Name: Extensión probóscide Respuesta (PER) Ensayo en Drosophila (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-04-29T00:00:00.000+00:00
Duration: 28 min 40 s
Description: Aprende el ensayo de extensión de probóscide (PER) en Drosophila para estudiar comportamiento gustativo. Este método permite analizar preferencias alimentarias mediante soluciones de azúcar en moscas.

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Damos las gracias a Paul Graham para servir como un hombre de la cámara en el video de presentación.

Hambre <ol><li> En primer lugar, matar de hambre al vuelo. </li><li> Ponga un pedazo pequeño de Kim-limpiar empapados con agua en un frasco vacío. </li><li> Transferencia de 20-30 bien alimentados moscas en el vial vacío. </li><li> Comprobar cada 12 a 24 horas para asegurarse de que el papel está húmedo. </li><li> Matar de hambre al volar por 36 a 72 horas. </li></ol> Arreglar la marcha <ol><li> Tome una mosca en un aspirador. </li><li> Coloque una punta de 200 l de color amarillo sobre la apertura. Al mismo tiempo mover de un tirón y soplando sobre ella, se puede apretar la mosca en la punta amarilla. </li><li> Aplicar suavemente un poco de aire para impulsar la marcha hasta un punto en el que no se puede mover. </li><li> Mediante el uso de una navaja de afeitar, pon una marca aproximadamente a los ojos de la mosca, y luego aspirar el vuelo de regreso y le cortó la punta. </li><li> Sople suavemente el vuelo de regreso a la posición, pero antes de llegar al final, hacer un corte inclinado en la posición en la trompa se va a estar ubicado. Usted puede hacer sin este corte inclinado, pero sin duda sería el siguiente proceso más fácil. </li></ol> Prepare mechas sacarosa <ol><li> Toque una banda de 6 mm de ancho de Kimwipes ® papel en un hilo, y se separan en pequeños trozos de cono-como forma de mecha (&lt;1 cm). </li><li> Estas mechas pequeñas se sumergieron en soluciones de sacarosa o agua y se presentó a la trompa por la toma de contacto. </li></ol> Prepare los controles y los animales de experimentación <ol><li> Antes de probar cualquier estimulantes del gusto, dar una solución de sacarosa al 4% a la mosca. Esto actúa como un control positivo. Deseche cualquier mosca que no respondió. </li><li> A continuación, prueba de dH 2 0 sobre la marcha. Este acto como un control negativo. Deseche la marcha si se ha respondido. </li><li> Prueba de estos controles después de la prueba de su estimulantes. </li></ol>

<ol><li>Dethier, V. G. The Hungry Fly. , Harvard University Press. Cambridge. (1976).</li>
</ol>

En esta presentación, hemos pasado por todos los pasos para el ensayo de probóscide respuesta de extensión. El método parece bastante sencillo, pero como en muchos ensayos de comportamiento de otras, muchas pequeñas cosas pueden evitar que el ensayo de trabajo. Hemos pasado por muchas etapas de tal manera que necesitan una atención especial. En este caso, me reitero algunos de los factores más importantes. Uno de ellos es la forma de la mecha. He mostrado algunos de los ejemplos muy buenos, pero por supuesto, en realidad, todo sería...

<table><tbody><tr><td>HDR-HC1</td><td>Cámara</td><td>Sony Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>SMZ800</td><td>Microscopio</td><td>Nikon Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>P-IBSS</td><td>Adaptador de cámara</td><td>Nikon Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1x DC10LN</td><td>Adaptador de cámara</td><td>Optem, Qioptiq Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>257010</td><td>Adaptador de cámara</td><td>Optem, Qioptiq Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TREKKER Mk2</td><td>Trípode</td><td>BENBO</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gorillapod SLR</td><td>Trípode</td><td>Joby</td><td></td><td></td></tr><tr><td>iMac G5</td><td>Computadora</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Power Mac G5</td><td>Computadora</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>iMovie</td><td>Software</td><td>Apple</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MPEG Streamclip</td><td>Software</td><td>SQUARED 5</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

extensión probóscide respuesta (per) ensayo en drosophila

Proboscis Extension Response (PER) Assay in Drosophila

Respuesta trompa de extensión (PER) es un ensayo de comportamiento de sabor que se ha utilizado en las moscas, así como en las abejas. En la superficie de la boca de la mosca (labelo), hay pelo-como las estructuras llamadas sensilla que alberga neuronas gusto. Cuando una sustancia atractiva entra en contacto con el labelo, la mosca se extiende su trompa para consumir el material. Extensión probóscide Respuesta (PER) ensayo mide la respuesta de comportamiento de gusto, y es un método útil para conocer las preferencias de alimentos en una sola mosca. Soluciones de azúcares diversos, tales como sacarosa, glucosa y fructosa, son muy atractivos para la marcha. El efecto de las sustancias aversivas también se puede probar que la reducción del PER cuando se mezcla en una solución dulce. A pesar de la simplicidad del procedimiento básico, hay muchas cosas que pueden evitar que se trabaja. Uno de los factores que requiere atención es el estado de respuesta de la mosca. El tiempo de hambre necesaria para que la marcha para el estado de respuesta adecuada varía drásticamente de 36 a 72 horas. Hemos establecido una serie de controles para evaluar el estado de la mosca y que permite la detección de los animales individuales que no responden o hiper sensible. Otro factor importante es el nivel de impacto y la posición del contacto con el labelo, que sería difícil de describir con palabras. Esta presentación en video demuestra todo esto junto con otras mejoras que aumenten la reproducibilidad de este método.

Respuesta trompa de extensión o PER es un ensayo de comportamiento de sabor que se ha utilizado en las moscas, así como en las abejas. Cuando la trompa se pone en contacto con una sustancia atractiva, la mosca se extiende su trompa para consumir la sustancia. Soluciones de diversos azúcares son muy atractivos para la marcha.

Extensión probóscide Respuesta (PER) Ensayo en Drosophila

La respuesta de extensión de la probóscide (PER) es un ensayo de comportamiento gustativo que se ha utilizado tanto en moscas como en abejas melíferas.
En la superficie de la boca de la mosca...

proboscis-extension-response-per-assay-in-drosophila

Research

Investigación

JoVE Journal

Biology

Biología

La grabación simultánea de señales de calcio en neuronas identificadas y comportamiento de alimentación de Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster es un sistema de genética y de comportamiento modelo manejable que se ha utilizado para entender las bases moleculares y celulares de muchos procesos biológicos importantes para más de un siglo 1. Drosophila ha sido bien aprovechado para hacerse una idea de la base genética del comportamiento de las moscas.

Métodos de ensayo a Drosophila Comportamiento

Este video muestra un método para detectar las respuestas de las neuronas sensoriales en Drosophila utilizando imágenes de unión de ligandos y fluorescencia. Los ligandos se unen a los receptores neuronales, causando la afluencia de calcio. El calcio se une a complejos indicadores, lo que conduce a la emisión de fluorescencia, lo que confirma la respuesta neuronal al ligando.

Detección de respuestas fisiológicas de neuronas sensoriales en Drosophila

En este artículo de vídeo, se describe un ensayo automatizado para medir el efecto del hambre o la saciedad en el comportamiento de búsqueda de comida dependiente olfativo en la mosca adulta fruta Drosophila melanogaster.

Un ensayo de una sola mosca por el comportamiento de forrajeo en Drosophila

El protocolo de acondicionamiento de la Respuesta de Extensión de la Probóscide (PER), desarrollado para la abeja melífera (Apis mellifera), proporciona un medio ecológicamente relevante y fácilmente cuantificable para estudiar varios mecanismos diferentes de aprendizaje en muchas especies de insectos.

Un Protocolo de Respuesta de probóscide Extensión para la Investigación de la plasticidad de comportamiento en Insectos: Aplicación a Basic, Biomédica y de Investigación Agrícola

Con el fin de identificar nuevas mutaciones que afectan a la mecanosensación, diseñamos un ensayo que mide la respuesta conductual a la estimulación táctil de las cerdas de mosca en clones mutantes generados por el método MARCM. La combinación de técnicas permite la identificación de mutaciones mecanosensibles que, de otro modo, serían letales.

Un ensayo de conducta para Mechanosensation de clones en MARCM-basa<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Describimos aquí una configuración conductual y un método de análisis de datos para analizar las respuestas olfativas de hasta 100 moscas del vinagre (Drosophila melanogaster). Este sistema puede ser utilizado con estímulos olfativos únicos o múltiples, y adaptable para la activación optogenética o el silenciamiento de subconjuntos neuronales.

Comportamientos olfativas ensayó mediante seguimiento informático de<em&gt; Drosophila</em&gt; En un olfatómetro de cuatro cuadrantes

El objetivo general de este protocolo es demostrar cómo presentar olorosos de baja volatilidad para el registro de un solo sensor de Drosophila neuronas receptoras olfativas que responden a la cadena larga de feromonas cuticulares.

Registro electrofisiológico de<em&gt; Drosophila</em&gt; Tricoide Sensilla en Respuesta a Odorantes de Baja Volatilidad

Este protocolo analiza comportamiento navegación de larva de Drosophila en respuesta a la estimulación simultánea de la optogenetic de sus neuronas olfativas. Luz de longitud de onda de 630 nm se usa para activar las neuronas olfativas individuales expresando una rodopsina canal rojo-cambiado de puesto. Movimiento de larvas al mismo tiempo se realiza un seguimiento grabado digitalmente y analizados utilizando el software de medida.

Seguimiento de comportamiento larvario de Drosophila en respuesta a la estimulación de la Optogenetic de las neuronas olfatorias

El objetivo de este protocolo es mostrar cómo realizar un ensayo mejorado para la nocicepción mecánica en larvas de Drosophila. Utilizamos el ensayo aquí para demostrar que la hipersensibilidad mecánica (alodinia e hiperalgesia) existe en las larvas de Drosophila.

Un ensayo mejorado y herramientas para medir la nocicepción mecánica en larvas de Drosophila

Este artículo presenta métodos para la manipulación optogenética en Drosophila melanogaster, utilizando CsChrimson y GtACR2 para activar y silenciar neuronas específicas. Se describen cuatro experimentos que utilizan la optogenética para explorar los comportamientos termotácticos y gustativos, proporcionando información sobre los mecanismos neuronales subyacentes que gobiernan estos procesos.

Ensayos conductuales para la manipulación optogenética de circuitos neuronales en Drosophila melanogaster

Aprende el ensayo de extensión de probóscide (PER) en Drosophila para estudiar comportamiento gustativo. Este método permite analizar preferencias alimentarias mediante soluciones de azúcar en moscas.

Extensión probóscide Respuesta (PER) Ensayo en Drosophila

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