Novela Aparato y método para el fortalecimiento de Drogas

Este video demuestra un nuevo enfoque en el estudio del abuso de drogas mediante la combinación de la preferencia de lugar condicionada tradicional y los procedimientos de autoadministración. En primer lugar, se determinan las preferencias de referencia para dos entornos operantes distintos. A continuación, comienzan las sesiones de autoadministración en las que las ratas se autoadministran la cocaína en uno solo de los entornos operantes distintivos.

Después del condicionamiento, se mide la cantidad de tiempo que los animales eligen pasar en cualquiera de los ambientes operantes, se pueden medir y correlacionar los cambios en el lugar, la preferencia y las tasas de autoadministración de medicamentos. Hola, soy Allison Fiducia del laboratorio de la Dra. Christine Elle en la Facultad de Farmacia, la división de farmacología y toxicología de la Universidad de Texas en Austin. Y yo soy Christine Elle.

Hoy nos gustaría mostraros un novedoso aparato que se puede utilizar de varias maneras diferentes para estudiar el refuerzo de drogas y la adicción en ratas. Utilizamos este procedimiento en nuestro laboratorio para estudiar los efectos de la autoadministración de cocaína. Así que comencemos.

Para comenzar los preparativos para los experimentos de refuerzo de drogas, primero entrene a ratas macho para que presionen una palanca para obtener una recompensa de comida. A continuación, se construirán catéteres intravenosos, que se utilizarán para la autoadministración de fármacos. Los catéteres están hechos de cánula de acero inoxidable y tubos Celeste y deben lavarse con metanol y agua.

Luego se secan al aire durante su preparación el día de la cirugía, báñelos en etanol al 70%. Cuando se completan los catéteres, las ratas se someten a un procedimiento quirúrgico de cateterismo yugular para permitir la autoadministración del fármaco. Durante los experimentos, anestesia a una rata con un 2,5 a 4% de flúor.

A continuación, afeitar la cabeza y el pecho, desinfectar las áreas con la solución Betadine. Luego colóquelo en una almohadilla estéril después de la cirugía. Monitorea a la rata durante varias horas antes de devolverla a la colonia animal.

Mantener la permeabilidad del catéter mediante lavado diario con 0,1 mililitros de una solución salina al 0,9%, heparina y mentón para preparar la cocaína utilizada en los experimentos, disolverla en una solución salina isotónica en las concentraciones de dosis adecuadas según el peso de los animales con los animales y la administración del fármaco preparados. Echemos un vistazo al aparato que se utiliza durante los experimentos. El aparato utilizado durante los experimentos está construido a partir de dos cámaras de una sola palanca, equipadas con luces de casa y estímulos, y tres conjuntos de fotohaces, que se utilizan para medir la actividad locomotora.

Las cámaras están unidas entre sí por un callejón de plexiglás construido. El callejón consta de dos paredes negras con rayas blancas y dos paredes de metal, una parte superior de plexiglás transparente y un piso de plexiglás blanco. Las dos cámaras operantes tienen pisos de varillas de rejilla de acero instalados en fondos de jaula de metal extraíbles.

Las señales visuales y olfativas se colocan dentro de la cámara operante para crear entornos únicos y distinguibles. En uno de los entornos, la amenaza tendrá acceso a inyecciones de cocaína. En el entorno alternativo, la amenaza solo tendrá acceso a las inyecciones de solución salina.

Las señales visuales consisten en material de fieltro blanco o negro adherido a las paredes delantera y trasera y sobre la parte superior de la jaula. Las señales olfativas son el sentido de las filas a base de aceite o la canela que satura una bola de algodón ubicada debajo del piso de la varilla de la cámara. Durante los experimentos, las respuestas de Libra y los datos de actividad locomotora se registran con una computadora Med Pentium de 100 megahercios equipada con software med PC.

Ahora que hemos visto el aparato experimental, veamos cómo recopilar datos. El procedimiento experimental se lleva a cabo durante varios días, comenzando con pruebas de preferencia basal que duran dos días, seguidas de sesiones de autoadministración de medicamentos que duran ocho o 16 días y terminando con una prueba de preferencia de lugar condicionada. Para comenzar a recolectar las mediciones de preferencia de referencia, coloque a la rata en el callejón central con acceso a ambas cámaras operantes durante 20 minutos.

Inmediatamente después de colocar la rata en la cámara, active simultáneamente el programa de software y el temporizador de la cámara de video para PC. Después de 20 minutos, retira a la rata de la cámara y vuelve a colocarla en la jaula de casa. Al día siguiente de la última prueba basal, iniciar sesiones de autoadministración de fármacos.

Primero, coloque las señales sensoriales y luego coloque un panel para bloquear el acceso desde el callejón central de plexiglás a la cámara. Ahora conecte la entrada del catéter del animal a la jeringa de fármaco montada para iniciar la sesión. Primero, coloque el animal en la cámara.

Después de cerrar la puerta de la cámara de operaciones, inicie el programa med PC y el temporizador para que los accesos de cocaína estén disponibles durante una hora. La cocaína se administra mediante un programa de proporción progresiva de refuerzo. Este cronograma requiere progresivamente más respuestas de palanca para recibir cada inyección sucesiva de cocaína.

Cada inyección consiste en una dosis de 0,75 miligramos por kilogramo en días alternos. En el entorno alternativo, el programa de proporción progresiva también se utiliza para las inyecciones de solución salina. Al final de cada sesión de autoadministración, desconecte la envoltura del tubo del medicamento, retírela de la cámara y vuelva a colocarla en la jaula de la casa.

Al día siguiente de la última sesión de autoadministración, realizar la prueba de preferencia de lugar condicionada. El procedimiento para esta prueba es el mismo que las mediciones de referencia. Ahora veamos cómo evaluar y analizar los datos.

Durante la evaluación de los datos y las asignaciones de grupos ciegos del experimentador, se determina la cantidad de tiempo que el animal pasó en cada compartimento. El experimentador revisa la cinta de video para contar las entradas y salidas entre los compartimentos durante un período de 15 minutos, comenzando cinco minutos después de la colocación dentro del aparato. Los mismos procedimientos que se utilizan para determinar la preferencia inicial y los puntajes de las pruebas CPP.

Las diferencias entre las mediciones basales y las puntuaciones de CPP posteriores al acondicionamiento se utilizan para determinar los efectos del condicionamiento del fármaco. Las puntuaciones de diferencia posterior al condicionamiento se calculan restando la cantidad de tiempo que se pasa en el compartimento emparejado saliente de la cantidad de tiempo que se pasa en el compartimento emparejado del fármaco durante la prueba de PPC. Las puntuaciones de diferencia de referencia se calculan de forma similar y se restan de las puntuaciones de diferencia de CPP.

Se puede realizar un análisis estadístico sobre los diferentes cambios en las puntuaciones desde el inicio hasta las sesiones de prueba para determinar los efectos del condicionamiento farmacológico. Aquí se muestra un gráfico representativo de los puntajes de las pruebas de referencia y CPP. Las puntuaciones de la prueba de PPC fueron significativamente mayores que las puntuaciones iniciales, lo que indica una preferencia por el entorno de la cocaína.

Después del condicionamiento, aquí se ilustra el análisis de correlación para las respuestas totales de abandono del fármaco y las puntuaciones de las pruebas de diferencia de CPP. El grupo de cocaína a largo plazo fue el único que mostró una correlación positiva significativa entre las respuestas de abandono de la droga y las puntuaciones de las pruebas de PPC. Acabamos de mostrarle cómo combinar los métodos tradicionales de condición, preferencia de lugar y autoadministración para un enfoque novedoso para estudiar el refuerzo de fármacos en ratas.

Al realizar este procedimiento, es importante mantener un buen mantenimiento de registros. Así que eso es todo. Gracias por mirar y buena suerte con tus experimentos.