Drosophila Ensayo de excavación y tunelización: un método para evaluar la hipoxia tisular en larvas de mosca

- Para montar la jaula de recolección de embriones, utilice placas de agar zumo de uva suplementadas con pasta de levadura fresca y coloque las placas en jaulas que contengan moscas Drosophila macho y hembra del genotipo adecuado. El olor de la levadura y el jugo de uva es atractivo y promueve la puesta de huevos por parte de las hembras. Permita la puesta de huevos durante un período cronometrado. A continuación, retire los adultos e incube las placas embrionarias durante 24 horas para obtener las larvas del primer estadio. Luego, transfiera suavemente algunas larvas individuales del plato de jugo de uva a una placa de prueba de solo agar donde se cortó un agujero en el agar en el centro del plato y se llenó con pasta de levadura.

Las larvas jóvenes deben alimentarse para ganar peso corporal y desarrollarse, por lo que excavan en la fuente de alimento, la pasta de levadura. A medida que se desarrollan, las larvas entran en una fase de deambulación y se alejan de la comida para buscar un sitio para la pupa. Para evaluar la hipoxia, examine los patrones de tunelización que forman las larvas en el sustrato. La falta o insuficiencia de túneles es un signo de privación de oxígeno. En e