Ablación hepática dirigida: inducción de la muerte de hepatocitos con metronidazol en larvas transgénicas de pez cebra

- Disuelva el metronidazol en agua de huevo que contenga DMSO, un solvente, y agregue feniltiourea, que evita la formación de pigmento en los embriones. Transfiera algunas larvas de la edad adecuada a las placas de tratamiento y control. A continuación, agregue la concentración deseada de la solución de metronidazol a la placa de prueba y agua de huevo que contenga DMSO a la placa de control.

Deje que las larvas de ambas placas crezcan a 28 grados centígrados. Las larvas transgénicas producen nitroreductasa solo en los hepatocitos, lo que convierte el metronidazol en un fármaco citotóxico, lo que resulta en la muerte de los hepatocitos objetivo. Después del tratamiento, retire la solución de metronidazol de la placa de tratamiento y lave los embriones con agua de huevo.

Agregue tricaína para anestesiar las larvas y examínelas bajo un microscopio de epifluorescencia para la ablación grave de hepatocitos, la destrucción de las células hepáticas. Observará un hígado mucho más pequeño en los individuos tratados que en los individuos del grupo de control. En el protocolo de ejemplo, utilizaremos metronidazol para la ablación de hepatocitos en larvas de pez cebra transgénicas para estudi