Name: Wolbachia Infección bacteriana en Drosophila (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 46 s
Description: Aprende a aislar e inyectar Wolbachia en Drosophila usando un dispositivo de filtración especializado. Este protocolo permite estudiar la transmisión de bacterias intracelulares y su capacidad de cruzar tejidos hasta llegar a la línea germinal.

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Los autores no tienen nada que revelar.

wolbachia infección bacteriana en drosophila

Wolbachia Bacterial Infection in Drosophila

Wolbachia Infección bacteriana en Drosophila

Me llamo Voia Friedman. Soy investigadora asociada en la Universidad de Princeton. Hoy les voy a contar sobre varios protocolos que desarrollé para transinfectar, inicialmente para aislar, para regresar desde el hilio de moscas infectadas, y posteriormente para ayudar a inyectar el alimento del hilio en moscas no afectadas.Entonces, básicamente, este es un protocolo muy sencillo para aislar him oly para aspectos básicos. Y utilizará este dispositivo de, de mepo que contiene un filtro que va encima de un E. Básicamente, necesita colocar, comenzamos con alrededor de cien moscas. Aniquile las moscas, colóquelas en el dispositivo de filtración, puede usar simplemente un embudo y eso se ajustará muy fácilmente a este dispositivo y lávelo con etanol al 70 %.Solo tome el futuro, elimínelo y puede desechar el etanol. Luego, después de tres lavados, realice el último lavado con agua molecular porque no desea tener bacterias con trazas de etanol. Bueno, y entonces simplemente pase a una nueva puerta de armas y, a continuación, centrifugue en un micro, un micro real durante dos minutos. Posteriormente, vea cómo puede inyectar eso. Él solo alimenta a las moscas no afectadas.Entonces, básicamen

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Investigación

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Biología

Parasitoide (parásitos) avispas constituyen una clase importante de enemigos naturales de muchos insectos,...

Una introducción a las avispas parasitarias de<em&gt; Drosophila</em&gt; Y la respuesta inmune antiparasitario

Fuente: Siva-Jothy, J. A., et al. Infección bacteriana oral y desprendimiento en Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2018)El vídeo muestra la infección oral de Drosophila melanogaster con bacterias patógenas. Incluye la preparación de viales de infección y la transferencia de moscas hambrientas para facilitar la ingestión bacteriana. El procedimiento captura la colonización intestinal, seguida de la esterilización superficial y la homogeneización de las moscas. Finalmente, muestra la...

Infección oral de Drosophila melanogaster con bacterias patógenas

Fuente: Hiroyasu, A., D et al., Extracción de hemocitos de larvas de Drosophila melanogaster para infección microbiana y análisis. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo muestra el procedimiento para establecer una infección bacteriana en larvas de Drosophila colocándolas en una gota bacteriana y pinchándolas con una aguja de tungsteno. Las larvas se incuban luego en una placa de agar ranurada y rica en nutrientes para estudiar las interacciones huésped-patógeno.

Establecimiento de infección bacteriana en larvas de Drosophila

Drosophila melanogaster es un organismo modelo excepcional para estudiar el sistema inmune innato y las consecuencias fisiológicas de la infección y la enfermedad. Este protocolo describe cómo administrar infecciones bacterianas robustas y cuantitativamente repetibles a D. melanogaster, y cómo medir posteriormente la gravedad de la infección y cuantificar la respuesta inmunitaria del huésped.

La infección bacteriana sistémica y Defensa Inmune fenotipos en<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Se presenta un método para la cría de Drosophila melanogaster en condiciones axénicas y gnotobióticos. Volar embriones se dechorionated en hipoclorito de sodio, de manera aséptica a la dieta estéril, y se ha criado en contenedores cerrados. La inoculación de la dieta y los embriones con bacterias conduce a asociaciones gnotobióticos, y la presencia bacteriana se confirmó mediante siembra de todo el cuerpo homogeneizados de Drosophila.

La cría de la mosca de la fruta<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Bajo axénicos y Condiciones gnotobióticos

Los mosquitos Aedes aegypti infectados con Wolbachia están siendo liberados en las poblaciones naturales para suprimir la transmisión de arbovirus. Se describen métodos para posterior Ae. aegypti con Wolbachia infecciones en el laboratorio para los experimentos y la liberación del campo, tomar precauciones para reducir al mínimo la selección y adaptación de laboratorio.

Mantener los mosquitos Aedes aegypti infectados con Wolbachia

Este protocolo describe métodos para exponer oralmente e infectar a la mosca de la fruta Drosophila melanogaster con bacterias patógenas y para medir el número de bacterias infecciosas caseta después de la infección intestinal. Además, describimos el efecto de mutantes inmunes mosca supervivencia después de la infección bacteriana oral.

Oral infección bacteriana y vertimiento en Drosophila melanogaster

Este protocolo describe cómo establecer infección viral en vivo de Drosophila melanogaster utilizando el método de inyección de nano y técnicas básicas para analizar interacción virus-huésped.

Establecimiento de la infección Viral y análisis de la interacción huésped-Virus en Drosophila Melanogaster

Las moscas adultas de Drosophila melanogaster se han utilizado ampliamente como organismos modelo para investigar los mecanismos moleculares subyacentes a las respuestas inmunes innatas antimicrobianas del huésped y las estrategias de infección microbiana. Para promover la etapa de larva de D. melanogaster como un sistema modelo adicional o alternativo, se describe una técnica de inyección larvaria.

Drosophila melanogaster Protocolo de inyección de larvas

Se utilizaron cuatro métodos para detectar Wolbachia intracelular, que se complementaron entre sí y mejoraron la precisión de detección de la infección por Wolbachia de Aa23 derivada de Aedes albopictus y Aa23-T curada de la infección nativa por Wolbachia utilizando antibióticos.

Detección de Wolbachia Strain wAlbB en líneas celulares de Aedes albopictus

Las líneas celulares son útiles en estudios sobre organismos intracelulares que no pueden cultivarse fuera de sus células huésped. Aunque las líneas infectadas por Wolbachia han permitido muchos descubrimientos, la heterogeneidad dentro de estas líneas puede conducir a resultados experimentales variables. Presentamos un protocolo para la generación de clones unicelulares y cultivos continuos a partir de células JW18 infectadas con Wolbachia.

Generación de cultivos monoclonales a partir de la línea celular Drosophila melanogaster JW18 infectada por Wolbachia

Aprende a aislar e inyectar Wolbachia en Drosophila usando un dispositivo de filtración especializado. Este protocolo permite estudiar la transmisión de bacterias intracelulares y su capacidad de cruzar tejidos hasta llegar a la línea germinal.

Wolbachia Infección bacteriana en Drosophila

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