Test de preferencia claro-oscuro: un método para estudiar el comportamiento relacionado con la ansiedad en el pez cebra

0 vistas4:45 min • April 30th, 2023

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- Primero, cree un recinto de tres lados alrededor del área de prueba para minimizar los estímulos externos que puedan afectar el comportamiento de los peces. Configure una iluminación difusa en el techo para evitar los reflejos de la superficie del agua. A continuación, llene la arena, que está dividida en zonas oscuras y claras, con el agua del hábitat mantenida a 28 grados centígrados.

Coloca la arena en el recinto. Mantenga el tanque de hábitat, que contiene los peces que se van a analizar, fuera del recinto. Deja que los peces se aclimaten para reducir su estrés.

Ahora, atrape suavemente un pez del tanque de hábitat y colóquelo en el tanque de prueba. Coloque el pez perpendicular a los lados largos de la arena para evitar el sesgo hacia cualquiera de las zonas. Observe el comportamiento de los peces utilizando un software de grabación y repita la prueba para el resto de los peces. Mide el tiempo promedio que pasa cada pez en las zonas claras y oscuras.

Los peces cebra tienden a pasar más tiempo en la zona oscura cuando están ansiosos. En el protocolo de ejemplo, realizaremos una prueba de luz-oscuridad para observar el efecto de la exposición al etanol en el comportamiento del pez cebra.

- Obtener una arena clara-oscura de 9 y 1/2 centímetros de ancho por 55 centímetros de largo y 9 y 1/2 centímetros de profundidad con un piso impermeable blanco. Pega papel blanco y negro impermeable y no reflectante en las paredes interiores de la arena con velcro, con la mitad de la arena cubierta de blanco y la otra mitad cubierta de negro. Llene la arena hasta una profundidad de 5 centímetros con agua de hábitat a una temperatura de 25 a 28 grados centígrados. Mantenga esta temperatura durante toda la prueba.

Minimice los estímulos visuales externos construyendo un recinto blanco de tres lados para colocar la arena. Asegúrese de que el área de prueba tenga una iluminación superior difusa que no cause reflejos en la superficie del agua, pero que sea lo suficientemente brillante para el software de seguimiento de movimiento o la cuantificación manual post hoc a partir de imágenes de video. A continuación, configure los parámetros de registro y análisis de movimiento del software de seguimiento del comportamiento con una duración de prueba de 5 a 15 minutos, dependiendo de la pregunta de investigación.

Transporta el grupo de peces que se van a analizar al área de investigación en el tanque de hábitat y colócalos fuera del recinto de la arena. Deje que el pez se aclimate durante 10 minutos. Atrape suavemente un pez del grupo apropiado y colóquelo en el centro de la arena clara-oscura, soltando cada pez cuando se coloque paralelo al eje largo de la arena para evitar sesgar el pez hacia la zona clara u oscura.

Comience a registrar el comportamiento inmediatamente después de que se libere al animal. Esté atento a cualquier problema de software con el seguimiento de los peces o si los peces saltan o se congelan. Una vez finalizada la prueba, retírelos suavemente con una red y retírelos de la arena a un tanque de retención o tanque de hábitat. Gire la arena 180 grados después de que la mitad de los sujetos hayan sido evaluados para evitar confusiones debidas a los sesgos resultantes de qué extremo de la arena está orientado hacia el extremo abierto del recinto.

Comience el análisis examinando el tiempo que pasa en las zonas claras frente a las oscuras. Para cada grupo y para cada pez, obtenga el tiempo relativo que pasa en las zonas claras y oscuras y analice utilizando una prueba t de una muestra para determinar si los grupos prefieren significativamente un área sobre la otra. Para comparar las preferencias, calcule un índice de preferencias restando el tiempo que se pasa en la zona clara del tiempo que se pasa en la zona oscura y compare las diferencias entre los grupos mediante pruebas t. Compare varios grupos con un análisis de varianza unidireccional, utilizando la prueba post hoc de diferencias significativas honestas de Tukey cuando sea necesario.

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Última actualización: 1 agosto 2026