Cultivo rápido de melanocitos y fibroblastos murinos primarios: aislamiento de melanocitos y fibroblastos de muestras de piel murina completa

- La piel está formada por varias células que pueblan sus diferentes capas. Los melanocitos, las células productoras de melanina, se localizan en la unión epidérmico-dérmica, mientras que los fibroblastos, las células generadoras de tejido conectivo, residen en la dermis.

Para aislar rápidamente los melanocitos y los fibroblastos, comience por tomar el tronco de una cría de ratón sacrificada. Corta la piel ventralmente a lo largo del tronco. Retire la piel que contiene la capa epidérmica y dérmica y pique el tejido en trozos pequeños.

Ahora, trate con un tampón para la digestión que contenga tripsina y enzimas colagenasa que degradan la matriz extracelular, liberando las células en suspensión. Centrífuga para peletizar las células y desechar el sobrenadante. Vuelva a suspender las células en medios de melanocitos y transfiera la suspensión a una placa de pocillos múltiples.

Durante el cultivo, la mayoría de los fibroblastos se adhieren al fondo del pocillo, mientras que los melanocitos y otras células epidérmicas permanecen en suspensión. Aspire las células suspendidas y agregue medios específicos de fibroblastos al cultivo de fibroblastos para promover su crecimiento. Transfiera l