre impresoras, es importante probar estos ajustes y, en algunos casos, realizar ajustes para tener en cuenta las condiciones dentro del laboratorio. Un archivo completo de configuración para la impresora y la resina se puede encontrar en el repositorio de GitHub que acompaña a este texto, junto con todo el código y cualquier archivo .stl mencionado. Ten en cuenta que también pueden producirse encogimiento y deformaciones durante la impresión. Esto puede compensarse en cierta medida ajustando tanto la configuración de la resina, el ángulo de impresión y la distribución de los postes de soporte para ajustarlos a las condiciones ambientales del laboratorio. Obsérvese que la transparencia del deslizamiento se ve muy afectada por el ángulo en el que se forman las capas; sin embargo, dado que esta diapositiva solo se utiliza para mezclar, no para imagen, esto solo era una preocupación para asegurar una claridad suficiente para la colorimetría de la mezcla. Esto se conseguía asegurando que la parte inferior de la lámina estuviera entre 20 y 60 grados respecto a la placa de impresión. En este caso se utilizó el ángulo de 46,67 grados, ya que este ángulo proporcionaba un alto grado de claridad óptica basado en la alineación de las capas, sin ser tan pronunciado como para resultar en características no soportadas durante el proceso de impresión, como se verifica con el botón Chitubox de comprobación de islas , que se encuentra en la pantalla de corte que aparece tras hacer clic en el botón de corte .

3. Impresión y posprocesamiento

1. Selecciona el archivo .ctb correspondiente al conjunto de la corredera microfluídica y el conector e inicia el trabajo de impresión.
   PRECAUCIÓN: Aunque las impresoras 3D de resina para consumidores están pensadas para su uso en entornos domésticos, los materiales de resina pueden emitir compuestos orgánicos volátiles (COV) potencialmente peligrosos. Por ello, se recomienda operar la impresora 3D dentro de una campana extractora química o en una zona con ventilación adecuada.
2. Supervisa periódicamente el proceso de impresión. Una impresión típica de este diseño tarda unas 3-4 horas, dependiendo de las propiedades de la resina y la velocidad de la impresora.
3. Después de imprimir, retira cuidadosamente el dispositivo impreso de la placa de construcción usando un raspador de plástico y rocía inmediatamente el modelo impreso con etanol al 90% para eliminar la resina sin curar.
   PRECAUCIÓN: La resina sin curar puede causar quemaduras químicas graves. Asegúrese de llevar el equipo de protección individual (EPI) adecuado, incluidos guantes, bata de laboratorio y gafas, mientras manipula los dispositivos hasta que estén completamente curados y limpios. El etanol utilizado para lavar muestras impresas debe manipularse en un lugar bien ventilado. Asegúrate de llevar EPI, incluidos guantes y protección ocular.
4. Mientras la impresión sigue blanda, verifica que todos los pequeños agujeros, canales y áreas roscadas estén despejados y sean accesibles. Si es necesario, utiliza suavemente herramientas pequeñas, como la punta de una pipeta o una aguja de calibre fino, para despejar cualquier zona parcialmente obstruida u obstruida. Utiliza aire comprimido o una jeringuilla llena de etanol para limpiar los canales y confirmar la permeabilidad.
5. Sumerge completamente el modelo impreso en etanol al 99% durante 2-3 minutos, disolviendo la resina residual sin curar y asegurando una limpieza exhaustiva de todos los microcanales y rendijas.
6. Coloca la impresión limpia en una cámara de curado UV. Expone cada lado de la lámina impresa de forma uniforme a la luz ultravioleta durante aproximadamente 30 segundos por lado. La exposición uniforme evita deformaciones y garantiza la estabilidad dimensional.
   PRECAUCIÓN: Siempre usa gafas de seguridad con protección UV durante los procedimientos de curado UV para prevenir daños oculares.
   NOTA: La caja de curado contiene una lámpara de alta intensidad de 405 nm. Como la pieza es mayormente transparente y la lámpara se sostiene a 10 cm por encima de la pieza, el curado ocurre rápidamente. Experimentar con diferentes duraciones de exposición de lámpara ha demostrado que 6 s de tiempo de lámpara, seguidos de 3 s con la pieza girada, son efectivos. El fabricante recomienda curar con una estación de curado medicure ajustada para 30 minutos y minutos en blanco, respectivamente.
7. Tras el curado, sumerge brevemente o enjuaga la impresión en etanol y luego colócala en una bolsa Ziplock sellada que contenga etanol para evitar el secado y el posterior endurecimiento de resina en zonas no deseadas.
8. Coloca la bolsa sellada con etanol y el modelo curado en un limpiador ultrasónico. Sonica durante 180 s para eliminar eficazmente cualquier resina residual sin curar o contaminantes.
   NOTA: Alternativamente, se pueden utilizar estaciones comerciales de lavado y curado para estandarizar el postprocesamiento en laboratorios.
9. Tras la sonicación, enjuaga bien el dispositivo impreso con agua destilada.
10. Realiza un último paso de limpieza rociando y sumergiendo el dispositivo de nuevo en etanol al 90%. Si es necesario, repite la limpieza ultrasónica durante 180 segundos adicionales para asegurar una limpieza completa.
11. Tras el post-curado, pule cuidadosamente la superficie de la pieza con papel de lija de grano 440. Poscurar los conectores roscados que se insertarán en la lámina de mezcla usando el mismo proceso, con la salvedad de que 3 conectores se imprimen, lavan y curan simultáneamente colocandolos uno junto al otro en la impresora, en la caja de post-curado y dentro de los ziplocks que contienen etanol. Enjuaga una vez más con agua destilada y deja secar al aire o sécala suavemente con aire comprimido para eliminar cualquier agua restante.
    NOTA: Las imágenes paso a paso del proceso de impresión se muestran en la Figura Suplementaria 1.

4. Pulido superficial y sellado del canal microfluídico

1. Para lograr una suavidad y una visualización clara y buen sellado, utiliza una piedra de vidrio para pulir la superficie de la lámina microfluídica.
2. Primero, utiliza una piedra de vidrio de 2,45 micras (6.000 mallas) (rango de grano ~1,5-2,3 μm) para pulir la superficie superior hasta que quede uniformemente lisa. Luego, mejora aún más el acabado superficial puliendo con una piedra más fina de 0,92 micras (16.000 mallas) (rango de grano ~0,76-1,5 μm). Esto asegurará un acabado aún más suave (Figura suplementaria 2).
3. Sella el microcanal con un parche impermeable transparente y sella la cinta. Asegúrese de que la cinta cubra completamente toda la zona del canal, manteniendo los orificios y puertos de los conectores sin obstrucciones (véase la Figura 1).
4. Primero, aplica la cinta por un lado del deslizador y luego presiona suavemente pero con firmeza con el pulgar para asegurar una adherencia uniforme y eliminar las burbujas de aire.
5. Utiliza tijeras afiladas o un cuchillo para recortar el exceso de cinta de los bordes de la corredera, asegurando que el conector esté bien cortado y siga funcionando.
6. Hornea el portaobjetos con cinta a 60 °C durante 30 minutos para mejorar la resistencia de la unión.
7. Después de enfriar, aplica gel superpegamento para asegurar los conectores al borde de la corredera. Aplica una presión suave en cada conector mientras el pegamento se endurece para asegurar una alineación correcta, facilitando conexiones fiables de los tubos para el manejo de fluidos.
   NOTA: La imagen representativa del dispositivo impreso que muestra suficiente transparencia óptica se muestra en la Figura Suplementaria 3.

5. Montaje y pruebas de flujo de fluidos

1. Cargar las soluciones de prueba deseadas en dos jeringuillas separadas (etiquetadas como Jeringa A y Jeringa B; Figura 1). Para la generación de gradientes, se utilizan dos soluciones: (i) una solución isosmótica compuesta por solución salina tamponada con fosfato (PBS), y (ii) una solución hiperosmótica compuesta por un 40% (v/v) de dimetilsulfóxido (DMSO) con 1,2 M cloruro de sodio (NaCl) preparado en PBS.
   NOTA: El dispositivo creó gradientes lineales de concentración que iban desde aproximadamente iso-osmóticos (~300 mOsm/kg) hasta condiciones hiperosmóticas extremas (~9.000 mOsm/kg) y de nuevo a isotónicos, a lo largo de intervalos de tiempo definidos.
2. Utiliza jeringuillas de vidrio de precisión herméticas para un control preciso del flujo de fluidos y una regulación de presión. Coloca jeringuillas en la corredera usando conexiones de 1/4"-28, férulas y tubo de 1/16" de diámetro exterior (OD).
3. Después de fijar firmemente las jeringuillas y el tubo al dispositivo microfluídico, monta las jeringuillas en bombas de jeringuilla de precisión programables.
4. Conecta ambas bombas de jeringuilla (Bomba A y Bomba B) entre sí usando el cable de red proporcionado, asegurando un funcionamiento sincronizado.
5. Conecta la bomba A a un ordenador con un cable RS232 conectado al puerto serie del ordenador.
6. Instala la bomba C aguas abajo del dispositivo microfluídico en modo de retirada para mantener un flujo constante y evitar la acumulación de presión.
7. Ejecuta el script basado en Python para controlar con precisión el flujo de fluidos de las bombas de jeringuilla. Gestionará la Bomba A y la Bomba B para crear un gradiente osmótico lineal desde las condiciones ISO hasta las hiperosmóticas, seguido de un retorno a las condiciones iso-osmóticas en intervalos de tiempo definidos por el usuario.
8. Ajusta parámetros experimentales como el caudal, los intervalos de gradiente y el tiempo total de ejecución en el software Python para adaptar las condiciones experimentales a requisitos específicos del ensayo.

Resultados

La Figura 1 ilustra la configuración general de nuestro dispositivo

Figura 1: Configuración del sistema.De izquierda a derecha, el software de control basado en Python permite crear curvas precisas de tiempo en función de la concentración variando las tasas de bombeo de las bombas de jeringuilla A y B...

Discusión

Las cámaras de mezcla de microfluídica suelen ser componentes costosos fabricados con configuraciones preestablecidas. Este manuscrito demuestra cómo la prototipado rápida y el código personalizado permiten a los laboratorios desarrollar cámaras de mezcla con rapidez, facilitando una amplia variedad de montajes experimentales.

Validamos la mezcla completa mediante análisis colorimétrico y osmometría. Las mediciones osmóticas se compararon además con valores te...

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
1/16" OD PEEK Tubulatura Capilar – 65 y micro; m diámetro interior	IDEX Salud y Ciencia, EE. UU.	SKU: ID-1560	1,5 m, cortado en secciones más pequeñas. Comprado a Darwin Microfluidics
Luz de curado de resina UV para impresora 3D y guion de guion; 230 V 405 nm	Skouphy, China		Se utiliza como estación de postcurado, colocándola en una caja blanca de poliestireno con pieza de resina durante ~6 S
3x Jeringuillas de vidrio UNF 1/4-28 Gastight & ndash; 5 mL	Hamilton, EE. UU.	SKU: HM-10103664	La conexión 1/4-28 permite la conexión a 1/16" Tubo de espio. Comprado a Darwin Microfluidics
Dimetilsulfóxido (DMSO), ACS certificado	Fisher Scientific, EE. UU.	Cat.No: D128-1	Comprado a Fisher Scientific
ESTÁNDAR DE CALIBRACIÓN ELITECHGroup, 850 MOSM/K	ELITechGroup, EE. UU.	VCAT: SS-277, Cat. No: NC1876875	Comprado a Fisher Scientific
ESTÁNDAR DE CALIBRACIÓN ELITECHGroup, 300 MOSM/K	ELITechGroup, EE. UU.	VCAT: SS-276, Cat. No: NC1876872	Comprado a Fisher Scientific
Accesorios y accesorios PFA sin brida Férulas ETFE 1/4"-28 a 1/16"	IDEX Salud y Ciencia, EE. UU.	SKU: ID-XP-245X	Pack de 10, comprado en Darwin Microfluidics
Colorante alimentario	Club House, Canadá
Osmómetro de punto de congelación FreezePoint 6000P	ELITechGroup, EE. UU.	Modelo: 6000P
Recipientes de medición de puntos de congelación	ELITechGroup, EE. UU.	VCAT: SS-279, Cat. No: NC1876881	Comprado a Fisher Scientific
Gel de superpegamento Gorilla	The Gorilla Glue Company, EE. UU.	https://gorillatough.com/product/gorilla-super-glue-gel/
Mezclador espina de pescado - Astilla de vidrio	Fábrica de Pequeñas Cosas	SKU: LTF-012.00-4264	Comprado a Darwin Microfluidics
Medios hiperosmóticos - 40% de DMSO (v/v) con 1,2 M de NaCl			Made in Lab
Ibidi µ-Slide VI 0.4 – ibiTreat	Ibidi, Alemania	Cat.No: 80606
Medios isosmóticos - Cytiva HyClone Fosfato Tamponado (PBS)	Cytiva, EE. UU.	Cat.No: SH3025601	Comprado a Fisher Scientific
Estereoscopio mótico	Motic, Hong Kong	Modelo:  SMZ-168 TLED
Bombas de jeringuilla NE1000 SyringONE	New Era Pump Systems Inc., EE. UU.	Modelo: 1010-US	Comprado a New Era Pump Systems Inc.
Impresora 3D de resina Phrozen Sonic Mini 8k	Phrozen Tech Co., LTD. Taiwán (R.O.C.)		Phrozen Sonic Mini 8k
Cable de red primaria RS-232 de bomba a PC	New Era Pump Systems Inc., EE. UU.	Modelo: CBL-PC-PUMP-7 (cable de 7 pies)	Convertidor serie de 9 pines a RS232, comprado a New Era Pump Systems Inc.
Cable de red secundaria bomba a bomba	New Era Pump Systems Inc., EE. UU.	Modelo: CBL-NET-7 (cable de 7 pies)	Cable RS232, comprado a New Era Pump Systems Inc.
Resina- PowerResins Sugical Guide Resina 1000 GR	PowerResins, 3BFab Inc, Tü Rkiye	REFERENCIA: PSG-03-C
Cable conversor RS-232 a USB	Tecnología Prolífica, Taiwán (R.O.C.)	Modelo: CBL-USB232	Comprado a New Era Pump Systems Inc.
Cinta de sellado deslizante - Cinta Gorilla Crystal Clear 1,88" x 9 yardas	The Gorilla Glue Company, EE. UU.
Cloruro de sodio (NaCl)	EMD Millipore, MilliporeSigma, Alemania	Gato. No: M1064041000	Comprado a Fisher Scientific