Microinyección de embriones: una técnica para introducir un compuesto en la yema del pez cebra

- Coloque dos peces hembra y dos machos en un tanque de cría dividido una noche antes de la inyección. A la mañana siguiente, retire el divisor y deje que los peces se reproduzcan hasta que observe huevos en el fondo del tanque. Recoge los huevos y lávalos con un medio E3 que contenga azul de metileno, un fungicida. Observe los huevos bajo un microscopio y extraiga los huevos no fertilizados. Los huevos no fertilizados tienen una membrana vitelino transparente, mientras que los huevos fertilizados tienen una membrana vitelino oscura.

Mantenga 10 embriones en una placa de Petri separada como controles sin inyectar. Con una pipeta de transferencia, alinee los embriones en el canal de una placa de microinyección a temperatura ambiente y colóquela bajo el microscopio. Empuje suavemente la aguja de microinyección a través del corion hacia la yema e inyecte lentamente un compuesto de interés que contenga un marcador como el rojo de fenol. El flujo citoplasmático permite que el compuesto se difunda en las células embrionarias.

Después de la inyección, cultive los embriones en medio E3 con azul de metileno a 28 grados centígrados. Sigue controlando la salud de los embriones. Retire los emb