Name: Medición de la presión arterial en ratones con registro del volumen de presión, un método de la cola del manguito (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-05-15T00:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: Aprende a medir la presión arterial en roedores mediante el método no invasivo de manguito caudal con registro de volumen de presión (VPR) utilizando el sistema CODA. Esta técnica permite evaluar simultáneamente hasta ocho animales.

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<ol style="padding:5px;"><li> Instalación del equipo <ol style="padding:5px;"><li> Selecciona un área en el laboratorio donde la temperatura ambiente es igual o superior a 20 ° C. </li><li> Evite los lugares cerca de los respiraderos de aire acondicionado y / o un fuerte ruido. </li><li> Evite la exposición del animal a los olores que pueden causar irritación y / o el estrés, tales como perfumes, colonias, productos químicos, y productos de limpieza. </li><li> Encienda el controlador de CODA. </li><li> A su vez en la plataforma de calentamiento y se puso a nivel 3. Si la temperatura ambiente es superior a 25 º C, empieza en los niveles 1 o 2. </li><li> Prueba de diagnóstico de controlador de <ol style="padding:5px;"><li> Abra el software de CODA. </li><li> Seleccione el dispositivo de CODA haciendo clic en él. </li><li> Haga clic en &quot;dispositivo de prueba seleccionado&quot;. </li><li> Seleccione los puños y los canales para poner a prueba y haga clic en &quot;Test&quot;. </li><li> Después de la prueba se haya completado, cierre la ventana de prueba de dispositivos. </li></ol></li></ol></li><li> Software de Configuración <ol style="padding:5px;"><li> Gestión de personal y los animales <ol style="padding:5px;"><li> Gestión de personal <ol style="padding:5px;"><li> Seleccione Herramientas&gt; Administrar personal. </li><li> Haga clic en &quot;Investigador 1&quot; para cambiar el nombre. </li><li> Haga clic en las filas posteriores de añadir nuevos investigadores. </li><li> Haga clic en la pestaña &quot;técnicos&quot; para modificar o agregar los técnicos. </li><li> Haga clic en la pestaña &quot;muestras&quot; para el nombre del animal para facilitar su identificación y para seleccionar el tipo de animal, la rata o el ratón. </li><li> Haga clic en la pestaña &quot;animales&quot; para modificar el tipo de animal y la sensibilidad. </li></ol></li></ol></li><li> Nuevo experimento <ol style="padding:5px;"><li> Seleccione Archivo&gt; Nuevo Experimento&gt; </li><li> Comenzar un nuevo experimento <ol style="padding:5px;"><li> Escriba el nombre del experimento. </li><li> Seleccione el investigador clave. </li><li> Seleccione una fecha de inicio y haga clic en &quot;Siguiente&quot;. </li></ol></li><li> Información básica de sesión <ol style="padding:5px;"><li> Escriba el nombre de sesión </li><li> Establecer &quot;ciclos de aclimatación&quot; a 5. Si prefiere no incluir los ciclos de aclimatación, a cero. Para ayudar a aclimatar al animal a la titular y en los puños, añadir ciclos adicionales a su experimento y ejecutar el experimento durante 5 días consecutivos. </li><li> Ajuste &quot;Número de Sets&quot; a 1. </li><li> Conjunto &quot;El tiempo entre grupos&quot; a 30 segundos para los sistemas múltiples </li><li> Establecer &quot;ciclos por Set&quot; a 20 ciclos. </li><li> Conjunto &quot;El tiempo entre los ciclos&quot; a 5 segundos y haga clic en &quot;Siguiente&quot;. </li></ol></li></ol></li><li> SELECCIÓN DE LA MUESTRA <ol style="padding:5px;"><li style="list-style-type:none;"><ol style="padding:5px;"><li> Seleccionar la muestra de la piscina de la muestra y la asigna a la primer canal disponible y haga clic en &quot;Siguiente&quot;. </li></ol></li><li> Parámetros de la sesión <ol style="padding:5px;"><li> Establecer &quot;la presión de oclusión máxima&quot; a 250mmHg. </li><li> Set &quot;Tiempo deflación&quot; a 20 segundos para los ratones, 15 segundos para las ratas. </li><li> Set &quot;Volumen mínimo&quot; a 15ul. </li><li> Set &quot;Estilo de visualización&quot; para un canal por el gráfico. </li><li> Añadir investigadores y técnicos adicionales y haga clic en &quot;Siguiente&quot;. </li></ol></li><li> Sesión de secuencias de comandos <ol style="padding:5px;"><li> Revisar la secuencia de comandos de sesión y haga clic en &quot;Siguiente&quot;. </li><li> No seleccione Finalizar hasta que se complete la sección Preparación del animal. </li></ol></li></ol></li></ol></li><li> Preparación de los animales <ol style="padding:5px;"><li> Animal Set-up <ol style="padding:5px;"><li> Animal titular <ol style="padding:5px;"><li> Para entrenar y mejorar la aclimatación de los animales, añadir ciclos adicionales a su experimento y ejecutar el experimento durante cinco días consecutivos. También puede ayudar con la aclimatación se coloca el animal en el soporte por 15 minutos durante 3 días consecutivos antes del estudio actual. </li><li> Lugar de cada animal en un soporte al recoger el animal por la cola y con cuidado colocar al animal en la parte trasera del titular que se enfrenta el extremo abierto de la ojiva. Nota: el tamaño del animal en relación con el tamaño del titular seleccionado. El animal debe ser capaz de entrar libremente en el titular. </li><li> Con cuidado, seguro la puerta trasera al titular girando el tapón de rosca roja en la puerta trasera. Se debe tener cuidado de evitar pellizcar la cola o en cualquier otra parte del cuerpo garantizando al mismo tiempo la puerta trasera. </li><li> Deslice el cono de la nariz hacia la puerta trasera, lo que limita el movimiento de los animales. El cono de la nariz debe estar en condiciones de limitar el animal darse vuelta, mientras que en el interior del soporte. </li><li> Coloque el soporte a la plataforma de calentamiento en la posición designada. Si la prueba el mismo grupo de animales durante un período de tiempo, asegúrese de rotar la posición de titular en la plataforma de calentamiento para mejorar la consistencia y precisión de sus mediciones de la PA. Permitir que el animal por lo menos 5 minutos para aclimatarse a la titular. </li><li> No tocar o manipular el animal, mientras que en el interior del soporte. El mayor contacto podría irritar al animal. </li><li> Nunca deje a los animales en los titulares de vigilancia. </li></ol></li><li> Colocación del manguito <ol style = &quot;padding: 5px;&quot;&gt; <li> Tema de la cola a través del &quot;manguito de oclusión&quot;. Coloque esta banda tan cerca de la base de la cola como sea posible sin la fuerza. </li><li> Asegurar el &quot;Tubo de oclusión del manguito&quot; en la muesca en la parte posterior superior del soporte. </li><li> Tema de la cola a través de los &quot;Gemelos VPR&quot;, colocándolo dentro de 2 mm de la &quot;manguito de oclusión&quot;. </li><li> Asegurar el &quot;Tubo de VPR espontáneas&quot; en la muesca en la parte posterior superior del soporte. </li><li> Coloque los puños al controlador de CODA. </li></ol></li><li> Animal de temperatura <ol style="padding:5px;"><li> Permitir que el animal por lo menos 5 minutos para regular la temperatura. </li><li> Registrar la temperatura del animal con frecuencia con un termómetro infrarrojo. La temperatura de los animales debe ser de 32 a 35 ° C. </li></ol></li></ol></li></ol></li><li> Experimento <ol style="padding:5px;"><li> Comience Experimento <ol style="padding:5px;"><li> Haga clic en &quot;Finalizar&quot; y el experimento se iniciará de inmediato. </li></ol></li><li> Final Experiment <ol style="padding:5px;"><li> Animal <ol style="padding:5px;"><li> Quitarse de inmediato al animal de los puños y el soporte. </li><li> Devolver el animal a su jaula después de que el &quot;Informe simple resumen de la sesión&quot; en la pantalla. </li></ol></li><li> Recopilación de datos <ol style="padding:5px;"><li> Después de completar el último ciclo los ciclos aceptados se mostrarán automáticamente en formato de hoja de cálculo dentro de la aplicación CODA, haga clic en &quot;Exportar a Excel&quot; botón. </li><li> Seleccione la carpeta para colocar el archivo, el nombre del archivo y haga clic en &quot;Guardar&quot;. </li><li> Abra la aplicación Excel y haga clic en &quot;Abrir&quot;. </li><li> Ver todos los tipos de archivo para mostrar la &quot;. Csv salvo&quot;, haga clic en el archivo. </li></ol></li><li> Procesamiento de Datos <ol style="padding:5px;"><li> Hay varias maneras de procesar los datos en el archivo de Excel. Una práctica común es para obtener el promedio y desviación estándar. </li><li> Eliminar las medidas si la desviación estándar es mayor que 30. </li><li> Además, los ciclos rechazado puede ser visto y la base de datos puede ser fácilmente exportado a Excel. Consulte el manual del usuario para obtener información adicional. </li></ol></li></ol></li></ol></li></ol>

Los autores no tienen nada que revelar.

medición de la presión arterial en ratones con registro del volumen de presión, un método de la cola del manguito

Measuring Blood Pressure in Mice using Volume Pressure Recording, a Tail-cuff Method

El CODA de 8 canales de alto rendimiento sistema no invasivo de presión arterial mide la presión arterial hasta en 8 ratones o ratas de forma simultánea. El CODA cola del manguito sistema utiliza registro del volumen de presión (VPR) para medir la presión arterial mediante la determinación del volumen de sangre cola. Un diferencial especialmente diseñado transductor de presión y una oclusión cola del manguito medir el volumen total de sangre en la cola, sin la necesidad de obtener la señal de pulso individual. Especial atención se brinda a la longitud del manguito de oclusión a fin de obtener las lecturas de presión sanguínea más precisa. VPR pueden obtener lecturas de piel oscura los roedores, como ratones C57BL6 y es compatible con MRI. El sistema CODA proporciona mediciones de seis (6) diferentes parámetros de la presión arterial, presión arterial sistólica y diastólica, frecuencia cardíaca, presión arterial media, el flujo de sangre cola, la cola y el volumen sanguíneo. Las mediciones se pueden realizar en cualquiera de los ratones despiertos o anestesiados o ratas. El sistema incluye un controlador de CODA, un ordenador portátil, el software, los puños, los titulares de los animales, las almohadillas de infrarrojos calentamiento, y un termómetro de infrarrojos. Hay siete tamaños diferentes titular de los ratones tan pequeños como de 8 gramos de ratas tan grandes como 900 gramos.

El CODA de 8 canales de alto rendimiento sistema no invasivo de presión arterial mide la presión arterial hasta en 8 ratones o ratas de forma simultánea. Este sistema utiliza la cola del manguito de registro del volumen de presión (VPR) para medir la presión arterial mediante la determinación del volumen de sangre cola.

Medición de la presión arterial en ratones con registro del volumen de presión, un método de la cola del manguito

El sistema de presión arterial no invasiva de alta capacidad de 8 canales CODA mide la presión arterial en hasta 8 ratones o ratas simultáneamente. El CODA...

La palabra coda es italiana y significa cola. El sistema no invasivo de presión arterial Coda permite la medición de la presión arterial en roedores, gracias a un sensor especializado de registro de volumen y presión que mide los cambios en el volumen sanguíneo de la cola cuando se coloca sobre la cola de un animal. Este video demuestra cómo configurar el sistema, preparar a los animales y obtener mediciones de presión arterial en ocho animales simultáneamente.Hola, soy Anju Bala Krishnan, trabajando en el laboratorio de Alan Dougherty del Centro de Investigación Cardiovascular de la Universidad de Kentucky, Lexington. Hoy les mostraremos un procedimiento para medir la presión arterial en ratones utilizando el método de registro de volumen y presión con manguito caudal. Utilizamos este procedimiento en nuestro laboratorio para estudiar el sistema cardiovascular.Así que comencemos. Para configurar el sistema CODA, seleccione un área en el laboratorio donde la temperatura ambiente sea estable y de 20 grados Celsius o superior. Evite ubicaciones cercanas a rejillas de aire acondicionado, ya que exponer a los animales a ruidos fuertes u olores puede irritarlos o causarles estrés.Los olores animales pueden incluir cualquier perfume fuerte que pueda estar utilizando. Encienda el controlador Coda y luego las plataformas de calentamiento, que deben estar ajustadas al nivel tres. Si la temperatura ambiente es superior a 25 grados Celsius, comience en los niveles uno o dos.Realice primero la prueba de diagnóstico del controlador; abra el software Coda. Seleccione el dispositivo Coda haciendo clic sobre él. Haga clic en probar dispositivo seleccionado.Seleccione las mangas y canales que se probarán y haga clic en probar. Una vez finalizada la prueba de diagnóstico del controlador, cierre la ventana de prueba del dispositivo. Seleccione el código del controlador que se utilizará y luego haga clic.Utilice estos dispositivos para configurar el software. Seleccione herramientas para gestionar el personal. A continuación, haga clic en investigador uno.Para cambiar el nombre, haga clic en las filas siguientes para agregar investigadores adicionales. Luego haga clic en guardar datos. Haga clic en la pestaña de técnicos para modificar o agregar técnicos.A continuación, haga clic en la pestaña especímenes para nombrar los animales y facilitar su identificación, así como para seleccionar el tipo de animal. Luego, haga clic en guardar datos. Finalmente, haga clic en la pestaña animales.Para modificar el tipo de animal y la sensibilidad, haga clic en guardar datos y luego cierre. Para comenzar un nuevo experimento, seleccione archivo Nuevo experimento. Ingrese el nombre del experimento, seleccione al investigador principal y elija una fecha de inicio.Haga clic en siguiente. El siguiente paso consiste en ingresar la información básica de la sesión. Comience ingresando el nombre de la sesión, establezca los ciclos de aclimatación en cinco; si prefiere no incluir ciclos de aclimatación, establézcalos en cero.Configure el número de series en una, el tiempo entre series en 30 segundos para múltiples series, ciclos por serie en 20 ciclos y el tiempo entre ciclos en cinco segundos. Luego haga clic en siguiente.Para comenzar la selección de la muestra, seleccione la muestra del grupo de muestras y asígnela al primer canal disponible. Y haga clic en siguiente para establecer los parámetros de la sesión. Establezca la presión máxima de oclusión en 250 milímetros.Tiempo de desinflado del mercurio a 20 segundos. Para ratones, volumen mínimo a 15 microlitros y estilo de visualización a un canal por gráfico. También puede agregar investigadores y técnicos adicionales.Luego haga clic en siguiente. Revise el guion de la sesión y haga clic en siguiente. No seleccione finalizar hasta que complete la sección de preparación del animal, que se describe a continuación.Ahora puede recuperar los animales y colocarlos junto al sistema de presión arterial coda. Antes de colocar los animales en los soportes, observe el tamaño de cada animal en relación con el tamaño del soporte seleccionado. El animal debe poder entrar libremente en el soporte.Coloque cada animal en un soporte tomándolo por la cola y colocándolo suavemente en la parte trasera del soporte, que mira hacia el extremo abierto del cono nasal. Asegure cuidadosamente la tapa trasera al soporte girando el tornillo de la tapa trasera. Tenga cuidado de no atrapar la cola ni ninguna otra parte del cuerpo al asegurar la tapa trasera.Diapositiva siguiente. El cono nasal hacia la escotilla trasera. Limitando el movimiento del animal.El cono nasal debe estar en una posición que limite al animal para girar. Mientras esté dentro del soporte, coloque el soporte sobre la plataforma de calentamiento. En la posición designada, permita que el animal se aclimate al soporte durante al menos cinco minutos.No toque ni manipule al animal. Mientras esté dentro del soporte, el contacto aumentado podría irritar al animal, y nunca deje al animal en el soporte sin supervisión. Para colocar correctamente la correa oclusiva en la cola, pase la cola a través de la correa oclusiva y coloque la correa lo más cerca posible de la base de la cola sin aplicar fuerza.A continuación, pase la cola a través de la manga del sensor VPR, colocándola a menos de dos milímetros de la manga de oclusión. Sujete el tubo en la muesca situada en la parte superior trasera del soporte. Se infla la manga de oclusión en la cola para obstaculizar el flujo sanguíneo hacia la cola.La manga de oclusión se desinfla lentamente y la manga de la cola VPR, que incorpora un sensor especialmente diseñado, mide las características fisiológicas del flujo sanguíneo que regresa mientras la sangre vuelve a la cola. La manga del sensor VPR mide la hinchazón de la cola como resultado de las pulsaciones arteriales provocadas por el flujo sanguíneo. La presión arterial sistólica se mide automáticamente en el primer momento en que aparece la hinchazón de la cola.La presión arterial diastólica se calcula automáticamente cuando cesa la tasa creciente de hinchazón en la cola. Después de colocar a todos los animales en los soportes y colocarles la manga en la cola, déjelos al menos cinco minutos para que regulen su temperatura. Registre la temperatura de los animales.Con frecuencia, con un termómetro infrarrojo, la temperatura del animal debe estar entre 32 y 35 grados Celsius. Ahora que los animales están listos, podemos comenzar el experimento. Haga clic en finalizar para iniciar el experimento.La línea roja representa la desinflación de la manga de oclusión y de la manga del sensor VPR. La línea azul representa los cambios en el volumen sanguíneo en la cola. La primera inflexión de la línea azul, la tasa mínima de cambio, identifica la presión arterial sistólica.La segunda inflexión de la línea azul, correspondiente a la tasa máxima de cambio, identifica la presión arterial diastólica cuando el experimento ha finalizado. Retire inmediatamente a los animales de las brazaletes y del soporte. Se muestra un informe sencillo con el resumen de la sesión.Los datos recopilados en el experimento se guardan como un archivo de Excel. Hay varias formas de procesar los datos dentro del archivo de Excel. Una práctica común es obtener el promedio y la desviación estándar, y eliminar las mediciones.Si la desviación estándar es mayor de 30. Además, se pueden visualizar los ciclos rechazados y toda la base de datos se puede exportar fácilmente a Excel. Consulte el protocolo escrito y el manual del usuario.Para obtener más información, acabo de mostrarle cómo medir la presión arterial en ratones de forma no invasiva utilizando la grabación de volumen y presión. Es muy importante reducir el estrés animal siguiendo este procedimiento para obtener mediciones precisas y consistentes. Eso es todo.Gracias por ver el video y mucha suerte con los experimentos.

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Investigación

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