11 de junio de 2009
Se describe un nuevo método quirúrgico para la cateterización "asas intestinales" en el íleon de los ovinos. Una vez que los animales se han recuperado de la cirugía y han limpiado los antibióticos y analgésicos, múltiples tratamientos pueden ser depositados directamente en los bucles a través de los catéteres.
El intestino es una estructura compleja que interviene no solo en la absorción de nutrientes, sino que también actúa como barrera entre el individuo y el mundo exterior. Como tal, el intestino desempeña un papel fundamental en la inmunovigilancia y la protección contra patógenos entéricos. La investigación de la fisiología intestinal y la inmunología suele emplear los bucles intestinales como modelo experimental.
Muchos de estos modelos de bucle son procedimientos quirúrgicos sin recuperación que estudian los cambios a corto plazo en el intestino. Anteriormente, creamos un modelo de bucle intestinal de recuperación para medir específicamente los cambios inmunológicos a largo plazo en el intestino de las ovejas después de la exposición a vacunas, adyuvantes y virus. Un inconveniente importante de este método es que hay una única ventana de oportunidad para administrar agentes al asa en el momento de la cirugía.
Del mismo modo, solo se pueden tomar muestras de la mucosa intestinal y del contenido numérico en el momento de la determinación del proyecto. Por lo tanto, hemos modificado nuestro modelo intestinal mediante la inserción de catéteres a largo plazo en el intestino. Se trata de instrumentos que intervienen en la cirugía intestinal, las pinzas de DO, también conocidas como intestinales.
Las pinzas son instrumentos importantes que aseguran que el intestino no se lesione durante la cirugía. Los catéteres en el experimento se etiquetan con marcas negras con un marcador permanente y luego se esterilizan. El ungüento orbital se inserta dentro del extremo de cada catéter o la albahaca es un ungüento de barrera no antibiótico.
La cortina de la tira estéreo se corta con la hoja del bisturí. La piel y el músculo están en tamaño usando electrocauterización si es necesario. Se podría usar una hoja de bisturí quirúrgico para el mismo procedimiento, sin embargo, el sangrado del tejido se vuelve más pronunciado.
Una sola incisión con una hoja de bisturí forma un pequeño orificio que permite que las tijeras Metzenbaum abran el peritoneo. El secum se encuentra en el cuadrante inferior derecho del abdomen y se utiliza como punto de referencia. El dium está unido al cráneo y tanto el íleon como el suero se destacan aquí.
A continuación, el seum se vuelve a colocar en el abdomen. Se utiliza una pieza precortada de sutura de seda para medir la longitud del segmento intestinal dentro del cual se establecerán asas de 15 centímetros de largo en esta cirugía. El segmento intestinal consta de aproximadamente 85 centímetros de íleon.
Los extremos del segmento intestinal se sujetan con pinzas de doin en el lado opuesto al bucle y con pinzas de Kelley grandes en el lado del bucle del íleon. A continuación, se corta el io entre las abrazaderas. Esto se repite en el otro lado.
El segmento intestinal se lava dos veces con 60 mililitros de solución salina estéril y se introducen 60 mililitros de una solución antibiótica de amplio espectro en el segmento intestinal, se distribuyen lo más uniformemente posible a lo largo del segmento y se dejan durante 30 minutos. Los extremos incisos del íleon se unen en una anastomosis de dos tirantes.
Las suturas alinearon los extremos del íleon y un patrón de sutura continuo simple. Mediante una sutura reabsorbible de dos ceros Vicryl conecta la cara lateral del intestino con la otra. A continuación, se invierte el íleon y se repite la sutura en el otro lado.
Se inyectan cinco mililitros de solución salina estéril en el sitio de la anastomosis para verificar si hay fugas. Aquí. El extremo de los destornilladores de aguja se pasa suavemente al íleon en el sitio de la anastomosis para garantizar que el lumen sea grande y permeable. La solución antibiótica de amplio espectro se retira suavemente del segmento intestinal.
Los extremos romos del segmento intestinal están sellados con un cierre de dos capas. Cada extremo del segmento intestinal se cierra con un patrón de sutura continuo simple que utiliza dos suturas vícricas cero absorbibles, seguidas de un patrón de sutura invertido. Las asas se forman liando el segmento intestinal con dos suturas de seda cero.
La primera ligadura se coloca a cinco centímetros del extremo romo del segmento intestinal. El segmento intestinal se vuelve a medir para asegurarse de que tenga la longitud suficiente para soportar todos los bucles. Para crear el primer bucle.
Una ligadura de sutura de seda se coloca a 15 centímetros de la primera sutura, estableciendo así el bucle. Es importante tener en cuenta que los extremos de las suturas de ligadura se dejan largos, ya que se utilizarán para asegurar el catéter a la pared del asa. Se hace una pequeña incisión en la pared de cada asa.
Un dilatador de vasos desechables amarillo agranda el orificio permitiendo que el catéter se introduzca en el lumen del asa. La perla de silicona en el catéter ayuda a evitar que el catéter se salga del bucle. Se utiliza un patrón de sutura de cuerda para cerrar firmemente la incisión.
El catéter se asegura aún más a la pared del asa atando el catéter con las suturas de ligadura utilizadas anteriormente Para delinear el asa, el catéter está bien asegurado y el asa cateterizada se resalta en esta imagen. Los tres bucles con cateterismo se resaltan aquí. Tenga en cuenta que los asas aparecen rosadas, saludables y viables, lo que demuestra que el flujo sanguíneo no se ha visto comprometido por el procedimiento quirúrgico.
De nuevo, los bucles parecen saludables. Se coloca una incisión de arma blanca cerca de la incisión abdominal original. Los catéteres se exteriorizan a través de la incisión y los bucles con cateterismo se vuelven a colocar en la cavidad abdominal.
La pared abdominal se sutura con una sutura intestinal reabsorbible de tamaño tres en un solo patrón interrumpido. La piel se cierra con un patrón de sutura de colchón horizontal interrumpido que utiliza dos suturas de nailon cero no absorbibles. Se utiliza un tubo hueco de acero inoxidable para tunelizar los catéteres debajo de la piel.
El tubo se inserta cerca de la incisión abdominal y viaja por debajo de la piel y sale de la piel cerca de la base del cuello y entre los hombros. Esta ubicación de salida es necesaria para proteger los catéteres de daños posteriores. Los catéteres se insertan en el tubo y se empujan hacia adelante durante al menos el 50% de la longitud del tubo.
Luego, el tubo con los catéteres se extrae de la piel en el sitio de salida. La incisión en la piel se cierra con sutura de nailon no absorbible de dos ceros. Los catéteres se etiquetan y se colocan en un escalfado hasta que se necesiten.
Esta imagen muestra una oveja cinco días después de la cirugía y el animal parece brillante, alerta y receptivo y ha reanudado su dieta normal. En este procedimiento, pudimos introducir catéteres a largo plazo en los asas intestinales establecidos dentro del íleon de las ovejas. Esto nos permite medir los cambios fisiológicos e inmunológicos después de varios tratamientos dentro de estos distintos compartimentos intestinales.
Las características sobresalientes de este procedimiento quirúrgico son el establecimiento del segmento intestinal dentro del íleon, la eliminación del segmento intestinal mediante lavado con solución salina estéril, la introducción de antibióticos de amplio espectro en el segmento intestinal, la anastomosis del íleon, la eliminación de antibióticos del segmento intestinal, el cierre romo del segmento intestinal, el establecimiento del asa terminal dentro del segmento intestinal, Inserción del catéter en asas, estabilización de los catéteres dentro del exterior del catéter asas. Este dibujo muestra una representación esquemática del procedimiento de salto intestinal con cateterismo descrito en este video. Obsérvese los tres asas con cateterismo de 15 centímetros de largo, los dos espacios intermedios no cateterizados de 15 centímetros de largo establecidos entre los asas y los dos segmentos terminales de cinco centímetros, todos establecidos dentro de un segmento intestinal de 85 centímetros de largo del íleon de la oveja.
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Este estudio presenta un método quirúrgico novedoso para la cateterización de bucles intestinales en el íleon de ovejas. Esta técnica permite la administración directa de múltiples tratamientos en los bucles después de que los animales se hayan recuperado de la cirugía.
Esta técnica de cateterización permite la administración repetida de tratamientos en bucles intestinales, facilitando estudios inmunológicos longitudinales en modelos animales grandes. Aborda una limitación clave en la investigación preclínica intestinal al permitir ventanas de intervención posquirúrgica, mejorando la flexibilidad experimental y la riqueza de los datos. El método potencia la validación de objetivos y la reducción de riesgos mecanicistas en el desarrollo de biológicos orales, vacunas y adyuvantes mucosales.
El método se encaja dentro del continuo de descubrimiento que va desde la prueba de hipótesis hasta la identificación de compuestos activos, particularmente para biológicos dirigidos al sistema gastrointestinal y candidatos a vacunas.