Ensayo de formación de esferas: un método in vitro para identificar células madre de cáncer de páncreas y terapias de detección

- El adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) contiene un subconjunto de células madre cancerosas (CSC) exclusivamente tumorigénicas. Las CSC son autorrenovables, pluripotentes y capaces de formar tumores. Expresan proteínas antiapoptóticas y también contienen genes multirresistentes, lo que los hace resistentes a la quimioterapia. Para identificar las células madre cancerosas y estudiar el efecto de los fármacos sobre ellas, realizamos un ensayo de formación de esferas.

Primero, suspenda las células madre cancerosas extraídas en el medio de cultivo celular deseado. A continuación, siembre la suspensión celular en una placa de pocillos múltiples e incube durante el tiempo deseado. Agregue una cantidad requerida de medicamento de interés en algunos pocillos y placebo en otros pocillos como control negativo. Incuba las células durante el tiempo deseado. Las células madre cancerosas forman colonias en forma de esfera en un entorno de cultivo no adherente.

Después de la incubación, pipetee una pequeña cantidad de suspensión celular en un hemocitómetro y colóquelo en un contador de células automatizado. Ahora, cuenta el número de esferas formadas. Las células tratadas con fármacos suele