Optogenética del pez cebra: activación de neuronas somatosensoriales modificadas genéticamente para estudiar las respuestas conductuales de las larvas

- En las larvas de pez cebra, un estímulo visual puede activar las neuronas somatosensoriales y desencadenar una respuesta de escape. Hay dos tipos de neuronas de este tipo que se encuentran en la larva, las neuronas del trigémino y las neuronas de Rohon-Beard. Podemos manipular la actividad de estas neuronas modificándolas para que expresen canales iónicos transgénicos sensibles a la luz. Este enfoque se denomina optogenética.

Para realizar esta técnica, se monta una larva transgénica con la cara dorsal hacia arriba en gel de agarosa y se coloca bajo un microscopio de disección. Use una hoja de afeitar para separar una porción en forma de cuña de agarosa alrededor de la yema y la cola. Llena esta área con agua de huevo. Retira la agarosa del tronco y la cola de la larva.

Coloque la punta de un cable óptico cerca del tronco donde se encuentra el cuerpo celular de la neurona de Rohon-Beard. Emite un pulso de luz láser azul. Al exponerse a la luz azul, los canales iónicos transgénicos sensibles a la luz en la membrana de la neurona se abren, permitiendo que los iones ingresen, desencadenando un potencial de acción que provoca la respuesta de escape. Graba el comportamiento de la larv