Declaración ética: El estudio se realizó de acuerdo con las directrices institucionales y los principios éticos de la Declaración de Helsinki. Se obtuvo la aprobación ética del Comité Ético de la Universidad de Bisha (UBCOM-RELOC), con el número de aprobación H-06-BH-087/(0802.23). La participación fue voluntaria, y se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los participantes antes de su inscripción. Los materiales, equipos y procedimientos analíticos utilizados en el estudio se resumen en la Tabla de Materiales.
Diseño del estudio y entorno
Se realizó un estudio transversal retrospectivo en el Hospital de Maternidad y Pediatría de Bisha, Arabia Saudita, entre diciembre de 2022 y mayo de 2023, para evaluar el estado del hierro y examinar los factores asociados con la deficiencia de hierro en mujeres embarazadas de la región norte de Asir.
Población de estudio y metodología de muestreo
Se inscribieron un total de 200 participantes, incluyendo 135 mujeres embarazadas que asistían a clínicas de atención prenatal de rutina y 65 mujeres no embarazadas emparejadas por edad que sirvieron como grupo control. Los participantes fueron reclutados de clínicas ambulatorias mediante muestreo por conveniencia durante el período del estudio. A las mujeres elegibles que acudían durante el horario de consulta se les abordó consecutivamente, y el reclutamiento continuó hasta alcanzar el tamaño muestral objetivo. Para reducir el posible sesgo de selección dentro de este marco, los controles se emparejaron por edad utilizando un muestreo aleatorio simple entre las asistentes elegibles no embarazadas a las clínicas.
Las mujeres embarazadas eran elegibles para la inclusión si tenían 18 años o más y un embarazo con una edad gestacional entre 12 y 36 semanas. Los participantes elegibles fueron reclutados independientemente de su estado de hierro y posteriormente clasificados como mujeres embarazadas con AID o sin AID según los resultados de laboratorio. De acuerdo con los criterios de la OMS, la anemia durante el embarazo se definió como concentraciones de hemoglobina (Hb) < 11,0 g/dL durante el primer y tercer trimestre y < 10,5 g/dL durante el segundo trimestre. Se diagnosticó AID en mujeres que cumplían el umbral específico de Hb para el embarazo y presentaban evidencia de deficiencia de hierro, incluyendo ferritina sérica < 15 ng/mL, hierro sérico < 10 µmol/L y capacidad total de ligado del hierro (TIBC) ≥ 68 µmol/L17,18. Las mujeres embarazadas que no cumplían estos criterios diagnósticos fueron clasificadas como grupo de embarazadas sin AID. Mujeres no embarazadas en edad reproductiva sin embarazo actual y sin trastornos hematológicos conocidos sirvieron como grupo control. Los criterios de exclusión para ambos grupos incluyeron antecedentes documentados de condiciones crónicas o sistémicas asociadas con alteraciones del metabolismo del hierro o estado inflamatorio, como enfermedad renal crónica, trastornos autoinmunes, neoplasias, síndrome del intestino irritable, enfermedad hepática crónica o trastornos hereditarios del hierro (por ejemplo, hemocromatosis). También se excluyeron mujeres con infecciones agudas en el momento de la toma de muestras, aquellas que habían recibido terapia con hierro intravenoso o transfusiones sanguíneas en los tres meses previos, y aquellas que recibían tratamiento inmunosupresor a largo plazo. Se registró el índice de masa corporal (IMC) y la etnia de todos los participantes; sin embargo, estas variables no se utilizaron como criterios de exclusión, sino que se consideraron como posibles covariables en el análisis.
Determinación del tamaño de la muestra
El tamaño de la muestra se calculó utilizando un software epidemiológico para el cálculo del tamaño muestral19, basado en una prevalencia esperada de anemia ferropénica (IDA) entre mujeres embarazadas en Arabia Saudita del 40 %6, con un nivel de confianza del 95 % y un margen de error del 5 %. El tamaño mínimo requerido de la muestra se estimó en 182 participantes; por lo tanto, se reclutaron un total de 200 participantes para mejorar la precisión estadística.
Recolección de datos
Cuestionario
Los datos se recopilaron mediante un cuestionario estructurado y validado. El cuestionario se elaboró tras una revisión exhaustiva de la literatura y fue evaluado por un panel de expertos en la materia, incluyendo obstetras, nutricionistas y epidemiólogos, para garantizar su validez de contenido. Se realizó un estudio piloto con 20 participantes, quienes no fueron incluidos en el análisis final, con el fin de evaluar la claridad, fiabilidad y viabilidad. La consistencia interna del cuestionario fue aceptable, con un alfa de Cronbach de 0.81.
El cuestionario final constaba de tres secciones que comprendían un total de 35 ítems (Archivo Suplementario 1):
Sección 1 (datos sociodemográficos, 10 ítems): edad, nivel educativo, ocupación, lugar de residencia, nacionalidad e historial familiar de anemia.
Sección 2 (hábitos dietéticos, 12 ítems): frecuencia de consumo de alimentos ricos en hierro (carne roja, carne blanca, pescado, verduras y cereales fortificados), ingesta de té y café, y régimen alimentario. Las variables dietéticas se seleccionaron a priori según su relevancia establecida respecto a la ingesta de hierro, la biodisponibilidad del hierro y los factores dietéticos que podrían influir en la absorción de hierro. El cuestionario incluyó las principales fuentes dietéticas de hierro, como carne roja, aves de corral, pescado, verduras de hoja verde y cereales fortificados. Se evaluaron los alimentos ricos en vitamina C, especialmente las frutas cítricas, porque la vitamina C puede mejorar la absorción del hierro no hemo. En contraste, se evaluó el consumo de té y café porque los polifenoles dietéticos pueden inhibir la absorción del hierro no hemo cuando se consumen junto con las comidas o cerca de ellas. También se evaluó el régimen alimentario y el consumo de comida rápida para indicar los patrones dietéticos generales y la adecuación nutricional. Los ítems dietéticos seleccionados se basaron en la literatura revisada durante el desarrollo del cuestionario y posteriormente fueron evaluados por expertos en obstetricia, nutrición y epidemiología para determinar su validez de contenido.
Sección 3 (Historia clínica y síntomas, 13 ítems): edad gestacional, paridad, antecedente de transfusión sanguínea, fatiga, mareo, fiebre y otros síntomas comúnmente asociados con anemia.
Evaluación bioquímica
Para cada participante, se obtuvo una muestra de 5 mL de sangre venosa tras un ayuno nocturno. Las muestras se centrifugaron a 2000 × g durante 15 minutos para separar el suero, el cual se analizó inmediatamente después. La concentración de hemoglobina se midió mediante un analizador hematológico automatizado y se reportó en gramos por decilitro (g/dL). Los niveles séricos de ferritina se determinaron mediante un inmunoensayo con electroquimioluminiscencia (ECLIA) en un analizador inmunoensayador automatizado y se expresaron en nanogramos por mililitro (ng/mL). El hierro sérico, la capacidad total de ligado del hierro (TIBC) y la capacidad de ligado del hierro no saturada (UIBC) se determinaron mediante un método colorimétrico en un analizador bioquímico automatizado, con resultados expresados en micromoles por litro (µmol/L). La saturación de transferrina (TR-SAT) se calculó como la relación entre el hierro sérico y la TIBC multiplicada por 100 y se expresó como porcentaje.
Estadísticas y análisis de datos
Los datos se codificaron y analizaron utilizando software estandarizado de análisis estadístico. Se utilizaron estadísticas descriptivas, incluidas medias, desviaciones estándar y porcentajes, para resumir las variables sociodemográficas, dietéticas, clínicas y bioquímicas. Las comparaciones entre grupos se realizaron mediante una prueba t de Student no apareada o un análisis de varianza de un factor (ANOVA), según correspondiera. Se consideró estadísticamente significativo un valor de p < 0,05. Los gráficos se generaron utilizando software de análisis estadístico y representación gráfica.
Para examinar los factores asociados independientemente con la AID, se aplicó un modelo de regresión logística multivariada. El estado de AID se especificó como la variable dependiente binaria (AID = 1, no AID/control = 0). Las variables independientes se seleccionaron a priori basándose en la plausibilidad biológica y en evidencia de estudios previos, e incluyeron características sociodemográficas (residencia, antecedentes familiares de anemia), estado fisiológico (embarazo) y variables dietéticas (ingesta de carne roja, aves de corral y frutas cítricas).
Las variables categóricas se codificaron utilizando variables ficticias, y las variables de ingesta dietética se clasificaron como bajas o adecuadas según la frecuencia de consumo reportada (≤2 veces por semana frente a >2 veces por semana). Todas las variables seleccionadas se introdujeron simultáneamente en el modelo de regresión para estimar sus asociaciones independientes, teniendo en cuenta posibles factores de confusión. Se presentaron las odds ratios ajustadas (OR) con intervalos de confianza del 95 % (IC), donde valores de OR superiores a 1 indicaban una mayor probabilidad de anemia por deficiencia de hierro (IDA). Se elaboró un resumen gráfico de las OR y sus IC del 95 % correspondientes mediante un gráfico de bosque generado en un software de hojas de cálculo.