Novela Aparato y método para el fortalecimiento de Drogas

Este video demuestra un nuevo enfoque para estudiar el abuso de drogas combinando los procedimientos tradicionales de preferencia condicionada al lugar y autoadministración. Primero, se determina la preferencia basal por dos ambientes operantes distintos. Luego comienzan las sesiones de autoadministración, en las cuales las ratas se autoadministran cocaína en solo uno de los ambientes operantes distintivos.

Después del condicionamiento, se mide la cantidad de tiempo que los animales eligen pasar en cualquiera de los entornos operantes; luego se pueden medir y correlacionar los cambios en el lugar, la preferencia y las tasas de autominiestra de drogas. Hola, soy Allison Fiducia del laboratorio de la Dra. Christine Elle en la Facultad de Farmacia, división de farmacología y toxicología de la Universidad de Texas en Austin. Y yo soy Christine Elle.

Hoy queremos mostrarles un aparato novedoso que puede utilizarse de varias formas diferentes para estudiar el refuerzo farmacológico y la adicción en ratas. Utilizamos este procedimiento en nuestro laboratorio para estudiar los efectos condicionantes de la autoadministración de cocaína. Así que comencemos.

Para comenzar los preparativos para experimentos de refuerzo farmacológico, primero entrene ratas macho para presionar una palanca en busca de una recompensa alimenticia. A continuación, construya catéteres intravenosos, que se utilizarán para la autoadministración del fármaco. Los catéteres están hechos de cánula de acero inoxidable y tubo Celeste, y deben lavarse con metanol y agua.

Luego, séquelos al aire durante su preparación el día de la cirugía y báñelos en etanol al 70%. Cuando los catéteres estén terminados, se somete a las ratas a un procedimiento quirúrgico de cateterización yugular para permitir la automedicación con fármacos. Durante los experimentos, anestesie a una rata con isoflurano al dos y medio a 4%.

A continuación, afeite la cabeza y el pecho, desinfecte las áreas con solución de Betadine. Luego colóquelo sobre una almohadilla estéril tras la cirugía. Observe la rata durante varias horas antes de devolverla a la colonia de animales.

Mantenga la permeabilidad del catéter mediante lavados diarios con 0,1 mililitros de una solución salina al 0,9%, heparina y menton para preparar la cocaína utilizada en los experimentos; disuélvala en una solución salina isotónica en las concentraciones de dosis adecuadas según el peso de los animales, con los animales y la administración del fármaco preparados. Veamos el aparato utilizado durante los experimentos. El aparato empleado en los experimentos está compuesto por dos cámaras con palanca individual, equipadas con luces ambientales y luces de estímulo, y tres conjuntos de haces de foto-detectores, que se utilizan para medir la actividad locomotora.

Las cámaras están unidas entre sí mediante un pasillo de plexiglás construido. El pasillo consta de dos paredes negras con rayas blancas y dos paredes metálicas, un techo de plexiglás transparente y un suelo de plexiglás blanco. Las dos cámaras operantes tienen suelos de varillas de rejilla de acero instalados con fondos de jaula metálicos extraíbles.

Se colocan señales visuales y olfativas dentro de la cámara operante para crear entornos únicos y distinguibles. En uno de los entornos, la amenaza tendrá acceso a inyecciones de cocaína. En el entorno alternativo, la amenaza tendrá acceso únicamente a inyecciones de solución salina.

Las señales visuales consisten en material de fieltro blanco o negro fijado a las paredes frontal y trasera y sobre la parte superior de la jaula. Las señales olfativas son un aroma a aceite de clavo o canela impregnado en una bola de algodón ubicada debajo del suelo de rejilla de la cámara. Durante los experimentos, las respuestas de Libra y los datos de actividad locomotora se registran con una computadora Med Pentium de 100 megahercios equipada con software med PC.

Ahora que hemos visto el aparato experimental, veamos cómo recopilar datos. El procedimiento experimental se lleva a cabo durante varios días, comenzando con pruebas de preferencia basal que duran dos días, seguidas de sesiones de automedicación con fármacos que duran ocho o 16 días, y finalizando con una prueba de preferencia condicionada por el lugar. Para comenzar a recopilar mediciones de preferencia basal, coloque la rata en el pasillo central con acceso a ambas cámaras operantes durante 20 minutos.

Inmediatamente después de colocar la rata en la cámara, active simultáneamente el programa de software de la cámara de video med PC y el cronómetro. Tras 20 minutos, retire a la rata de la cámara y devuélvala a su jaula de alojamiento. Al día siguiente de la última prueba de línea base, comience las sesiones de autoadministración del fármaco.

Primero, coloque las señales sensoriales y luego coloque un panel para bloquear el acceso desde el pasillo central de plexiglás hacia la cámara. Ahora conecte la entrada del catéter del animal al jeringa de droga montada para comenzar la sesión. Primero, coloque al animal en la cámara.

Después de cerrar la puerta de la cámara operante, inicie el programa Med PC y el temporizador para que la cocaína esté disponible durante una hora. La cocaína se administra utilizando un programa de refuerzo de razón progresiva. Este programa requiere un número progresivamente mayor de respuestas en la palanca para recibir cada inyección sucesiva de cocaína.

Cada inyección consiste en una dosis de 0,75 miligramos por kilogramo administrada en días alternos. En el entorno alternativo, el programa de relación progresiva también se utiliza para las inyecciones de suero salino. Al final de cada sesión de automedicación, desconecte el envoltorio del tubo de suministro del fármaco, retírelo de la cámara y devuélvalo a la jaula de alojamiento.

Al día siguiente de la última sesión de autoministración, realice la prueba de preferencia condicionada por el lugar. El procedimiento para esta prueba es el mismo que el de las mediciones basales. Ahora veamos cómo evaluar y analizar los datos.

Durante la evaluación de los datos y las asignaciones ciegas de grupos por parte del experimentador, se determina la cantidad de tiempo que el animal pasó en cada compartimento. El experimentador revisa la grabación en video para contar las entradas y salidas entre los compartimentos durante un período de 15 minutos, comenzando cinco minutos después de colocar al animal en el aparato. Se utilizan los mismos procedimientos para determinar la preferencia basal y las puntuaciones del test de CPP.

Las diferencias entre las mediciones basales y los puntajes de CPP posteriores al condicionamiento se utilizan para determinar los efectos del condicionamiento farmacológico. Los puntajes de diferencia posteriores al condicionamiento se calculan restando el tiempo empleado en el compartimento emparejado con la sustancia saliente del tiempo empleado en el compartimento emparejado con la droga durante la prueba de CPP. Los puntajes de diferencia basales se calculan de manera similar y se restan de los puntajes de diferencia de CPP.

Se puede realizar un análisis estadístico sobre los diferentes cambios de puntuación desde la línea base hasta las sesiones de prueba para determinar los efectos del condicionamiento farmacológico. Aquí se muestra un gráfico representativo de las puntuaciones basales y de la prueba de PCC. Las puntuaciones de la prueba de PCC fueron significativamente mayores que las puntuaciones basales, lo que indica una preferencia por el entorno con cocaína.

Después del análisis de correlación condicionado para las respuestas totales de abandono de la droga y las puntuaciones de la prueba de diferencia de preferencia por el lugar se ilustran aquí. El grupo a largo plazo con cocaína fue el único grupo que mostró una correlación positiva significativa entre las respuestas de abandono de la droga y las puntuaciones de la prueba de preferencia por el lugar. Acabamos de mostrarle cómo combinar métodos tradicionales de condicionamiento, preferencia por el lugar y autoadministración para un enfoque novedoso para estudiar el refuerzo por drogas en ratas.

Al realizar este procedimiento, es importante mantener un buen registro de anotaciones. Eso es todo. Gracias por ver este video y buena suerte con sus experimentos.