Name: Ortotópico patas traseras trasplante en ratas (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-07-12T17:40:00.000+00:00
Duration: 14 min 3 s
Description: Aprende el trasplante ortotópico de miembros posteriores en ratas usando la técnica de manguito para revascularización. Este modelo permite estudiar lesiones por isquemia-reperfusión y eventos inmunológicos del rechazo de aloinjertos.

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Operación de los donantes y los miembros traseros cosecha <ol><li> Para el procedimiento quirúrgico estéril de un conjunto de instrumentos de microcirugía se utiliza. El cirujano debe usar ropa adecuada, guantes estériles, lo que tiene que ser cambiado antes del inicio del procedimiento quirúrgico. </li><li> La rata se anestesiaron con una inyección intraperitoneal de pentobarbital (50mg/kg IP) y se coloca en posición supina sobre un campo de operación de calefacción, lo que facilita una temperatura corporal del animal estable a lo largo de todo el procedimiento quirúrgico. </li><li> Antes de la incisión en la piel el campo de la operación es desinfectado tres veces cada uno con dos, un desinfectante y alcohol. Para evitar que las córneas animales de la desecación, los ojos están lubricados con un ungüento oftálmico (Vidisic) antes de la cirugía. </li><li> Una incisión en la piel se realiza a través de la ingle derecha aproximadamente a nivel del ligamento inguinal. Los vasos femorales se disecan con cauterio bipolar y disección roma, ramas profundas se ligan con seda 8-0. </li><li> 300μl (50 UI) de heparina se inyecta a través de la vena del pene para la anticoagulación. </li><li> Vasos femorales se ligan a nivel del ligamento inguinal y corte distal a la ligadura. </li><li> La extremidad posterior se lava con helado (4 ° C) solución HTK (5 ml) a través de la arteria femoral durante 5 minutos. </li><li> Todos los grupos musculares están muy divididos con unas tijeras y la osteotomía se realiza con una rotación eléctrica vio a nivel del tercio distal del fémur. </li><li> El miembro cosecha se sumerge en 20 ml de helado de solución HTK para la preservación y almacenamiento en frío hasta el trasplante. </li></ol> Receptor de operación y Trasplante <ol><li> La rata se anestesiaron con una inyección intraperitoneal de pentobarbital en posición supina y se coloca en el campo de operación. </li><li> Una incisión en la piel se realiza a través de la ingle derecha aproximadamente a nivel del ligamento inguinal. Los vasos femorales se disecan con cauterio bipolar y disección roma. </li><li> Vasos femorales se ligan como distal como sea posible, pero próximo al despegue los vasos epigástricos. Clamps vasculares se colocan a nivel del ligamento inguinal en la arteria y la vena. </li><li> Un manguito de polietileno se coloca sobre la arteria (diámetro interior del manguito: 0.912 mm, espesor de la pared del manguito: 0.010 mm, la longitud del manguito: 2.0 mm) y la vena (diámetro interior del manguito: 1.151 mm, espesor de la pared del manguito: 0.010 mm, la longitud del manguito : 2,0 mm). El borde de la luz del vaso se tira con un dilatador buque y de la arteria femoral y la vena se eversión en todo el cuerpo de la banda (de aproximadamente 2 mm) y se fija con una ligadura de seda 8-0 circunferencial. </li><li> Para dejar espacio a la extremidad del miembro donante receptor se elimina con disección aguda de los grupos musculares y la osteotomía se realiza a mediados de fémur. </li><li> La extremidad de los donantes se retiran de la solución HTK y el trasplante comienza con la osteosíntesis de fémur con una aguja de calibre 18 (longitud: 1,5 a 2,0 cm) como una varilla intramedular. </li><li> Grupos de músculos ventrales son muy aproximados con Vicryl 4-0 o Prolene suturas interrumpidas. </li><li> Anastomosis vasculares se realizan tirando de la vena y la arteria de los donantes sobre la vena destinatarios y complejas del manguito. Una circunferencia 8-0 ligadura de seda se coloca de nuevo para asegurar la anastomosis. </li><li> La pinza venosa es lanzado, seguido de la pinza arterial, y la reperfusión se visualiza por el regreso de color en la extremidad distal de pies y manos, así como el flujo pulsátil a través de la arteria. </li><li> El resto de los grupos musculares dorsales se vuelven a aproximarse con Vicryl 4-0 o Prolene suturas interrumpidas. </li><li> La piel se cierra con Vicryl 4-0 o prolene suturas interrumpidas. </li><li> La rata receptor se coloca en una almohadilla eléctrica y vigilarse estrechamente hasta su recuperación. </li><li> Los animales receptores que reciban antibióticos profilácticos (cefazolina, 20 mg / día, IM) y Buprenex (0,1 mg / kg, SC) durante tres días después del trasplante. </li></ol>

<ol><li>Shapiro, R. I., Cerra, F. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+reimplantation+and+transplantation+of+a+complex+organ%3A+the+rat+hind+limb%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">A model for reimplantation and transplantation of a complex organ: the rat hind limb.</a> J Surg Res. 24 (6), 501-506 (1978).</li>
<li>Petruzzo, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+international+registry+on+hand+and+composite+tissue+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The international registry on hand and composite tissue transplantation.</a> Transplantation. 86 (4), 487-492 (2008).</li>
<li>Schneeberger, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+forearm+transplantation%3A+outcome+at+3+years%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">First forearm transplantation: outcome at 3 years.</a> Am J Transplant. 7 (7), 1753-1762 (2007).</li>
</ol>

Décadas de investigaciones experimentales han precedido y ha permitido el éxito del trasplante mano humana en el pasado reciente. En 1978, Shapiro et al. desarrollado un modelo ortotópico de trasplante de extremidades traseras de las ratas, muy adecuado para estudiar diversos aspectos patológicos, fisiológicos e inmunológicos, así como el resultado funcional de los injertos de tejidos compuestos. Hemos modificado la parte más difícil del procedimiento, a saber, la anastomosis vascular, mediante la introducción de una té...

<table><tbody><tr><td>Nembutal&amp;#174;</td><td>OVATION Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Heparina Immuno</td><td>Ebewe Pharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solución Custodiol HTK</td><td>Essential Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tijeras para adventicia</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;SAS-21 R-8T</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;JFC-7</td><td></td></tr><tr><td>Pinzas dilatadoras</td><td>ASSI</td><td>ASSI&amp;#174;D-5AZ</td><td></td></tr><tr><td>Tubos de poliamida</td><td>River Tech Medical</td><td>#17; #19</td><td></td></tr></tbody></table>

ortotópico patas traseras trasplante en ratas

Orthotopic Hind-Limb Transplantation in Rats

Alotrasplante de tejido compuesto (CTA) representa una opción terapéutica válida después de la pérdida de una mano, el antebrazo o dígitos y se ha convertido en una entidad terapéutica novedosa en cirugía reconstructiva. Sin embargo, a largo plazo de dosis altas a múltiples fármacos inmunosupresores es necesaria para garantizar la supervivencia del injerto, que asumen el riesgo de efectos secundarios graves que cabestros una aplicación más amplia. Progresión en este campo puede depender de una mejor comprensión de la inmunología básica y la lesión por isquemia reperfusión en injertos de tejido compuesto. Hasta la fecha, el trasplante ortotópico de las extremidades posteriores en ratas ha sido el modelo de preferencia entre los roedores de reconstrucción del trasplante (TR), sin embargo, es un procedimiento muy exigente que requiere habilidades extraordinarias de microcirugía para la reinserción de los vasos, huesos, músculos y nervios. Hemos introducido la técnica del manguito de anastomosis vascular de este modelo, proporciona un enfoque rápido y fiable para el trasplante de las extremidades posteriores de ratas. Esta técnica simplifica y acorta el procedimiento quirúrgico y permite a los cirujanos con experiencia en microcirugía básica para llevar a cabo con éxito la operación con la supervivencia y bajas tasas de complicación. La técnica parece ser muy adecuado para inmunológica, así como estudios de isquemia reperfusión (IRI).

A continuación se describe la rata ortotópico patas traseras procedimiento de trasplante, lo que parece ser el estándar de oro<em&gt; In vivo</em&gt; Modelo para la investigación compuesto alotrasplante de tejido.

Ortotópico patas traseras trasplante en ratas

El alotrasplante de tejido compuesto (ATC) representa actualmente una opción terapéutica válida tras la pérdida de una mano, un antebrazo o de los dedos, y se ha convertido en una novedosa...

Soy Robert Suha del Laboratorio de Investigación Daniels Roski del Departamento de Trasplante Visceral y Cirugía Torácica de la Universidad Médica de Innsbrook. Hoy les mostraremos el procedimiento del trasplante de extremidad he, introduciendo una técnica de manguito para la revascularización. Esta cirugía de trasplante de extremidad he es realizada por nuestros residentes quirúrgicos, incluyéndome a mí.Utilizamos este modelo animal para estudiar lesiones asociadas con isquemia y reperfusión en un injerto alogénico de tejido compuesto. Además, empleamos este procedimiento para investigar los eventos inmunológicos del rechazo de injertos alogénicos de tejido compuesto, así como estrategias para prevenir dicho rechazo. Estas estrategias incluyen la minimización o incluso la evitación de la inmunosupresión de mantenimiento mediante el uso de regímenes inmunomoduladores dirigidos.El procedimiento de trasplante del miembro trasero rojo comienza con la obtención del injerto de tejido compuesto del donante, en el cual se extrae la pata trasera derecha de la rata donante y se almacena en hielo. A continuación, se elimina la pata trasera derecha de la rata receptora para dejar espacio para

orthotopic-hind-limb-transplantation-in-rats

Research

Investigación

JoVE Journal

Immunology and Infection

Inmunología e Infección

Se presenta una revisión fácil de establecer de la clásica banda de dos técnicas para el trasplante ortotópico de hígado en ratas.

Trasplante ortotópico de hígado en ratas

Trasplante ortotópico de hígado en ratas es un modelo experimental indispensable para la investigación biomédica. A continuación les presentamos nuestros procedimientos quirúrgicos de trasplante ortotópico de hígado de rata con la reconstrucción arterial hepática mediante un injerto parcial del 50%.

Procedimientos Quirúrgicos para un modelo de rata de trasplante hepático ortotópico parcial con reconstrucción arterial hepática

Este modelo novedoso para posterior trasplante ortotópico extremidad en el ratón, la aplicación de una técnica de manguito no de sutura para la anastomosis super-microvascular, proporciona una herramienta poderosa para la investigación inmunológica in vivo mecanicista relacionada con alotrasplante compuesto vascularizado (VCA).

Ortotópico de la extremidad posterior de trasplante en el ratón

El aloinjerto compuesto vascularizado ofrece beneficios que alteran la vida a los receptores de trasplante, pero las causas biológicas del rechazo del injerto y la vascutropatía permanecen poco comprendidas. El modelo quirúrgico de roedores presentado aquí ofrece un modelo reproducible, clínicamente relevante de trasplante, permitiendo a los investigadores evaluar eventos de rechazo y posibles estrategias terapéuticas para prevenir su ocurrencia.

Modelo de colgajo Osteomiocucutáneo de extremidades posteriores modificados en la rata para investigación de compuestos alotransplante de compuesto translacional vascularizado

Este protocolo presenta un modelo robusto y reproducible de alotrasplante compuesto vascularizado (VCA) orientado al estudio simultáneo de la inmunología y la recuperación funcional. El tiempo invertido en la técnica meticulosa en un trasplante ortotópico de las extremidades traseras de la parte media derecha con anastomosas vasculares cosidas a mano y coaptación neuronal produce la capacidad de estudiar la recuperación funcional.

Dar el siguiente paso: un modelo de trasplante de extremidades hindópicos ortotópicos de coaptación neuronal para maximizar la recuperación funcional en rata

Describimos un modelo de trasplante de corazón abdominal heterotópico en ratas, lo que implica modificaciones de las estrategias actuales, que conducen a un enfoque quirúrgico simplificado. Además, describimos un nuevo modelo de rechazo mediante inyección en la oreja de células musculares cardíacas vitales, permitiendo análisis inmunológicos de trasplante adicionales en ratas.

Un modelo inmunológico para el trasplante heterotópico de células musculares cardíacas y cardíacas en ratas

Este trabajo presenta un protocolo de trasplante de colgajo osteomiocutáneo heterotópico parcial en ratas y sus posibles resultados en el seguimiento a medio plazo.

Modelo de trasplante parcial de extremidades posteriores heterotópicas en ratas

Este protocolo describe una técnica mejorada para el trasplante ortotópico de pulmón izquierdo en ratas, centrándose en la reducción de la dificultad operativa y la mejora de las tasas de supervivencia.

Trasplante ortotópico de pulmón izquierdo en ratas

Este protocolo demuestra cómo realizar una amputación por debajo de la rodilla en ratas y realizar inmediatamente la inervación muscular dirigida (iTMR) para investigar estrategias que traten y previenen el dolor relacionado con la amputación y para comprender mejor los mecanismos del dolor asociados a la amputación.

Modelo de amputación de la extremidad posterior de rata por debajo de la rodilla y reinervación muscular dirigida inmediata

Presentamos un modelo reproducible de ratón de alotrasplante compuesto vascularizado de extremidades posteriores a cuello heterotópico. Este protocolo supermicroquirúrgico, que implica anastomosis de vasos de 0,3-0,5 mm, integra guía con filamento de nailon y esposas venosas. Proporciona una plataforma fiable para estudios traslacionales sobre tolerancia, lesiones por isquemia-reperfusión y mecanismos inmunológicos en alotrasplantes compuestos vascularizados.

Trasplante heterotópico de extremidad posterior a cuello en ratón: un modelo supermicroquirúrgico de alotrasplante compuesto vascularizado

Aprende el trasplante ortotópico de miembros posteriores en ratas usando la técnica de manguito para revascularización. Este modelo permite estudiar lesiones por isquemia-reperfusión y eventos inmunológicos del rechazo de aloinjertos.

Ortotópico patas traseras trasplante en ratas

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